一种两步分离提纯柱及其应用制造技术

一种两步分离提纯柱及其应用，涉及分离提纯柱及其在食品安全检测中分离提纯邻苯二甲酸酯类的应用。它由上端的活性炭颗粒填料柱和下端的弗罗里硅土填料柱结合制成。该两步分离提纯柱应用于分离提纯邻苯二甲酸酯类。本发明专利技术采用活性炭颗粒柱与弗罗里硅土柱结合纯化富集邻苯二甲酸二正辛酯（ＤＮＯＰ）和邻苯二甲酸二正丁酯（ＤＢＰ）可以实现两者的检出限较粗提物的检出限减小。膜粗提物中ＤＮＯＰ和ＤＢＰ的检出限均为经过活性炭颗粒柱与弗罗里硅土柱结合纯化富集后的１０倍；苹果粗提物中ＤＮＯＰ和ＤＢＰ的检出限分别为经过活性炭颗粒柱与弗罗里硅土柱结合纯化富集后的８．３倍和１０倍。本发明专利技术易于大规模，大量样品的检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于化学
，涉及食品检测方法，尤其是食品安全检测的前处理方法，具 体为一种两步分离提纯柱及其在食品安全检测中分离提纯邻苯二甲酸酯类的应用。
技术介绍
邻苯二甲酸酯类(phthalic acid esters, PAEs)又称酞酸酯，在塑料工业中常用做增塑剂 和软化剂，其含量有时可高达高聚体本身的60%，以增大塑料的可塑性和韧性。邻苯二甲酸 二正辛酯(DNOP)和邻苯二甲酸二正丁酯(DBP)均属于邻苯二甲酸酯类，是目前应用非常广 泛的增塑剂，具有生殖毒性、胚胎毒性和遗传毒性，它们在人体和动物体内，发挥着类似雌 性激素的作用，干扰内分泌，含量高时，被认为可能损害人体肝脏、肾脏和生殖器官，并有 致癌风险。它们与塑料基质不以氢键和范德华力连接，彼此保持独立的化学性质，在包装食 品时，会迁移到食品中使食品受到污染。由于食品样品中PAEs含量较低，且基质复杂，准 确分析测定有较大的难度，目前分析测定的难点是样品的前处理。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种两步分离提纯柱及其在测定邻苯二甲酸酯类的应用，尤其是在 分离提纯邻苯二甲酸二正辛酯和邻苯二甲酸二正丁酯的应用。使用本专利技术的方法可以使包装 食品中的邻苯二甲酸酯类(PAEs)得到富集，便于检测。本专利技术的一种两步分离提纯柱由上端的活性炭颗粒填料柱和下端的弗罗里硅土填料柱 结合制成。该两步分离提纯柱应用于分离提纯邻苯二甲酸酯类。所述邻苯二甲酸酯类为邻苯二甲酸二正辛酯或邻苯二甲酸二正丁酯。固体分离柱的制备采用活性碳柱与弗罗里硅土柱结合，活性炭柱与弗罗里硅土柱均干法上柱，加压使填料压实。本专利技术所说的活性炭颗粒，分析纯，购自国药集团化学试剂有限公司；本专利技术所说的弗罗里硅土 (层析用，60-100目)，学名为硅镁型吸附剂，英文名flolisil，购自温州市化学用料厂。以下对本专利技术分案进一步描述 一、层析柱填料的选取分别用等量中性氧化铝、酸性氧化铝、弗罗里硅土、硅藻土、硅胶、活性炭颗粒为填料装柱，对邻苯二甲酸二正辛酯和邻苯二甲酸二正丁酯进行动态吸附试验。结果表明活性炭颗 粒和弗罗里硅土有较高的吸附率和解吸率，并且除杂效果显著，因此选用活性炭颗粒和弗罗 里硅土分别作为填料，两柱结合纯化富集邻苯二甲酸二正辛酯和邻苯二甲酸二正丁酯。二、 上样液流速对吸附效果的影响活性炭颗粒柱分别取lmLDNOP和DBP浓度分别为0.00049mg/mL、0.0005235mg/mL 的原料液(甲醇为溶剂)，按0.5、 1.0、 2.0、 3.0mL/min的流速通过装柱量为0.500g的活性 碳颗粒柱，收集流出液，N2吹干后，用甲醇定容至lmL，用HPLC进行检测，计算各吸附 率。结果表明上柱流速的增大，吸附率降低，造成样品流失。但是流速过慢，吸附时间增加， 检测周期延长。综合考虑，上样液流速选择lmL/min较为理想。弗罗里硅土柱分别取lmLDNOP和DBP浓度分别为0.00049mg/mL、0.0005235mg/mL 的原料液(二氯甲烷为溶剂)，按0.5、 1.0、 2.0、 3.0mL/min的流速通过装柱量为l.OOOg的 活性碳颗粒柱，收集流出液，N2吹干后，用甲醇定容至lmL，用HPLC进行检测，计算各 吸附率。结果表明上柱流速的增大，吸附率降低，造成样品流失。但是流速过慢，吸附时间 增加，检测周期延长。综合考虑，上样液流速选择lmL/min较为理想。三、 洗脱体系的确定本专利技术中所说的丙酮，其浓度百分比均为体积比，其溶剂为水。活性炭颗粒柱由于邻苯二甲酸二正辛酯和邻苯二甲酸二正丁酯均为弱极性脂溶性物 质，初选乙腈、乙酸乙酯、二氯甲烷、正己烷、丙酮、10%丙酮+正己烷、20%丙酮+正己烷、 30°/0丙酮+正己烷为备选洗脱体系。将lmL DNOP和DBP浓度分别为0.00049mg/inL、 0.0005235mg/mL的原料液(甲醇为溶剂)以lmL/min的流速通过装柱量为0.5000g的活性 碳颗粒柱，吸附完成后，分别用5mL的乙腈、乙酸乙酯、二氯甲烷、正己烷、丙酮、10%丙 酮+正己垸、20%丙酮+正己垸、30%丙酮+正己垸进行洗脱，收集各洗脱液，N2吹干后，用 甲醇定容至lmL，用HPLC进行检测，计算各种洗脱剂的洗脱率。结果显示，对于DNOP， 乙腈、乙酸乙酯、二氯甲烷、正己烷、丙酮、10%丙酮+正己烷、20%丙酮+正己垸、30%丙 酮+正己烷的洗脱率分别为87.78°/。、 77.64%、 95.36%、 48.76%、 53.21%、 66.68%、 74.70%、 63.60%;对于DBP，洗脱率分别为48.61%、 72.78%、 92.97%、 24.89%、 52.60%、 41.31%、 62.50%、 43.74%。可以看出，二氯甲垸的洗脱率最高，因此选用二氯甲烷为洗脱剂。同样的 操作重复5次，二氯甲垸作洗脱剂时，DNOP和DBP的RSD值分别为2.56。/。和2.87。/"弗罗里硅土柱初选甲醇、乙酸乙酯、丙酮、20%丙酮+正己烷、40%丙酮+正己垸为备 选洗脱体系。将lmLDNOP和DBP浓度分别为0.00049mg/mL、 0.0005235mg/mL的原料液 (二氯甲烷为溶剂)以lmL/min的流速通过装柱量为l.OOOg的弗罗里硅土柱，吸附完成后，分别用5mL的甲醇、乙酸乙酯、丙酮、20%丙酮+正己烷、40%丙酮+正己烷进行洗脱，收 集各洗脱液，N2吹干后，用甲醇定容至lmL，用HPLC进行检测，计算各种洗脱剂的洗脱 率。结果显示，对于DNOP，甲醇、乙酸乙酯、丙酮、20%丙酮+正己烷、40°/。丙酮+正己垸 的洗脱率分别为85.09%、 74.87%、 84.93%、 93.34%、 91.86%;对于DBP，洗脱率分别为 42.48°/。、 51.57%、 81.76%、 98.22%、 98.06°/。。可以看出，20%丙酮+正己烷作为洗脱剂最 佳。同样的操作重复5次，20%丙酮+正己垸作洗脱剂时，DNOP和DBP的RSD值分别为 3.81%和2.11%。四、洗脱流速的选择活性炭颗粒柱将lmL浓度为0.00049mg/mL的DNOP，和lmL浓度为0.0005235mg/mL 的DBP原料液(均以甲醇为溶剂)以lmL/mhi的流速通过装柱量为0.500g的活性碳颗粒柱， 吸附完成后，用5mL的二氯甲烷分别以0.5、 1.0、 2.0、 3.0mL/min的流速进行洗脱，收集各 洗脱液，N2吹干后，用甲醇定容至lmL,用HPLC进行检测，测定DNOP和DBP的含量， 计算各洗脱率。结果显示，对于DNOP,洗脱率分别为94.48%、 93.62%、 85.86%、 82.54%; 对于DBP，洗脱率分别为93.28%、 91.97%、 90.22%、 88.76%。结果表明，相同体积的洗脱 剂洗脱活性炭颗粒柱，流速越慢，洗脱率越高。但是流速慢耗时长，不经济，综合考虑，选 择洗脱流速为lmL/min。弗罗里硅土柱将lmLDNOP和DBP浓度分别为0.00049mg/mL、 0.0005235mg/mL的 原料液(二氯甲烷为溶剂)以lmL/min的流速通过装柱量为l.OOOg的弗罗里硅土柱，吸附 完成后，分别用5mL的20。/。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种两步分离提纯柱，其特征在于：它由上端的活性碳颗粒填料柱和下端的弗罗里硅土填料柱结合制成。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王向阳，姜丽佳，施青红，
申请(专利权)人：浙江工商大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]