野鸢尾黄素在治疗肝纤维化中的应用制造技术

本发明专利技术公开野鸢尾黄素在治疗肝纤维化中的应用。本发明专利技术通过体内外实验证明，野鸢尾黄素能抑制肝星状细胞活化，减少肝纤维化小鼠肝脏中胶原沉积，下调肝纤维化相关蛋白表达，缓解肝纤维化进程，说明野鸢尾黄素具有抗肝纤维化的作用。此外，野鸢尾黄素具有毒副作用小、用药剂量较小、原料来源广泛、生产成本低等优点。生产成本低等优点。生产成本低等优点。

【技术实现步骤摘要】
野鸢尾黄素在治疗肝纤维化中的应用


[0001]本专利技术涉及医药领域，具体涉及野鸢尾黄素在治疗肝纤维化中的应用。

技术介绍

[0002]肝纤维化是响应慢性肝损伤的愈合反应，它是由各种原因引起的，包括肝炎病毒感染、酗酒、胆汁淤积、自身免疫、药物、毒素和非酒精性脂肪肝，最终导致肝功能和肝脏结构破坏。如果不及时治疗，肝纤维化发展为肝硬化，导致正常肝功能进行性丧失，肝脏结构改变、血流异常，最终导致门静脉高压，出现腹水、肝性脑病和静脉曲张出血等并发症，进而发生肝功能衰竭甚至死亡。失代偿肝硬化是全球范围内因肝病死亡的主要原因，并且与肝细胞癌患病风险增加有关。由肝硬化引起的失代偿和肝细胞癌每年造成200万人死亡，占全世界死亡总数的3.5％以上。
[0003]近几年不断上升的发病率对世界人口健康造成了沉重负担，虽然肝病患者的数量不断增加，但早期和晚期肝纤维化的诊断和治疗选择仍然有限。目前，肝活组织检查仍然是肝纤维化诊断的“金标准”。虽然血清学诊断模型、瞬时弹性成像等一些无创检测方法对肝纤维化具有较高的诊断价值，但仍有待进一步完善。目前临床上尚无公认有效的抗肝纤维化治疗方法，主要通过对病因治疗缓解肝损伤和炎症，同时防治肝纤维化。基于肝星状细胞 (hepatic starate cells，HSCs)的抗纤维化策略主要包括抑制HSCs活化相关的靶分子 (PPARα、PPARγ和PPARδ、FXR、趋化因子受体CCR2和CCR5、HSP47和galectin 3)。但是这些药物仍然没有很好的治疗效果并且有不同程度的不良反应。肝移植是第二大最常见的实体器官移植，但以目前的疾病增加速度，满足全球移植需求的不到10％。目前尚没有理想的抗肝纤维化药物批准上市，因此寻找有效的治疗手段仍然迫在眉睫。
[0004]纤维化是由瘢痕组织(细胞外基质，ECM)的过度积累引起的，伴随免疫细胞组成和血管生成改变，最终导致严重的结构变化，危及器官功能。肝脏中ECM主要来源于激活的HSCs。HSCs位于肝窦状内皮细胞(LSECs)和肝细胞之间，在正常肝脏中，HSCs 作为视黄酯储存细胞维持非增殖、静止表型，在肝损伤后，HSCs被激活，转分化为肌成纤维样细胞，它具有增殖性、收缩性、炎性和趋化性，以及ECM生成增强。因此，针对活化HSCs的功能调节是可靠的抗纤维化治疗策略。
[0005]肝纤维化的发病机制与多因素、多环节有关，因此，一种有效的治疗药物必须有能力调节参与肝纤维化进展的多个途径。在可能的治疗方法中，天然产物通常具有结构多样性、低毒性和广泛可用性，因此在治疗肝纤维化中可能发挥独特的作用。已经有研究表明从 Silybummarianum提取的水飞蓟宾(Silibinin，SIL)对于慢性肝病动物模型有抗肝纤维化的作用，并已被提出作为治疗各种肝脏疾病的抗肝毒性药物。

技术实现思路

[0006]本专利技术目的之一，提供野鸢尾黄素的新用途，即提供了野鸢尾黄素在预防或治疗肝纤维化的药物中的应用。
[0007]本专利技术目的之二，提供野鸢尾黄素在抑制肝星状细胞活化和抑制细胞外基质生成的抑制剂的应用。
[0008]本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现：
[0009]野鸢尾黄素在制备治疗肝纤维化或肝纤维化相关疾病药物中的应用，所述野鸢尾黄素的结构式如式Ⅰ所示：
[0010][0011]本专利技术技术方案中，所述野鸢尾黄素用于制备抑制肝星状细胞的活化的抑制剂的应用。
[0012]本专利技术技术方案中，所述野鸢尾黄素用于制备抑制细胞外基质生成的抑制剂的应用。
[0013]本专利技术技术方案中，所述肝纤维化疾病包括病毒性肝炎、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝病、自身免疫性肝病、胆汁淤积性肝病、中毒和药物性肝病。
[0014]本专利技术技术方案中，所述野鸢尾黄素的给药剂量为1mg/kg、5mg/kg、10mg/kg。
[0015]本专利技术技术方案中，所述野鸢尾黄素的给药剂型包括口服制剂和注射制剂。
[0016]本专利技术技术方案中，本专利技术利用四氯化碳诱导肝脏损伤构建小鼠肝纤维化模型，通过灌胃不同剂量的IRI，评估其对肝纤维化的治疗效果。经研究发现，IRI可以抑制肝星状细胞活化，下调肝纤维化相关基因和肝星状细胞活化标志物表达，减少肝脏中胶原纤维沉积。
[0017]本专利技术的有益效果：
[0018]本专利技术首次发现野鸢尾黄素具有预防或治疗肝纤维化的作用。具体来说，首先利用人肝星状细胞LX
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2作为模式细胞，发现野鸢尾黄素对LX
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2细胞肝纤维化相关基因 COL1A1、COL3A1在转录水平下调，肝星状细胞活化标志物α
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SMA蛋白表达降低，及纤维化肝脏主要胶原纤维COL1的蛋白表达降低，且具有剂量依赖性。同时对CCl4诱导的肝纤维化小鼠模型进行药物治疗，以评价野鸢尾黄素对肝纤维化的治疗作用。通过对肝脏组织形态学观察，我们发现野鸢尾黄素能缓解肝纤维化小鼠肝脏结节生成。通过组织病理学切片检测发现，与模型组相比，野鸢尾黄素能显著改善肝纤维化小鼠肝脏的损伤、炎性浸润和胶原沉积，抑制肝星状细胞活化标志物α
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SMA蛋白表达。通过对肝脏羟脯氨酸和Ⅰ型胶原蛋白含量的测定，证实野鸢尾黄素具有改善肝脏纤维化的作用。在分子水平上，我们发现野鸢尾黄素能显著降低肝纤维化模型小鼠肝纤维化相关基因mRNA和蛋白表达水平，对肝纤维化具有一定的治疗作用。
附图说明
[0019]图1为IRI对LX
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2细胞的安全性评价。用CCK
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8试剂盒检测不同浓度(A)、不同处理时间IRI对LX
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2细胞(B)的毒性作用。
[0020]图2为IRI对LX
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2细胞肝纤维化相关基因表达的影响。A.Western Blot分析不同浓度IRI 治疗对LX
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2细胞活化和肝纤维化相关基因α
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SMA和COL1A1的蛋白表达水平；B. RT
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qPCR分析不同浓度IRI治疗对LX
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2细胞肝纤维化相关基因COL1A1、COL3A1的mRNA 表达水平；C.不同浓度IRI治疗对LX
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2细胞活化标志物α
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SMA免疫荧光染色结果。
[0021]图3为CCl4造模和IRI治疗期间小鼠体重变化情况。
[0022]图4为对照组(Control，CTL)、不同剂量IRI治疗组、SIL阳性药治疗组的小鼠肝组织形态学观察。
[0023]图5为CTL组、不同剂量IRI治疗组、SIL阳性药治疗组的小鼠肝组织H&E、天狼星红、Masson、α
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SMA免疫组化染色。
[0024]图6为IRI对CCl4诱导的肝纤维化小鼠肝脏胶原纤维沉积的影响。A
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B对照组、模型组、不同剂量IRI治疗组、SIL阳性药治疗组的肝脏羟脯氨酸(Hydroxyproline)和Ⅰ型本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.野鸢尾黄素在制备治疗肝纤维化或肝纤维化相关疾病药物中的应用。2.野鸢尾黄素在制备抑制肝星状细胞的活化的抑制剂中的应用。3.野鸢尾黄素在制备抑制细胞外基质生成的抑制剂中的应用。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述野鸢尾黄素在调控肝星状细胞活化中的分子靶点预测方...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈思禹，陶子瑄，宋明明，朱斌，夏文韬，张雯翔，刘畅，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：