一种多靶点抗癌腺病毒的构建和用途制造技术

本发明专利技术公开了一种应用遗传工程的方法在细胞内获得靶向敲低ｍＲＮＡ表达的构建方案，以及用该方案获取的重组腺病毒和真核表达质粒在肿瘤治疗中的具体用途。本发明专利技术在多克隆位点下游分别插入针对人源性和小鼠源性Ｕ６启动子，在Ｕ６启动子下游连接反义的Ａｋｔ１、ＰＩ３Ｋ　ｐ８５亚基和ＣＯＸ－２插入序列片断，所获得重组腺病毒和真核表达质粒能在胶质瘤、胃癌、乳腺癌、肺癌等肿瘤细胞内复制增殖；插入的反义Ａｋｔ１、ＰＩ３Ｋ　ｐ８５亚基和ＣＯＸ－２的ｃＤＮＡ片段在肿瘤细胞内高效表达，抑制肿瘤细胞Ａｋｔ１、ＰＩ３Ｋ　ｐ８５亚基和ＣＯＸ－２的表达；进而影响其下游基因（如Ｍｍｐｓ、Ｎｆｋｂ、ｐ５３、ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅｓ等）的表达；对肿瘤细胞具有强效旁观者效应。该腺病毒和真核表达质粒在肿瘤治疗药物、放射治疗增敏的制备中具有独特的实用价值。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种基于反义ＲＮＡ技术的、以肿瘤细胞Ａｋｔ１、ＰＩ３Ｋ　ｐ８５亚基和ＣＯＸ－２为药靶的抗癌重组腺病毒，其特征是在病毒载体基因组多克隆位点下游分别插入针对人源性和小鼠源性Ｕ６启动子，在Ｕ６启动子下游连接反义的Ａｋｔ１、ＰＩ３Ｋ　ｐ８５亚基和ＣＯＸ－２插入序列的表达模扳构成。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张庆瑜，康春生，浦佩玉，张春智，付彦超，张靖，王涛，
申请(专利权)人：天津医科大学总医院，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]