用猪肾细胞系（ＰＫ１５）生产猪瘟活疫苗的方法及其制品技术

本发明专利技术公开了一种用猪肾细胞系（ＰＫ１５）生产猪瘟活疫苗的方法。本发明专利技术包括如下技术步骤：（１）选择猪肾细胞系（ＰＫ１５）作为制苗用细胞；（２）制苗用细胞的传代与培养；（３）细胞毒种的繁殖；（４）制苗毒液的繁殖；（５）配苗、分装及冻干。本发明专利技术具有生产工艺简单且稳定、易操作，病毒含量高，批间差异小，质量易控，可显著提高疫苗产量和质量。利用本发明专利技术生产的猪瘟活疫苗安全性好、免疫效力高，对猪瘟强毒攻击具有完全的免疫保护作用。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
用猪肾细胞系（ＰＫ１５）生产猪瘟活疫苗的方法，其特征在于：包括如下技术步骤：（１）选择猪肾细胞系（ＰＫ１５）作为制苗用细胞：（２）制苗用细胞的传代与培养：猪肾细胞系（ＰＫ１５）经ＥＤＴＡ－胰酶细胞分散液消化传代，以细胞生长液继续培养，形成良好单层时，用于继续传代或接种病毒；（３）细胞毒种的繁殖：用细胞维持液，将新鲜脾毒制成病毒悬液，接种由步骤（２）制得良好单层的猪肾细胞系（ＰＫ１５），继续培养；每隔４～５日收获换液一次，取二收、三收细胞培养毒液作为生产用毒种；（４）制苗毒液的繁殖：取步骤（２）中已形成良好单层的猪肾细胞系（ＰＫ１５）培养瓶，弃去所述细胞生长液，接种含猪瘟兔化弱毒的细胞维持液，继续培养；接毒后第５日作第一次收获换液，以后每隔４日收获换液１次，收获的毒液置－１５℃以下保存；（５）配苗、分装及冻干：将检验合格的步骤（４）中所述毒液，混合于同一容器内，加入稳定剂，同时加入抗生素，充分摇匀，定量分装；每头份含细胞毒液不少于０．０１５ｍｌ，分装后迅速进行冷冻真空干燥后即得成品。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：吴文福，宁宜宝，林旭埜，张毓金，岑小清，游启有，张国丽，任向阳，杨傲冰，张木辉，司徒剑谋，
申请(专利权)人：广东永顺生物制药有限公司，中国兽医药品监察所，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]