一种HPLC检测奥扎格雷有关物质的方法技术

本发明专利技术公开了一种HPLC检测奥扎格雷有关物质的方法，涉及药物分析领域。该方法用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以第一磷酸盐溶液-甲醇90-98:10-2(V/V)为流动相A，以第二磷酸盐溶液-甲醇20-40:80-60(V/V)为流动相B，进行梯度洗脱，检测奥扎格雷中的有关物质。该方法可以快速有效地分离奥扎格雷原料药中潜在的多种微量有关物质，具有基线平稳、峰形美观、分离度好、耐用性高等优点，能够高效地实现奥扎格雷中多种有关物质的定性和定量，适于工业大生产上对奥扎格雷原料的快速质量监测，对于产品质量控制有着重要意义。质量控制有着重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一种HPLC检测奥扎格雷有关物质的方法


[0001]本专利技术涉及药物分析领域，尤其是一种HPLC检测奥扎格雷有关物质的方法。

技术介绍

[0002]奥扎格雷(英文名：ozagrel)，化学名称为：反式-3-[4-(1H-咪唑基-1-甲基)苯基]-2-丙烯酸，结构式为：
[0003][0004]奥扎格雷为一种高效、选择性血栓素合成酶抑制剂，能阻碍前列腺素H2(PGH2)生成血栓烷A2(TXA2)，同时促进前列环素(PGI2)的生成，从而改善TXA2与前列腺素PGI2的平衡异常，具有抗血小板聚集、降低血液粘度、促进血栓分解和扩张血管作用等作用。在临床上，以奥扎格雷为原料制备的奥扎格雷钠主要用于治疗急性血栓性脑梗死和脑梗死所伴随的运动障碍。
[0005]药品中的有关物质泛指在药品的生产与储存过程中产生的工艺杂质或降解产物。由于有关物质的存在会影响到药品的纯度，进而可能会产生毒副作用，所以有关物质的检测是药品质量控制的一个重要方面。
[0006]中国药典2015版中用高效液相色谱法(HPLC)测定奥扎格雷中的有关物质，具体色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.3％醋酸铵溶液-甲醇(80：20)为流动相，检测波长为272nm。理论塔板数按奥扎格雷峰计算不低于2000，供试品溶液的色谱图中如有杂质，单个杂质面积不得大于对照溶液主峰面积的0.4倍(0.2％)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积(0.5％)。专利技术人在该色谱条件下检测分析由光降解的奥扎格雷溶液，发现保留时间为30分钟左右的杂质峰峰型差，峰宽且低，不利于该杂质的检测分析，由此可见该检测方法的局限性。
[0007]严琳琦等(颜琳琦,罗镭,戚绿叶.HPLC法测定奥扎格雷中的合成中间体及降解产物[J].中国卫生检验杂志,2015(15):2489-2490.)用C18柱，控制柱温为25℃，流动相为0.01mol/L磷酸盐缓冲液(含0.01mol/L 十二烷基硫酸钠)-甲醇-乙腈(40：50：10，V/V，用磷酸调节pH至3.0)，流速1.0mL/min，检测波长225nm，在此条件下，可分别检出奥扎格雷的4种中间体和1种酸降解产物，能检出的有关物质种类有限。
[0008]随着被发现的奥扎格雷有关物质的种类的增加，以及对药品质量的要求越来越严格，以上方法已经不能满足检测要求。为进一步提高药品质量，保证用药安全，急需开发出一种能快速检测出奥扎格雷中更多的有关物质的方法。

技术实现思路

[0009]本专利技术的专利技术目的在于：针对上述存在的问题，提供一种HPLC检测奥扎格雷有关物质的检测方法。
[0010]本专利技术采用的技术方案如下：
[0011]一种HPLC检测奥扎格雷有关物质的方法，用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以第一磷酸盐溶液-甲醇 (90-98:10-2，V/V)为流动相A，以第二磷酸盐溶液-甲醇(20-40:80-60，V/V)为流动相B，进行梯度洗脱，检测奥扎格雷中的有关物质。
[0012]进一步地，洗脱程序如表1所示。
[0013]表1梯度洗脱程序
[0014]时间/min流动相A(V％)流动相B(V％)01000303070400100500100551000601000
[0015]进一步地，第一磷酸盐缓冲盐由0.02mol/L磷酸二氢钠溶液与0.02mol/L磷酸氢二钠溶液按照体积比为40-55：60-45混合而成，优选地，第一磷酸盐缓冲盐由0.02mol/L磷酸二氢钠溶液与0.02mol/L磷酸氢二钠溶液按照体积比为50：50混合而成。
[0016]进一步地，第二磷酸盐缓冲液由0.02mol/L磷酸二氢钠溶液与0.02mol/L磷酸氢二钠溶液按照体积比为 40-55：60-45混合而成，优选地，第二磷酸盐缓冲液由0.02mol/L磷酸二氢钠溶液与0.02mol/L磷酸氢二钠溶液按照体积比为50：50混合而成。
[0017]进一步地，流动相A中第一磷酸盐缓冲液与甲醇的体积比为95-98：5-2，优选地为95：5。
[0018]进一步地，流动相B中第二磷酸盐缓冲液与甲醇的体积比为30-40：70-60，优选地为30：70。
[0019]进一步地，十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱填料的粒径为3-5μm，优选为5μm；柱温为20-30℃，优选地，柱温为25℃。
[0020]进一步地，检测波长为210-270nm；优选地，检测波长为220nm。
[0021]进一步地，流动相的流速为0.9-1.1mL/min，优选地，流速为1.0mL/min.
[0022]综上所述，由于采用了上述技术方案，本专利技术的有益效果是：
[0023]本专利技术的检测方法可以快速有效的分离奥扎格雷原料药中潜在的多种微量有关物质，具有基线平稳、峰形美观、分离度好、耐用性高等优点，能够高效的实现奥扎格雷中多种有关物质的定性和定量，适于工业大生产上对奥扎格雷原料的快速质量监测，对于产品质量控制有着重要意义。
附图说明
[0024]本专利技术将通过例子并参照附图的方式说明，其中：
[0025]图1是实施例1中色谱条件下的HPLC色谱图；
[0026]图2是实施例2中色谱条件下的HPLC色谱图；
[0027]图3是对比例1中色谱条件下的HPLC色谱图；
[0028]图4是实施例3中色谱条件下的HPLC色谱图；
[0029]图5是对比例2中光照降解溶液的HPLC色谱图；
[0030]图6是实施例4中供试品溶液的HPLC色谱图；
[0031]图7是实施例4中光照降解溶液的HPLC色谱图。
具体实施方式
[0032]实施例1
[0033]色谱柱：依利特Hypersil ODS2 4.6*250mm；5μm；
[0034]波长：220nm，柱温：25℃，流速：1.0mL/min；
[0035]流动相A：0.3％乙酸铵溶液-甲醇(4：1)；
[0036]流动相B：甲醇；
[0037]样品溶液：空白(流动相A)，进样量：20.0μL；梯度洗脱程序如表2所示。
[0038]表2实施例1中梯度洗脱程序
[0039]Time/min03035454651A/％1001003030100100B/％00707000
[0040]色谱图如图1所示。由图1可见，在该色谱条件下空白溶液色谱图的基线急速下降，不利于潜在微量杂质的有效检出。
[0041]实施例2
[0042]色谱柱：依利特Hypersil ODS2 4.6*250mm；5μm；
[0043]波长：220nm，柱温：25℃，流速：1.0mL/min；
[0044]流动相A：甲醇；
[0045]流动相B：25mmol/L磷酸二氢钠溶液(调节pH为3.0)；
[0046]奥扎格雷样品：按照薛叙明等(薛叙明,吕春绪.奥扎格雷合成工艺[J].化工进展,200本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种HPLC检测奥扎格雷有关物质的方法，其特征在于，用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以第一磷酸盐溶液-甲醇90-98:10-2(V/V)为流动相A，以第二磷酸盐溶液-甲醇20-40:80-60(V/V)为流动相B，进行梯度洗脱，检测奥扎格雷中的有关物质。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，洗脱程序为：3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，第一磷酸盐缓冲盐由0.02mol/L磷酸二氢钠溶液与0.02mol/L磷酸氢二钠溶液按照体积比为40-55：60-45混合而成，优选地，第一磷酸盐缓冲盐由0.02mol/L磷酸二氢钠溶液与0.02mol/L磷酸氢二钠溶液按照体积比为50：50混合而成。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，第二磷酸盐缓冲液由0.02mol/L磷酸二氢钠溶液与0.02mol/L磷酸氢二钠溶液按照体积比为40-55：60-45混合而成，优选...

【专利技术属性】
技术研发人员：吉家玉，黄琴，童庆国，黄浩喜，
申请(专利权)人：海南倍特药业有限公司，
类型：发明
国别省市：