本发明专利技术提供了用于产生抗α4β7抗体(例如维多珠单抗)的细胞培养方法及其组合物。
【技术实现步骤摘要】
专利
本专利技术涉及用于在哺乳动物宿主细胞中产生抗α4β7抗体的方法和组合物。
技术介绍
1、哺乳动物细胞培养技术常用于生产治疗性生物制剂，包括治疗性单克隆抗体。在制药工业中，哺乳动物细胞通常比其他形式的真核细胞(诸如酵母)或原核细胞(诸如细菌)更优选用于蛋白质生产，因为哺乳动物细胞中产生的蛋白质的翻译后修饰与人体产生的蛋白质更类似。然而，哺乳动物细胞培养可能很困难，因为这些细胞存在许多挑战，特别是在以商业规模制造用于人类的治疗性抗体的情形下。生产方法必须使细胞的抗体产量最大化，同时保持蛋白质产品的安全性以及效率和成本效益。因此，生产需求很重要，因为需要保持所期望的产品质量属性诸如糖基化特征、聚集体水平、电荷异质性和氨基酸序列完整性(li等人,2010,mabs,2(5):466-477)。
2、鉴于细胞培养过程的复杂性，可能难以确定可解决与产生治疗性抗体相关联的挑战的细胞培养参数，包括保持高质量的药物产品，同时产生足够的蛋白质产品以满足制造需求和治疗要求。
技术实现思路
>1、尽管哺乳动物细本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种产生包含人源化抗α4β7抗体的组合物的方法，所述方法包括在包含锌的生产培养基中培养哺乳动物宿主细胞，从而产生包含所述人源化抗α4β7抗体的组合物，
2.如权利要求1所述的方法，其中与在相同条件下在缺少锌的情况下培养的表达所述人源化抗α4β7抗体的对照哺乳动物宿主细胞相比，所述组合物包含减少量的所述人源化抗α4β7抗体的碱性同工型。
3.如权利要求2所述的方法，其中所述组合物包含约16％或更少的所述人源化抗α4β7抗体的碱性同工型。
4.如权利要求3所述的方法，其中所述组合物包含约14％或更少的所述人源化抗α4β7抗体的碱性同工型。
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【技术特征摘要】
1.一种产生包含人源化抗α4β7抗体的组合物的方法，所述方法包括在包含锌的生产培养基中培养哺乳动物宿主细胞，从而产生包含所述人源化抗α4β7抗体的组合物，
2.如权利要求1所述的方法，其中与在相同条件下在缺少锌的情况下培养的表达所述人源化抗α4β7抗体的对照哺乳动物宿主细胞相比，所述组合物包含减少量的所述人源化抗α4β7抗体的碱性同工型。
3.如权利要求2所述的方法，其中所述组合物包含约16％或更少的所述人源化抗α4β7抗体的碱性同工型。
4.如权利要求3所述的方法，其中所述组合物包含约14％或更少的所述人源化抗α4β7抗体的碱性同工型。
5.如权利要求3所述的方法，其中所述组合物包含约13％或更少的所述人源化抗α4β7抗体的碱性同工型。
6.如权利要求1所述的方法，其中所述生产培养基中锌的浓度为2μm至60μm。
7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述方法包括通过向所述生产培养基中添加包含锌的补料培养基来用锌补充所述生产培养基。
8.如权利要求7所述的方法，其中从生产阶段的约第四天开始将所述补料培养基添加到所述生产培养基中。
9.如权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述生产培养基包含5.0至8.8g/l赖氨酸和3.0至12.0g/l精氨酸。
10.如权利要求9所述的方法，其中所述生产培养基包含4.5至5.5g/l赖氨酸。
11.如权利要求9所述的方法，其中所述生产培养基包含5.5至8.8g/l赖氨酸。
12.如权利要求9-11所述的方法，其中所述生产培养基包含5.4至7.4g/l精氨酸。
13.如权利要求9-11所述的方法，其中所述生产培养基包含7.4至12g/l精氨酸。
14.如权利要求1-13中任一项所述的方法，其中所述生产培养基的温度范围为36至38摄氏度。
15.如权利要求14所述的方法，其中所述温度范围为36.5至37.5摄氏度。
16.如权利要求15所述的方法，其中所述温度为约37摄氏度的平均温度。
17.如权利要求1-16中任一项所述的方法，其中所述生产培养基的ph范围为6.5至7。
18.如权利要求17所述的方法，其中所述生产培养基的ph范围为6.8至7.0。
19.如权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述生产培养基的葡萄糖水平在所述生产阶段期间保持在约7g/l或更低。
20.如权利要求1-19中任一项所述的方法，其中所述生产阶段为14天或更短。
21.如权利要求1-19中任一项所述的方法，其中所述生产阶段的范围为10天至17天。
22.如权利要求1-21中任一项所述的方法，其在大规模生物反应器中进行。
23.如权利要求22所述的方法，其中所述大规模生物反应器选自由200升(l)生物反应器、2000l生物反应器、3000l和6000l生物反应器组成的组。
24.如权利要求1-23中任一项所述的方法，其中所述生产阶段产生的所述人源化抗α4β7抗体的滴度大于3g/l。
25.如权利要求24所述的方法，其中所述人源化抗α4β7抗体的滴度为约3至约8g/l。
26.如权利要求25所述的方法，其中所述人源化抗α4β7抗体的滴度为约5至约7g/l。
27.如权利要求1-26中任一项所述的方法，其中所述哺乳动物宿主细胞是中国仓鼠卵巢(cho)细胞。
28.如权利要求27所述的方法，其中所述cho细胞是gs-cho细胞。
29.如权利要求1-28中任一项所述的方法，其中所述人源化抗α4β7抗体包含重链可变结构域，所述重链可变结构域包含如seq id no:1所列示的氨基酸序列，并且包含轻链可变结构域，所述轻链可变结构域包含如seq id no:5所列示的氨基酸序列。
30.如权利要求1-29中任一项所述的方法，其中所述人源化抗α4β7抗体是维多珠单抗。
31.如权利要求1...
【专利技术属性】
技术研发人员：Y·K·戈塔姆，S·S·莱，E·G·斯卡弗，N·维什瓦纳坦，
申请(专利权)人：武田药品工业株式会社，
类型：发明
国别省市：
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