一种同时测定蜜丸或水蜜丸中3种兽药残留的方法技术

本发明专利技术属于兽药残留检测技术领域，具体涉及一种同时测定蜜丸或水蜜丸中甲硝唑、地美硝唑、氯霉素3种兽药残留的方法。该方法将待测样品经过乙酸铅、吸附剂等前处理后，采用高效液相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定蜜丸或水蜜丸中3种兽药残留的方法


[0001]本专利技术属于兽药残留检测
更具体地，涉及一种同时测定蜜丸或水蜜丸中甲硝唑、地美硝唑、氯霉素3种兽药残留的方法。

技术介绍

[0002]蜂蜜是蜜蜂采集植物的花蜜或蜜露酿蜜而成的天然甜性物质，蜂蜜作为药用在我国第一部本草著作《神农本草经》中就有记载，列为上品。蜂蜜广泛应用于食品、保健食品、药品和化妆品等行业中，更是中药制剂、中药蜜炙过程中不可或缺的原辅料，其质量安全必须高度重视。目前，我国蜂产品兽药残留问题仍较为突出，根据2014
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2018年农业部畜禽及蜂产品兽药残留监控计划结果显示，氯霉素、甲硝唑等兽药残留不合格率最高，已成为影响其食用安全的最主要因素之一。然而，以蜂蜜为主要原辅料的蜜丸、水蜜丸制剂并未对产品的兽药残留作相关规定，也没有相应的检测标准，因此，有必要对蜜丸、水蜜丸制剂的兽药残留问题开展方法开发、风险监测与评估工作。
[0003]目前，关于蜂蜜中兽药残留检测方法的报道较多，主要有高效液相色谱
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串联质谱法、气相质谱法、酶联免疫法等，常用的前处理方法有固相萃取法、磁分散固相萃取法等。针对含有炼蜜或糖制成的半流体制剂，温家欣等公开了一种高效液相色谱
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串联质谱法测定膏方中药制剂中多种兽药残留的方法(温家欣,陈俏,曹雅静,何嘉雯,赖宇红.高效液相色谱
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串联质谱法测定膏方中药制剂中多种兽药残留[J].分析试验室,2021,40(05):541
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546.)，但关于蜜丸、水蜜丸制剂中多种兽药残留问题的报道较少，现有的文献资料只有关于氯霉素残留的报道，未见甲硝唑、地美硝唑等常见不合格项目的研究；且受基质干扰的影响，现有方法氯霉素的检出限较高，未能满足风险监测工作的需求。由于中药制剂的成分与蜂蜜有很大差别，含有大量鞣质、树脂、粘液质、酚类、苷类、萜类、甾体等成分，基质更加复杂，参考蜂蜜的前处理方法不能除去其它中药材成分的严重基质干扰。因此，要必要针对蜂蜜和中药制剂的基质特点，开发适用于蜜丸、水蜜丸制剂的多种兽药残留检测方法，开展更广泛、深入的风险监测工作，为风险评估提供技术支持。

技术实现思路

[0004]本专利技术要解决的技术问题是克服没有针对蜜丸、水蜜丸制剂兽药残留检测或氯霉素残留检测检出限较高的缺陷和不足，提供一种同时测定蜜丸或水蜜丸中甲硝唑、地美硝唑、氯霉素3种兽药残留的方法。
[0005]本专利技术的目的是提供一种同时测定蜜丸或水蜜丸中甲硝唑、地美硝唑、氯霉素3种兽药残留的方法。
[0006]本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：
[0007]一种同时测定蜜丸或水蜜丸中甲硝唑、地美硝唑、氯霉素3种兽药残留的方法，采用高效液相色谱
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串联质谱法进行测定，具体包括以下步骤：
[0008]S1、标准溶液制备：甲硝唑、地美硝唑、氯霉素标准物质用乙腈配置成混合标准溶
液；地美硝唑氘代内标、氯霉素氘代内标用乙腈配置成内标标准溶液；
[0009]S2、试样制备：将蜜丸或水蜜丸粉碎，加入步骤S1所得内标标准溶液和乙酸铅溶液，所得上清液除水后用MWCNTs
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NH除杂，所得上清液浓缩、复溶、过滤后，采用高效液相色谱
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串联质谱法进行进样检测；
[0010]S3、所述高效液相色谱条件：C18色谱柱，柱温35～45℃，流速0.2～0.4mL/min；以水
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甲醇作为流动相进行梯度洗脱，洗脱梯度条件为0～2min，水85％；2～6min，水85～15％；6～7.5min，水15％；7.5～7.6min，15～85％；7.6～10min，水85％；
[0011]S4、所述质谱条件：离子源为电喷雾离子源；电喷雾电压：0～7.0min为正离子模式检测，电喷雾电压为5500V，7.0～10min为负离子模式检测，电喷雾电压为
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4500V；离子源温度：550℃；雾化气压力：50psi；气帘气压力：40psi；碰撞气压力：9psi，采用多重反应监测。
[0012]进一步地，步骤S1中，所述混合标准溶液中，甲硝唑、氯霉素浓度为0.05～0.15μg/mL，地美硝唑浓度为0.1～0.3μg/mL。
[0013]更进一步地，步骤S1中，所述内标标准溶液中，地美硝唑氘代内标浓度为0.1～0.3μg/mL，氯霉素氘代内标浓度为0.05～0.15μg/mL。
[0014]进一步地，步骤S2中，所述乙酸铅溶液的浓度为150～250g/L。优选地，所述乙酸铅溶液的浓度为200～250g/L；更优选地，所述乙酸铅溶液的浓度为200g/L。
[0015]更进一步地，步骤S2中，所述除水所用试剂为无水硫酸镁和无水氯化钠。
[0016]进一步地，步骤S2中，所述进样检测的进样量为5～20μL。
[0017]更进一步地，步骤S3中，所述C18色谱柱为Agilent EC
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C18色谱柱，规格为100mm
×
2.1mm，2.7μm。
[0018]优选地，步骤S3中，所述柱温40～45℃，流速0.2～0.3mL/min；更优选地，所述柱温40℃，流速0.3mL/min。
[0019]进一步地，所述甲硝唑、氯霉素的定量限为0.25μg/kg，所述地美硝唑的定量限为0.50μg/kg。
[0020]本专利技术具有以下有益效果：
[0021]本专利技术提供了一种同时测定蜜丸或水蜜丸中甲硝唑、地美硝唑、氯霉素3种兽药残留的方法，将待测样品经过乙酸铅、吸附剂等前处理后，采用高效液相色谱
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串联质谱法进行分离、测定，准确性、稳定性、灵敏度高，可以同时定性和定量；并且不需要对样品进行复杂的样品前处理，仪器使用成本低，对技术人员水平要求低，分析速度快，10min内即可完成一个样品的分析检测，极大的缩短了分析时间，大幅提高检测效率。
附图说明
[0022]图1为实施例1
‑
1.5定性分析中高效液相色谱分离、质谱测定所得甲硝唑、地美硝唑、氯霉素的提取离子流图。
[0023]图2为实施例2
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2.3吸附剂的选择中用500mg PSA对样品进行前处理后高效液相色谱分离、质谱测定所得地美硝唑提取离子流图。
[0024]图3为实施例2
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2.3吸附剂的选择中用100mg MWCNTs
‑
NH对样品进行前处理后高效液相色谱分离、质谱测定所得地美硝唑提取离子流图。
[0025]图4为实施例2
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2.4色谱条件的选择中以0.1％甲酸水
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0.1％甲酸乙腈作为流动相
体系所得地美硝唑提取离子流图。
[0026]图5为实施例2
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2.4色谱条件的选择中以水
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甲醇作为流动相体系所得地美硝唑提取离子流图。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时测定蜜丸或水蜜丸中甲硝唑、地美硝唑、氯霉素3种兽药残留的方法，其特征在于，采用高效液相色谱
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串联质谱法进行测定，具体包括以下步骤：S1、标准溶液制备：甲硝唑、地美硝唑、氯霉素标准物质用乙腈配置成混合标准溶液；地美硝唑氘代内标、氯霉素氘代内标用乙腈配置成内标标准溶液；S2、试样制备：将蜜丸或水蜜丸粉碎，加入步骤S1所得内标标准溶液和乙酸铅溶液，所得上清液除水后用MWCNTs
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NH除杂，所得上清液浓缩、复溶、过滤后，采用高效液相色谱
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串联质谱法进行进样检测；S3、所述高效液相色谱条件：C18色谱柱，柱温35～45℃，流速0.2～0.4mL/min；以水
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甲醇作为流动相进行梯度洗脱，洗脱梯度条件为0～2min，水85％；2～6min，水85～15％；6～7.5min，水15％；7.5～7.6min，15～85％；7.6～10min，水85％；S4、所述质谱条件：离子源为电喷雾离子源；电喷雾电压：0～7.0min为正离子模式检测，电喷雾电压为5500V，7.0～10min为负离子模式检测，电喷雾电压为
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4500V；离子源温度：550℃；雾化气压力：50psi；气帘气压力：40psi；碰撞气压力：9psi，采用多重反应...

【专利技术属性】
技术研发人员：温家欣，曹雅静，陈俏，赖宇红，李华，罗卓雅，
申请(专利权)人：广东省药品检验所广东省药品质量研究所，广东省口岸药品检验所，
类型：发明
国别省市：