纯化双特异性抗体的方法技术

本发明专利技术涉及纯化双特异性抗体的方法。本发明专利技术涉及从单特异性抗体的混合物中纯化双特异性抗体，所述双特异性抗体携带针对免疫球蛋白分子的每个结合位点的不同特异性。双特异性抗体由单一重链和两条不同的轻链组成，所述轻链一条含有κ恒定域并且另一条含有λ恒定域。本发明专利技术具体而言涉及从包含具有两条κ轻链或其部分的单特异性抗体和具有两条λ轻链或其部分的单特异性抗体的混合物中分离这些双特异性抗体。本发明专利技术还提供有效纯化这些双特异性抗体的方法。体的方法。体的方法。

【技术实现步骤摘要】
纯化双特异性抗体的方法
[0001]本申请为分案申请，原申请的申请日为2016年3月14日，申请号为201680027247.X(PCT/EP2016/055474)，专利技术名称为“纯化双特异性抗体的方法”。
[0002]相关申请本申请要求2015年3月13日提交的美国临时申请号62/132,782的权益，所述美国临时申请的内容以全文引用的方式并入本文。
专利

[0003]本专利技术涉及从单特异性抗体的混合物中纯化双特异性抗体，所述双特异性抗体携带针对免疫球蛋白分子的每个结合位点的不同特异性。双特异性抗体由单一重链和两条不同的轻链组成，所述轻链一条含有κ恒定域并且另一条含有λ恒定域。本专利技术具体而言涉及从包含具有两条κ轻链或其部分的单特异性抗体和具有两条λ轻链或其部分的单特异性抗体的混合物中分离这些双特异性抗体。本专利技术还提供有效纯化这些双特异性抗体的方法。
[0004]专利技术背景抗体由四个多肽组成：两条重链和两条轻链。抗体的抗原结合部分由轻链可变域(VL)和重链可变域(VH)形成。在这些域的一个末端处六个突环形成抗原结合位点并且本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从抗体的混合物中纯化双特异性抗体的方法，所述方法包括以下步骤：(a) 对生物样本进行蛋白A层析以产生包含以下的混合抗体组合物：(i)至少一种双特异性抗体，其具有每个结合位点中不同的特异性以及两拷贝的单一重链多肽、具有κ恒定区的第一轻链和具有λ恒定区的第二轻链(κλ
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体)；(ii)至少一种单特异性抗体，其具有两条λ轻链或其部分(λ单
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Ab)；以及(iii)至少一种单特异性抗体，其具有两条κ轻链或其部分(κ单
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Ab)；(b) 提供分离工具；(c) 在允许与所述κ单
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Ab和所述λ单
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Ab结合至所述分离工具相比所述κλ
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体差异性结合至所述分离工具的条件下，使所述分离工具与所述混合抗体组合物接触；以及(d) 在允许与从所述分离工具上脱离κ单
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Ab和所述λ单
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Ab相比从所述分离工具上优先脱离所述κλ
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体的条件下，从所述分离工具上洗脱所述κλ
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体、所述κ单
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Ab和所述λ单
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Ab，其中所述分离工具包括疏水相互作用层析树脂和混合模式层析树脂的组合。2.如权利要求1所述的方法，其中所述结合条件包括pH水平、盐水平、或pH水平和盐水平两者的变化。3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述洗脱条件包括pH水平、盐水平、pH水平...

【专利技术属性】
技术研发人员：N富克，JF德普瓦西尔，K威尔逊，J瓦达，E米勒，R达布雷，
申请(专利权)人：诺夫免疫股份有限公司，
类型：发明
国别省市：