一种替考拉宁的提纯方法技术

本发明专利技术提供一种替考拉宁的提纯方法，该提纯方法该方法是将替考拉宁发酵液依次进行树脂富集、树脂纯化、膜浓缩、喷雾干燥操作。本发明专利技术的方法与现有技术相比，极性大孔吸附树脂与粒径均一的中等极性层析树脂结合使用，产品收率高，脱色效果好；喷雾干燥技术，避免了丙酮的大量使用，不仅仅保护了环境，降低成本，更避开了现有技术中有机溶剂的残留问题；通过本发明专利技术纯化方法得到的替考拉宁各组分比例符合EP标准，提纯工艺高效便捷、制备量大，适于工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于制药工程领域，具体涉及一种替考拉宁的提纯方法。
技术介绍
替考拉宁(teicoplanin)是继万古霉素之后开发的另一种抗耐药菌的糖肽类抗生素。现有替考拉宁生产方法中，一般采用微生物发酵生产替考拉宁为主，发酵液中替考拉宁，包括TAl～TA2，其中TA2是替考拉宁的主要活性成分，主要由5个化学结构十分相似的化合物(TA2-1，TA2-2，TA2-3，TA2-4，TA2-5)组成；其粗品及精制品中还含有一个活性组分TA3-1，该化合物是TA2的去酰基葡萄糖胺产物；此外，其中还含有2个亲脂性较强的类似物。替考拉宁化学结构如下式一所示。目前，制药领域遵循的标准中，《欧洲药典》(EP)对各个组分做出了明确的规定，A2组之和不小于80.0％，其中A2-2为35.0％～55.0％，A2-1、A2-3、A2-4、A2-5均不大于20.0％，A3-1不大于15.0％，不纯组分不大于5.0％。现有替考拉宁主要的提纯方法有：溶媒萃取法、吸附法、离子交换法和色谱层析法等。溶媒萃取法分离纯化效果差，收率低，目前该法很少采用；文献[参照M.R.巴尔顿(M.R,Bardon)等的Journ本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种替考拉宁的提纯方法，其特征在于：该提纯方法具体包括如下操作步骤：(1)树脂富集：取替考拉宁发酵液并将其pH值调至10.0～12.0，接着进行过滤得替考拉宁滤液；之后替考拉宁滤液以每小时0.2～2倍填充床体积的速率泵入经预处理的极性大孔吸附树脂层析柱，且极性大孔吸附树脂层析柱的树脂颗粒大小为20～60目；然后采用纯化水洗至无色，再以每小时0.2～2倍填充床体积的洗脱速率、用强极性溶剂的水溶液作解析液进行梯度洗脱，每梯度洗脱所用的解析液为3～5倍填充床体积，并收集富集液，即得替考拉宁富集液；(2)树脂纯化：将步骤(1)所得的替考拉宁富集液采用等体积纯化水稀释，之后以每小时0.2～2倍填充床体积...

【技术特征摘要】
1.一种替考拉宁的提纯方法，其特征在于：该提纯方法具体包括如下操作步骤：(1)树脂富集：取替考拉宁发酵液并将其pH值调至10.0～12.0，接着进行过滤得替考拉宁滤液；之后替考拉宁滤液以每小时0.2～2倍填充床体积的速率泵入经预处理的极性大孔吸附树脂层析柱，且极性大孔吸附树脂层析柱的树脂颗粒大小为20～60目；然后采用纯化水洗至无色，再以每小时0.2～2倍填充床体积的洗脱速率、用强极性溶剂的水溶液作解析液进行梯度洗脱，每梯度洗脱所用的解析液为3～5倍填充床体积，并收集富集液，即得替考拉宁富集液；(2)树脂纯化：将步骤(1)所得的替考拉宁富集液采用等体积纯化水稀释，之后以每小时0.2～2倍填充床体积的速率通过预处理的中等极性大孔吸附树脂柱，接着采用纯化水洗至无色，然后以每小时0.2～2倍填充床体积的洗脱速率，用强极性溶剂的缓冲盐水溶液作解析液进行等度洗脱，并分步收集洗脱液，合并有效洗脱液即得合并液，采用高效液相色谱法检测所得合并液的组分比例，当测得合并液中替考拉宁各组分符合EP要求时，则调整合并液pH值至6.8～7.4；(3)膜浓缩：将步骤(2)调整pH值后的合并液采用纳滤膜进行浓缩，且在浓缩期间加入3～5倍合并液体积的纯化水，则获得替考拉宁浓缩液；(4)喷雾干燥：将步骤(3)所获得的替考拉宁浓缩液经恒流泵以1～5L/h流速泵入进行喷雾干燥，即可得符合EP标准的替考拉宁干品。2.根据权利要求1所述一种替考拉宁的提纯方法，其特征在于：所述步骤(1)中，过滤采用板框过滤。3.根据权利要求1所述一种替考拉宁的提纯方法，其特征在于：所述步骤(1)中，极性大孔吸附树脂层析柱的...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨煌建，张祝兰，连云阳，王德森，任林英，高振云，刘珣，
申请(专利权)人：福建省微生物研究所，
类型：发明
国别省市：福建;35