一种阿奇霉素中残留甲醛的检测方法技术

本发明专利技术提供一种阿奇霉素中残留甲醛的检测方法，涉及药物分析领域。该方法采用了2,4

【技术实现步骤摘要】
一种阿奇霉素中残留甲醛的检测方法


[0001]本专利技术涉及药物分析领域，具体而言，涉及一种阿奇霉素中残留甲醛的检测方法。

技术介绍

[0002]阿奇霉素是一种属于大环内酯类的抗生素，化学结构与红霉素相似，是在红霉素结构上修饰后，得到的一种广谱抗生素，与红霉素相比，它的抗菌活性更强，抗菌谱更广，不良反应更少，对某些耐受抗生素的致病菌有效，具有组织渗透性强、浓度高，半衰期长的特点，是《2012版中国国家基本药物目录》在列药物。临床上广泛用于治疗敏感致病菌感染引起的呼吸道、泌尿系统、皮肤软组织疾病，也可以用于性病治疗，防治性病传播。
[0003]由于阿奇霉素独特的优势使得国际市场需求日益增大，而国际需求的增大则直接推动了阿奇霉素临床用药的增加，其质量的控制直接关系到患者的服药安全性，无论是从人民群众的用药安全角度，还是科学的严谨性、准确性和全面性角度，都应该对阿奇霉素的的质量严格控制，尤其是基因毒性杂质，具有低浓度、高风险特征，将对人体产生强烈遗传毒性作用，且严重影响药品质量。
[0004]现有技术中，阿奇霉素的合成方法为：以硫氰酸红霉素A是经肟化反应、贝克曼重排反应、还原和甲基化反应而得，成品中会存在基因毒性杂质甲醛残留。由于甲醛是一种破坏生物细胞蛋白质的原生质毒物，会对人的皮肤、呼吸道及内脏造成损害，麻醉人的中枢神经，从而引起肺水肿、肝昏迷、肾衰竭等。因此，基于用药的安全性，准确测定阿奇霉素中甲醛残留量是至关重要的。
[0005]目前国内对甲醛的检测，大多用分光光度法或是一些显色法，这些方法检出限较高，容易受到干扰，且过程繁琐。现有技术采用了2,4二硝基苯肼衍生体系，反应产物甲醛衍生物不需要有机溶剂萃取，可直接用于液相色谱分析，避免萃取过程的损失和繁琐的处理过程。该方法的局限性在于，衍生反应产物极不稳定，容易导致检测结果准确性不高，同时样品需要现配现用，不适用于工业化大生产。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种阿奇霉素中残留甲醛的检测方法。
[0007]本专利技术采用的技术方案如下：
[0008]一种阿奇霉素中残留甲醛的检测方法，将阿奇霉素样品用无水乙醇溶解，然后加入衍生试剂和磷酸水溶液进行衍生反应，反应完全后得到供试品溶液，取供试品溶液进行测定。
[0009]进一步地，所述衍生试剂为2,4
‑
二硝基苯肼的乙醇溶液，浓度为0.3
‑
0.8mg/mL。
[0010]进一步地，磷酸水溶液的浓度为0.01％
‑
0.03％(V/V)。
[0011]进一步地，根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，阿奇霉素的浓度为60
‑
100mg/mL，阿奇霉素、衍生试剂、磷酸水溶液的体积比为1：0.3
‑
0.6：0.8
‑
1.2。
[0012]进一步地，阿奇霉素、衍生试剂、磷酸水溶液的体积比为1：0.4：1。
[0013]进一步地，衍生反应温度为10
‑
40℃，反应时间为30
‑
60min。
[0014]进一步地，衍生反应温度为25℃，反应时间为60min。
[0015]进一步地，供试品溶液采用高效液相色谱进行测定；色谱条件如下：以乙腈
‑
水(V：V)＝50
‑
70:50
‑
30为流动相，柱温20
‑
40℃，流速：0.8
‑
0.9mL/min，检测波长360nm。
[0016]进一步地，以乙腈
‑
水(V：V)＝60:40为流动相，柱温30℃，流速：0.8mL/min。
[0017]本专利技术提供一种阿奇霉素中残留甲醛的检测方法，该方法采用了2,4
‑
二硝基苯肼衍生体系，甲醛与2,4
‑
二硝基苯肼反应生产甲醛2,4
‑
二硝基苯腙的衍生物，从而间接测定甲醛含量，克服了传统检测方法的缺陷。同时，该方法选用乙醇+磷酸作为衍生反应溶剂，反应效率高，得到的衍生产物稳定性好，可在24h内保持稳定，大大提高了检测的准确性，并且打破了样品需要现配现用的局限性，适用于工业化大生产。
具体实施方式
[0018]实施例1
[0019]流速是影响样品洗脱时间的关键参数，很大程度上可以影响到各杂质的分离度，故本实施例中对流速进行优化，以筛选出最佳流速(范围)。
[0020]2,4
‑
二硝基苯肼乙醇溶液：取2,4
‑
二硝基苯肼约50mg，用无水乙醇溶解并稀释到100mL。
[0021]磷酸水溶液：取磷酸1mL，置于50mL容量瓶中，用纯化水稀释并定容至刻度，即得。
[0022]供试品溶液：将阿奇霉素样品约2g用无水乙醇溶解并稀释至25mL；取该溶液5mL，置于25mL量瓶中，加入2,4
‑
二硝基苯肼乙醇溶液2mL、磷酸水溶液5mL，在25℃下放置1h进行衍生反应，后用无水乙醇稀释至刻度，即得。
[0023]取供试品溶液溶液进行高效液相色谱检测。检测时，采用不同的流速，分别为1.0mL/min、0.9mL/min、0.8mL/min。色谱柱：ALLtima C18，4.6mm
×
250mm，5μm；以乙腈
‑
水(V：V)＝60:40为流动相，柱温30℃，检测波长360nm，进样量为50μL。检测结果如表1所示。
[0024]表1流速筛选实验结果对比表
[0025]流速保留时间(min)拖尾因子主峰理论塔板数最小分离度1.0mL/min6.7440.9756322.320.9mL/min7.5600.9675643.210.8mL/min8.8430.9664055.35
[0026]由表1可知，采用0.8mL/min～1.0mL/min的流速，0.8mL/min分离度较高，分离效果最好，理论塔板数均较高。另外，在研究过程中发现，流速为1.0mL/min时出峰较早，有杂质干扰及分不开的情况出现。
[0027]实施例2
[0028]本实施例考察甲醇、乙醇、乙腈、甲醇+盐酸、甲醇+磷酸、乙醇+盐酸、乙醇+磷酸共7种溶剂对衍生反应的影响，以筛选出适宜的衍生反应条件。其中，盐酸浓度为2moL/L，磷酸即实施例1中的磷酸水溶液。
[0029]首先考察7种溶剂对衍生反应的影响，包括对反应所需时间和温度的影响。考察反应所需时间的，在25℃进行。考察反应温度时，反应时间设置为40min。高效液相夜色条件如实施例1中所示，流速为0.8mL/min。考察结果如表2所示。
[0030]表2不同溶剂对衍生反应的影响
[0031][0032]由表2可知，以单独的甲醇、乙醇或乙腈为溶剂，60min尚未衍生化反应完全，且反应温度在40℃时，衍生反应产物稳定性均下降。以甲醇+盐酸或甲醇+磷酸为溶剂本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种阿奇霉素中残留甲醛的检测方法，其特征在于，将阿奇霉素样品用无水乙醇溶解，然后加入衍生试剂和磷酸水溶液进行衍生反应，反应完全后得到供试品溶液，取供试品溶液进行测定。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述衍生试剂为2,4
‑
二硝基苯肼的乙醇溶液，浓度为0.3
‑
0.8mg/mL。3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，磷酸水溶液的浓度为0.01％
‑
0.03％(V/V)。4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，阿奇霉素的浓度为60
‑
100mg/mL，阿奇霉素、衍生试剂、磷酸水溶液的体积比为1：0.3
‑
0.6：0.8
‑
1.2。5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，阿奇霉素、衍生试剂、磷酸水溶液的...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈为萍，陈焕海，吉家玉，童庆国，刘争光，黄浩喜，
申请(专利权)人：海南倍特药业有限公司，
类型：发明
国别省市：