针对血浆激肽释放酶和因子XII的双特异性抗体制造技术

本发明专利技术的发明专利技术名称为针对血浆激肽释放酶和因子XII的双特异性抗体。本文描述的是结合血浆激肽释放酶(pKal)和因子XII的双特异性抗体以及生产这类双特异性抗体的方法和使用这类双特异性抗体治疗与接触系统相关的疾病或病症(例如遗传性血管性水肿和血栓形成)的方法。本公开的一个方面是双特异性抗体，其包含第一多肽和第二多肽，所述第一多肽包含第一抗体的轻链，所述轻链包含轻链可变区(V

【技术实现步骤摘要】
针对血浆激肽释放酶和因子XII的双特异性抗体
[0001]本申请为申请日是2015年12月31日、申请号是201580075633.1(PCT/US2015/068238)、专利技术名称为“针对血浆激肽释放酶和因子XII的双特异性抗体”的中国申请的分案申请。
[0002]相关申请的交叉引用
[0003]本申请要求美国临时申请第62/099,236号(2015年1月2日提交)、美国临时申请第62/200,363号(2015年8月3日提交)和美国临时申请第62/261,609号(2015年12月1日提交)的申请日的权益。这些引用的申请的全部内容通过引用并入本文。
[0004]专利技术背景
[0005]因子XII(FXII)是将前激肽释放酶转变成血浆激肽释放酶(pKal)的主要激活因子。激活的血浆激肽释放酶裂解(切割，cleave)高分子量激肽原(HMWK)，以释放缓激肽(BK)。PKal也能将潜伏因子XII激活成为活性因子XII(因子XIIa)。在与接触系统的异常激活相关的疾病状态(诸如遗传性血管性水肿)中，BK的不受控制的水平可引起患者疾病发作。
[0006]专利技术概述
[0007]本公开的一个方面是双特异性抗体，其包含：第一多肽和第二多肽，所述第一多肽包含第一抗体的轻链，所述轻链包含轻链可变区(V
L
)和轻链恒定区(C
L
)(例如κ轻链或λ轻链)，所述第二多肽包含第一抗体的重链，所述重链包含重链可变区(V
H
)和重链恒定区(C
H
)。所述双特异性抗体的第一多肽或第二多肽进一步包含第二抗体，所述第二抗体为单链抗体并且可被融合至第一多肽或第二多肽的C
‑
末端。第一抗体和第二抗体中的一个结合血浆激肽释放酶(pKal)(例如活性pKal)并且另外一个抗体结合因子XII(例如活性因子XII或FXIIa)，例如，第一抗体结合pKal且第二抗体结合FXIIa或反之亦然。
[0008]在一些实施方案中，第一抗体是IgG。在一个实施例中，IgG包含突变的重链，所述突变的重链与野生型对应物相比，C
‑
末端赖氨酸残基被缺失或突变。例如，第一抗体突变的重链可包含C
‑
末端甘氨酸残基，而不是如在野生型IgG重链中的赖氨酸残基。在一个实施例中，双特异性抗体可以是四价的。
[0009]在一些实施方案中，在双特异性抗体中的第二多肽包含第一抗体的重链和第二抗体之间的肽连接体。在一个实施例中，肽连接体可为SGGGS(SEQ ID NO:22)。
[0010]在第二抗体(其为scFv抗体)中，V
H
可被融合至V
L
的N
‑
末端。可替代地，V
H
被融合至V
L
的C
‑
末端。在一些实施例中，第二抗体包含V
H
区和V
L
区之间的肽连接体，例如(G4S)4的连接体(SEQ ID NO:23)。在一些实施方案中，scFv抗体包含在V
H
链和V
L
链之间形成的二硫键。例如，V
H
链可包含在位置44(C44)处的半胱氨酸残基，和V
L
链可包含在位置100处的半胱氨酸残基，其中二硫键可在V
H
中的C
44
和V
L
中的C
100
之间形成。在一些实施例中，第二抗体在其C
‑
末端不包含KR基序。
[0011]在本文描述的任何双特异性抗体中，第一抗体的V
H
具有与SEQ ID NO:1中的互补决定区(CDR)相同的互补决定区(CDR)。在一些实施例中，第一抗体的V
H
包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列。在一个实施例中，第一抗体的重链包含SEQ ID NO:9的残基20
‑
470的氨基酸序
列。在一个实施例中，第一抗体的重链包含SEQ ID NO:9、149和150的氨基酸序列。可替代地或另外，第一抗体的V
L
具有与SEQ ID NO:2中的CDR相同的CDR。在一些实施例中，第一抗体的V
L
包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列。
[0012]进一步地，第二抗体的V
H
可具有与SEQ ID NO:3、4和123
‑
126中的任一个的CDR相同的CDR。在一些实施例中，第二抗体的V
H
包含SEQ ID NO:3、4和123
‑
126的氨基酸序列中的任一种。可替代地或另外，第二抗体的V
L
具有与SEQ ID NO:5
‑
8和127
‑
130的任一个中的CDR相同的CDR。在一些实施例中，第二抗体的V
L
包含SEQ ID NO:5
‑
8和127的氨基酸序列中的任一个的残基1
‑
111。在一个实施例中，第二抗体的V
L
包含SEQ ID NO:5
‑
8和127
‑
130的氨基酸序列中的任一种。
[0013]在一些实施例中，本文所述的的双特异性抗体包含第一多肽和第二多肽，所述第一多肽包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列，所述第二多肽包含SEQ ID NO:11
‑
20、47
‑
122、141
‑
148和151
‑
158的氨基酸序列中的任一种。
[0014]在另一个方面中，本公开提供了双特异性抗体，其包含结合至血浆激肽释放酶(pKal)的第一抗体和结合至因子XII的第二抗体，例如结合至活性pKal的第一抗体和/或结合至活性因子XII(FXIIa)的第二抗体。在一些实施方案中，第一抗体包含V
H
链和/或V
L
链，所述V
H
链包含与SEQ ID NO:1中的互补决定区(CDR)相同的互补决定区(CDR)，所述V
L
链包含与SEQ ID NO:2中的CDR相同的CDR。例如，第一抗体的V
H
包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列，和/或第一抗体的V
L
包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列。
[0015]可替代地或另外，第二抗体包含V
H
链和/或V
L
链，所述V
H
链包含与SEQ ID NO:3或4中的CDR相同的CDR，所述V
L
链包含与SEQ ID NO:5、6、7或8中的CDR相同的CDR。例如，第二抗体的V
H
链包含SEQ ID NO:3或4的氨基酸序列；和/或第二抗体的V
L
包含SEQ ID NO:5、6、7本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种双特异性抗体，其包含：第一多肽，其包含第一抗体的轻链，所述轻链包含轻链可变区(V
L
)和轻链恒定区(C
L
)；和第二多肽，其包含第一抗体的重链，所述重链包含重链可变区(V
H
)和重链恒定区(C
H
)，其中所述第一多肽或所述第二多肽进一步包含第二抗体，所述第二抗体是包含重链可变区(V
H
)和轻链可变区(V
L
)的单链抗体，并且融合至所述第一多肽或所述第二多肽的C
‑
末端；和其中所述第一抗体结合血浆激肽释放酶(pKal)，并且所述第二抗体结合活性因子XII(FXIIa)。2.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其中所述第二抗体融合至所述第二多肽的C
‑
末端。3.根据权利要求1或2所述的双特...

【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：武田药品工业株式会社，
类型：发明
国别省市：