抗VEGF抗体制剂制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，涉及一种抗VEGF抗体制剂。所述抗体制剂靶向作用于人VEGF，能以高亲和力与人VEGF特异性结合，进而抑制新生血管生成，其主要为液体制剂。所述液体制剂可增强含重组抗VEGF人源化单克隆抗体药物的稳定性，延长其在制剂中的保存周期。本发明专利技术的制剂具有高稳定性，比如在经过高温40℃放置20天，至少5次循环冻融，25℃放置6个月后，或2～8℃保存至少12个月，仍然保持稳定。本发明专利技术的制剂可用于静脉、皮下、眼内、肌肉内或玻璃体注射使用。

【技术实现步骤摘要】
抗VEGF抗体制剂
本专利技术属于生物医药领域，涉及抗VEGF抗体制剂及其制备方法以及应用。
技术介绍
血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)被认为是在生理和病理血管生成中最为关键的因子。VEGF除了是血管生成和脉管生成中的血管生成因子，VEGF还是多向性的生长因子，在内皮细胞存活、血管渗透性和血管舒张、单核细胞趋化性和钙流入中表现出多种生物效应，例如有报道称VEGF对视网膜色素内皮细胞和神经膜细胞有促进细胞分裂效应。大量数据显示VEGF在涉及病理性血管生成的疾病发展中起到关键作用，VEGFmRNA在大部分人类肿瘤中过表达，VEGF在房水中的浓度与在患有糖尿病或其它缺血性视网膜疾病的患者中发现的血管活性增生高度相关，尤其是在年龄相关黄斑病变(AMD)患者中脉络丛新血管形成膜中更甚。VEGF的过表达不一定是湿性AMD的关键因子，但是无论是在实验模型还是在湿性AMD的病理性血管生成中，都发现存在高水平的VEGF表达。有相当数量的文献报道，通过中和VEGF，血管新生和血管渗漏可以得到抑制。也有很多文献报道，抑制VEGF可以治疗多种肿瘤。所以抗VEGF抗体或VEGF抑制物是治疗实体瘤和多种眼内新生血管病症和其他与VEGF过表达相关疾病的有效候选物。现有技术中，已商业化的抗VEGF抗体如贝伐珠单抗(Bevacizumab，商品名：)、雷珠单抗(Ranibizumab，商品名：)、阿柏西普康柏西普然而，抗体作为蛋白质，比传统的无机和有机药物更加复杂。蛋白质药物制剂在保藏过程中容易存在化学不稳定性(如脱酰胺化、外消旋化、水解、氧化、β消除或二硫键交换等等)或者物理不稳定性(如变性、聚集、沉淀或吸附)所导致的降解。抗体制剂的不稳定性，不仅会带来药效的降低或消失，更会对患者的健康产生不利的影响。因此，抗体制剂需要是长期稳定的、含有安全且有效量的药物化合物。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种适用于特定抗体的制剂。本专利技术的另一个目的是提供一种储藏和递送中保持稳定的抗体制剂。本专利技术的另一个目的是提供可以包含高浓度抗体的稳定的抗体制剂。本专利技术的另一个目的是提供适用于眼内施用的抗体制剂。本专利技术的另一个目的是提供适用于玻璃体施用的抗体制剂。本专利技术的上述目的通过以下技术手段实现：一方面，本专利技术提供了抗体制剂，所述制剂含有抗VEGF抗体或其片段，以及缓冲剂。所述抗VEGF抗体或其片段的重链可变区含有如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列，所述抗VEGF抗体或其片段的轻链可变区含有如SEQIDNO:2所示的氨基酸序列。在一些实施例中，所述抗VEGF抗体的重链含有如SEQIDNO:3所示的氨基酸序列，所述抗VEGF抗体的轻链含有如SEQIDNO:4所示的氨基酸序列。在一些实施方式中，所述抗体是人源化全长抗VEGF的IgG1抗体。在一些实施方式中，所述抗体是BAT5906，其具体的情况参见专利201810011151.1。在一些实施方式中，所述抗体是糖基化的和/或非糖基化的。在一些实施方式中，所述抗体的量为5～100mg/ml；或为6～90mg/ml；或为6～80mg/ml；或为25～80mg/ml；或为25～50mg/ml。在一些实施方式中，抗体的量如上列举的那些范围内的任一值，例如6mg/ml、12mg/ml、25mg/ml、50mg/ml、60mg/ml、80mg/ml、90mg/ml或100mg/ml等等。在一些实施方式中，所述制剂pH为4.0～7.0，抗体在该pH范围内保持稳定。在一些实施方式中，所述制剂的pH为5.0～6.5。在一些实施方式中，所述制剂的pH为5.5～6.5；在一些实施方式中，所述制剂的pH为5.4～6.4。在一些实施方式中，所述制剂的pH为5.8～6.2。在一些实施方式中，pH是如上列举的那些pH范围内的任一pH值，例如5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5等等。在一些实施方式中，所述缓冲剂选自组氨酸盐缓冲剂、琥珀酸盐缓冲剂、醋酸盐缓冲剂、柠檬酸盐缓冲剂、磷酸盐缓冲剂或其组合。在一些实施方式中，所述缓冲剂选自组氨酸盐缓冲剂、琥珀酸盐缓冲剂、醋酸盐缓冲剂或其组合。在一些实施方式中，所述缓冲剂选自组氨酸盐缓冲剂。在一些实施方式中，组氨酸盐缓冲剂为L-组氨酸和L-组氨酸盐酸盐组成缓冲体系的缓冲剂。在一些实施方式中，所述缓冲剂的量为约5～50mM；在一些实施方式中，所述缓冲剂的量为约5～30mM；在一些实施方式中，所述缓冲剂的量为约5～20mM；在一些实施方式中，所述缓冲剂的量为约5～15mM；在一些实施方式中，所述缓冲剂的量为约5～10mM。在一些实施方式中，所述缓冲剂的量如上列举的那些范围内的任一值，例如5mM、6mM、7mM、8mM、9mM、10mM、11mM、12mM、13mM、14mM、15mM、16mM、17mM、18mM、19mM、20mM、22mM、22mM、23mM、24mM、25mM、26mM、27mM、28mM、29mM、30mM等等。在一些实施方式中，所述缓冲剂的量为约10mM。在一些实施方式中，缓冲剂为约10mM的组氨酸盐缓冲剂。在一些实施方式中，当所述缓冲体系选自两种的组合时，前者与后者在体系中的摩尔比为1:2～2:1；或为1:1。本专利技术所述的抗体制剂还进一步含有稳定剂。在一些实施方式中，所述稳定剂选自海藻糖、蔗糖、甘露醇、氯化钠、山梨醇、脯氨酸、甘氨酸、甲硫氨酸，或其盐或水合物，或其组合。在一些实施方式中，所述稳定剂选自蔗糖和/或海藻糖。在一些实施方式中，所述稳定剂为海藻糖。在一些实施方式中，所述稳定剂的量为0.5％～20％。在一些实施方式中，所述稳定剂的量约为0.5-15％。在一些实施方式中，所述稳定剂的量约为1％～15％。在一些实施方式中，所述稳定剂的量约为2％～10％；在一些实施方式中，所述稳定剂的量如上列举的那些范围内的任一值，例如10％、9％、8.9％、8.8％、8.7％、8.6％、8.5％、8.4％、8.3％、8.2％、8.1％、8％、7.9％或7.8％。在一些实施方式中，稳定剂为海藻糖，用量相当于约8.8％的海藻糖二水合物。本专利技术的抗体制剂可进一步含有表面活性剂。在一些实施方式中，所述抗体制剂所选的表面活性剂属于非离子型表面活性剂。在一些实施方式中，所述的表面活性剂选自吐温和/或泊洛沙姆。在一些实施方式中，所述的表面活性剂选自吐温20，吐温80和/或泊洛沙姆188。在一些实施方式中，所述吐温选自吐温20和/或吐温80。在一些实施方式中，所述表面活性剂选自吐温20。在一些实施方式中，所述表面活性剂的量为0.001％～0.2％；或为0.01％～0.2％。在一些实施方式中，所述表面活性剂的量为0.01％～0.1％。在一些实施方式中，所述表面活性剂的量如上列举的那些范围内的任一值。在一些实本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗体制剂，其特征在于，所述抗体制剂含有抗VEGF抗体或其片段；所述抗VEGF抗体或其片段的重链可变区含有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，所述抗VEGF抗体或其片段的轻链可变区含有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列；以及，所述抗体制剂还包含缓冲剂、稳定剂和表面活性剂中的一种或多种。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗体制剂，其特征在于，所述抗体制剂含有抗VEGF抗体或其片段；所述抗VEGF抗体或其片段的重链可变区含有如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列，所述抗VEGF抗体或其片段的轻链可变区含有如SEQIDNO:2所示的氨基酸序列；以及，所述抗体制剂还包含缓冲剂、稳定剂和表面活性剂中的一种或多种。


2.根据权利要求1所述抗体制剂，其特征在于，所述抗体的量为5～100mg/ml。


3.根据权利要求1所述抗体制剂，其特征在于，所述抗体制剂的pH为4.0～7.0。


4.根据权利要求1所述抗体制剂，其特征在于，所述缓冲剂选自组氨酸盐缓冲剂、琥珀酸盐缓冲剂、醋酸盐缓冲剂、柠檬酸盐缓冲剂和磷酸盐缓冲剂中的一种或多种；优选地，所述缓冲剂的量是5～50mM。


5.根据权利要求1所述抗体制剂，其特征在于，所述稳定剂选自海藻糖、蔗糖、甘露醇、氯化钠、山梨醇、脯氨酸、甘氨酸和甲硫氨酸中的一种或多种；优选地，所述稳定剂的量为0.5％～20％。


6.根据权利要求1所述抗体制剂，其特征在于，所述的表面活性剂选自吐温和/或泊洛沙姆；优选地，所述表面活性剂的量为0.001％～0.2％。


7.根据权利要求1所述抗体制剂，其特征在于，所述抗体制剂含有以下组分：
(1)5～100mg/ml的抗VEGF抗体
(2)5～50mM缓冲剂
(3)0...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗晓萍，吴用，吴晓云，李志强，刘育杰，王盛武，刘翠华，李胜峰，
申请(专利权)人：百奥泰生物制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44