本发明专利技术关注特异性结合最近发现的巨噬细胞特异性受体ＣＲＩｇ的阻断性抗体，及其预防细胞内病原体（诸如病毒、细菌或寄生虫）进入细胞以及预防不希望的红细胞和血小板清除的用途。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】CRIg拮抗剂 专利
本专利技术关注特异性结合最近发现的巨噬细胞特异性受体CRIg的阻断性 抗体，及其预防细胞内病原体(诸如病毒、细菌或寄生虫)进入细胞以及预 防不想要的红细胞和血小板清除的用途。
技术介绍
补体系统补体系统是由正常情况下以无活性的酶原形式存在的 一 系列血清糖蛋 白构成的复杂酶级联。两种主要途径，即经典途径和旁路途径，能活化补体， 它们在C3水平合并，其中两种类似的C3转化酶将C3切割成C3a和C3b。巨噬细胞是已经发展出如下先天能力的专门细胞，即识别细胞表面表达 的鉴定标签的结构中的微小差异，所述的鉴定标签即所谓的分子样式(Taylor 等，Eur J Immunol 33， 2090-2097 (2003); Taylor等，Annu Rev Immunol 23， 901-944 (2005))。虽然这些表面结构的直接识别是先天免疫的一个基础方面， 但是调理作用容许通用巨噬细胞受体介导吞食，提高效率和使吞噬细胞的识 别全集多样化(Stuart和Ezekowitz， Immunity 22, 539-550 (2005))。吞食过程涉 及多种配体-受体相互作用，而且现在清楚了多种调理素(包括免疫球蛋白、 胶原凝集素、和补体成分)经由与巨噬细胞表面受体的相互作用来引导病原 体内在化所需要的细胞活性(综述见Aderem和Underhill， Annu Rev Immunol 17, 593-623 (1999); Underhill和Ozinsky, Annu Rev Immunol 20, 825-852 (2002》。虽然由种系基因编码的天然免疫球蛋白能识别极其多种病原体，但 是大多数调理性IgG是经由适应性免疫生成的，而且因此经由Fc受体的高效 清除不是立即的(Carroll, Nat Immunol 5, 981-986 (2004))。另一方面，补体快 速识别病原体表面分子并使微粒准备好由补体受体来摄取(Brown, Infect Agents Dis 1,63-70(1991))。补体由30种以上的血清蛋白质组成，它们调理极其多种病原体，用以被 补体受体所识别。取决于级联的初始触发，可区别三种途径(综述见Walport， N4Engl J Med 344, 1058-1066 (2001))。所有这三种途径共享活化中枢成分C3的 共同步骤，但是它们依据识别的本质和导致C3活化的初始生化步骤而不同。 经典途径如下活化，抗体结合至病原体表面，其继而结合Clq补体成分，引 起一系列蛋白酶级联，最终将C3切割成其活性形式C3b。凝集素途径在碳水 化合物基序受到凝集素蛋白质识别后被活化。至今，已经鉴定了此途径的三 个成员结合甘露糖的凝集素(MBL)， SIGN-Rl凝集素家族和ficolin (Pyz等， Ann Med 38， 242-251 (2006))。 MBL和ficolin都与丝氨酸蛋白酶有关，其像经 典途径中的C1那样起作用，活化成分C2和C4，导致中枢C3步骤。旁路条件 与经典条件和凝集素途径二者形成对照，即它是由于内部C3酯与病原体表面 上的识别基序的直接反应而被活化的。经由旁路途径蛋白酶因子B和因子D 的作用，初始C3结合活化性表面导致C3b沉积的快速扩大。重要的是，经由 因子B和D的作用，通过经典途径或凝集素途径任一所沉积的C3b也能导致 C3b沉积的扩大。在补体活化的所有三种途径中，调理中的关键步骤是成分 C3转化成C3b。补体级联的酶对C3的切割将硫酯暴露于亲核攻击，容许C3b 经由硫酯结构域共价附着到抗原表面上。这是补体调理中的初始步骤。对所 结合的C3b的后续蛋白水解生成iC3b、 C3c和C3dg,即受到不同受体识别的 片段(Ross和Medof, Adv Immunol 37， 217-267 (1985))。此切割消除了 C3b进一 步扩大C3b沉积和活化补体级联晚期成分(包括能够指导膜破坏的膜攻击复 合物)的能力。然而，巨噬细胞的吞噬细胞受体优先识别C3b及其片段；由 于酯键形成的通用性，C3介导的调理对于病原体识别是重要的(Holers等， Immunol Today 13,231-236(1992))，而且各种C3降解产物的受体因此在宿主 免疫应答中发挥重要作用。C3自身是由13个独特结构域组成的复杂的且有柔性的蛋白质。该分子的 核心由8个所谓的巨球蛋白(MG)结构域构成，它们构成了C3的紧密压缩的cc 和(3链。插入此结构的是CUB (Clr/Cls、 Uegf和骨形态生成蛋白-l )和TED 结构域，后者含有容许C3b与病原体表面共价结合的硫酯键。剩余结构域含 有C3a，或者作为核心结构域的接头和间隔物起作用。C3b和C3c结构与C3 的比较证明了该分子在每次蛋白水解时经历重大构象重排，不仅暴露TED， 而且暴露了该分子的能与细胞受体相互作用的别的新的表面(Janssen和Gros， Mol Immunol 44, 3-10 (2007》。吞噬细胞上的补体C3受体有三个已知的补体受体基因超家族短共有重复(SCR)模块(其编码CR1 和CR2)， P-2整联蛋白家族成员CR3和CR4，及免疫球蛋白Ig超家族成员 CRIg。CR1是由30个短共有重复(SCR)组成的180-210 kDa糖蛋白，在免疫复合 物清除中发挥主要作用。SCR是约60个氨基酸的模块结构，每个有两对二硫 键，提供结构刚性。对C3b和C4b二者的高亲和力结合经由两个独特位点发 生，每个由3个SCR构成(综述见Krych-Goldberg和Atkinson, Immunol Rev 180, 112-122(2001》。CR1的SCR 15-17内所包含的C3b结合位点(位点2 )的结构 已经通过MRI测定(Smith等，Cell 108, 769-780 (2002))，揭示了三个模块处于 延伸的头对尾排列中，在16-17连接处有柔性。结构指导的诱变鉴定了模块 15上对C4b结合至关重要的一个带正电荷的表面区域。此片与CR1同一面上 暴露的模块16的碱性侧链一起是C3b结合所需要的。CR1的主要功能，首先 描述为免疫粘附受体(Rothman等，J Immunol 115, 1312-1315 (1975)),用以捕 捉红细胞上的IC，供转运和肝的清除(Taylor等，Clin Immunol Immunopathol 82,49-59(1997))。嗜中性细胞上的CR1在吞噬中有作用，但是在组织巨噬细 胞中不然(Sengelov等，J Immunol 153， 804-810 (1994))。在其在免疫复合物清 除中的作用之外，经由其与相应转化酶的相互作用，CRl是经典途径和旁路 途径二者活化的有力抑制剂(Krych-Goldberg和Atkinson, 2001,见上文； Krych-Goldberg等，JBiolChem274，31160-31168 (1999))。在小鼠中，CRl和 CR2是同 一基因通过可变剪接形成的两种产物，主要与B淋巴细胞和滤泡树 突细胞有关，且主要在调节B细胞应答中发挥功能(Molina等，1996)。 CRl的 小鼠功能等效物本文档来自技高网...
【技术保护点】
ＣＲＩｇ拮抗剂，且阻断天然序列ＣＲＩｇ多肽结合Ｃ３ｂ和／或ｉＣ３ｂ，并抑制ＣＲＩｇ介导的、细胞内病原体的补体依赖性细胞进入或自循环清除细胞内病原体。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2007-5-1 60/915,3401.CRIg拮抗剂，且阻断天然序列CRIg多肽结合C3b和/或iC3b，并抑制CRIg介导的、细胞内病原体的补体依赖性细胞进入或自循环清除细胞内病原体。2. 权利要求l的CRIg拮抗剂，其是抗CRIg抗体或其片段。3. 权利要求2的CRIg拮抗剂，其是单克隆抗体或其片段。4. 权利要求3的CRIg拮抗剂，其中所述抗体片段选自下组Fab， Fab，， F(ab，)2， scFv, (scFv)2， dAb,互补决定簇区(CDR)片段，线性抗体，单 链抗体分子，微抗体，双抗体，和自片段抗体形成的多特异性抗体。5. 权利要求3的CRIg拮抗剂，其是本质上与选自下组的抗CRIg抗体结合相 同表位的单克隆抗体或其片段14G8 (ATCC保藏号PTA-8298)， 3D10 (ATCC保藏号PTA-8299)和2H1 (ATCC保藏号PTA-8300)。6. 权利要求3的CRIg拮抗剂，其是选自下组的单克隆抗体或其片段14G8 (ATCC保藏号PTA-8298)， 3D10 (ATCC保藏号PTA-8299)和2H1 (ATCC保 藏号PTA画8300)。7. 权利要求3的CRIg拮抗剂，其中所述抗体或其片段是嵌合的、人源化的 或人的。8. 权利要求7的CRIg拮抗剂，其中所述抗体是人源化抗体或其片段。9. 权利要求l的CRIg拮抗剂，其中所述细胞内病原体选自下组病毒，寄 生虫，纟田菌，真菌和朊病毒。10. 权利要求9的CRIg拮抗剂，其中所述病原体是RNA或DNA病毒。...
【专利技术属性】
技术研发人员：门诺范卢克伦坎佩恩，
申请(专利权)人：健泰科生物技术公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。