【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】针对螯合的放射性核素的抗体和清除剂专利
本申请涉及特异性结合螯合的放射性核素的抗体，包括双特异性抗体。本申请进一步涉及此类双特异性抗体在诸如放射性免疫成像和放射性免疫疗法等应用中的用途。本申请另外涉及在此类方法中有用的清除剂和组合物。专利技术背景已经开发了单克隆抗体将药物靶向癌细胞。通过将毒性剂与结合肿瘤相关抗原的抗体缀合，有潜力提供更多的特异性肿瘤杀伤及更少的对周围组织的损伤。在预靶向的放射性免疫疗法(PRIT)中，使用具有一方面对肿瘤相关抗原和另一方面对带放射性标记物的化合物的亲和力的抗体构建物。第一步，施用抗体并定位在肿瘤内。随后，施用带放射性标记物的化合物。因为带放射性标记物的化合物较小，所以它能快速投递至肿瘤并快速清除，这降低肿瘤以外的辐射暴露(Goldenbergetal.，Theranostics2012，2(5)：523-540)。在直接细胞杀伤效果以外，PRIT还可以起免疫原性细胞死亡的诱导剂和癌症免疫疗法和内源疫苗接种办法的潜在组合配偶的作用。还可以对成像使用类似的过程。预靶向可以利用双特异性抗体或使用亲合素-生物素的系统，尽管后者具有亲合素/链霉亲合素具有免疫原性的缺点。供PRIT中使用的放射性核素通常是加载有感兴趣放射性核素的螯合物的形式。Suetal.，NuclMedBiol2005，32：741-747评估了具有单抗-链霉亲合素和DOTA-生物素的一种抗体预靶向系统。发现了带放射性标记物的212Pb-DOTA-生物素不稳定，自212Pb-DOTA释放大于30％的...
【技术保护点】
1.一种清除剂,其包含与选自DOTAM和DOTAM的功能性变体的螯合剂缀合的右旋糖酐或其衍生物,其中所述螯合剂是与金属离子复合的。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180416 US 62/658,468;20180416 US 62/658,4711.一种清除剂,其包含与选自DOTAM和DOTAM的功能性变体的螯合剂缀合的右旋糖酐或其衍生物,其中所述螯合剂是与金属离子复合的。
2.权利要求1的清除剂,其是下式的化合物:
右旋糖酐-(接头-(M-DOTAM))x,
其中
右旋糖酐是右旋糖酐或其衍生物；
接头是连接模块；
M-DOTAM是并入金属离子的DOTAM或其功能性变体；且
x≥1。
3.权利要求1的清除剂,其中x是20或更多,25或更多,30或更多,35或更多,40或更多,或50或更多。
4.权利要求2或权利要求3的清除剂,其中连接模块是下式的二价基团:
其中y是1至6,*代表附着于右旋糖酐的点,且**代表附着于DOTAM或其功能性变体的环原子的点。
5.前述权利要求任一项的清除剂,其中右旋糖酐的衍生物是氨基右旋糖酐,任选用一个或多个选自氨基酸和除了葡萄糖以外的糖的基团取代的。
6.前述权利要求任一项的清除剂,其中右旋糖酐或右旋糖酐衍生物的作为葡萄糖单元的数目的百分比的DOTAM基团的数目是至少1％,至少1.5％,至少2％,至少2.5％,至少3％,至少5％。
7.前述权利要求任一项的清除剂,其中右旋糖酐的平均分子量是200-800kDa,任选大于300,350,400或450kDa,且任选小于700,650,600或550kDa,任选约500kDa。
8.权利要求7的清除剂,其中已经去除小于分子量截留的右旋糖酐成分或清除剂,其中分子量截留是50kDa或以上,100kDa或以上,或200kDa或以上。
9.权利要求8的清除剂,其中分子量截留在范围50kDa-250kDa或50kDa-200kDa,任选100kDa-200kDa中,且任选约100kDa,150kDa或200kDa。
10.权利要求7至权利要求9任一项的清除剂,其中平均分子量是450kDa-550kDa,例如约500kDa。
11.前述权利要求任一项的清除剂,其中金属离子是稳定的同位素或本质上稳定的同位素。
12.前述权利要求任一项的清除剂,其中金属离子是Pb,Bi或Ca离子。
13.一种制备清除剂的方法,其包括将右旋糖酐或右旋糖酐衍生物与DOTAM或其功能性变体或衍生物缀合,其中该方法牵涉在将DOTAM与右旋糖酐缀合之前和/或之后将DOTAM与金属离子螯合。
14.权利要求13的方法,其中金属离子是稳定的或本质上稳定的金属离子。
15.权利要求13或14的方法,其中金属离子是Pb,Bi或Ca离子。
16.权利要求13-15任一项的方法,其中在缀合前右旋糖酐或右旋糖酐衍生物经受过滤步骤以去除50kDa或以上,100kDa或以上,或200kDa或以上的分子量截留/阈以下的种类,和/或其中该方法包括使缀合物经受过滤步骤以去除50kDa或以上,100kDa或以上,或200kDa或以上的分子量截留/阈以下的种类。
17.依照权利要求1至12任一项的清除剂,供一种放射性免疫疗法或放射性免疫成像的方法中使用。
18.依照权利要求1至12任一项的清除剂,供一种预靶向的放射性成像的方法中使用,其包括:
i)对受试者施用包含至少一个对Pb-DOTAM螯合物特异性的抗原结合位点和至少一个对靶抗原特异性的抗原结合位点的多特异性或双特异性抗体,其中在施用后抗体与靶抗原结合并定位于表达靶抗原的细胞的表面；
ii)施用依照权利要求1至11任一项的清除剂,其中清除剂能够在针对Pb-DOTAM螯合物的结合位点处结合抗体且封闭未定位于细胞的表面的抗体的抗原结合位点和/或提高清除；
该方法任选进一步包括:
iii)随后施用包含与Pb放射性同位素螯合的DOTAM的复合物,其中所述复合物与定位于细胞的表面的抗体结合；且
该方法任选进一步包括:
iv)对螯合的放射性核素定位其中的组织或器官成像。
19.依照权利要求1至12任一项的清除剂,供一种预靶向的放射性免疫疗法的方法中使用,其包括:
i)对受试者施用包含至少一个对Pb-DOTAM螯合物特异性的抗原结合位点和至少一个对靶抗原特异性的抗原结合位点的多特异性或双特异性抗体,其中在施用后抗体与靶抗原结合并定位于表达靶抗原的细胞的表面；
ii)施用依照权利要求1至12任一项的清除剂,其中清除剂能够在针对Pb-DOTAM螯合物的结合位点处结合抗体且提高抗体的清除和/或封闭未定位于细胞的表面的抗体的抗原结合位点；
该方法任选进一步包括:
iii)随后施用包含与Pb放射性同位素螯合的DOTAM的复合物,其中所述复合物与定位于细胞的表面的抗体结合。
20.一种预靶向的放射性成像的方法,其包括:
i)对受试者施用包含至少一个对Pb-DOTAM螯合物特异性的抗原结合位点和至少一个对靶抗原特异性的抗原结合位点的多特异性或双特异性抗体,其中在施用后抗体与靶抗原结合并定位于表达靶抗原的细胞的表面；
ii)施用依照权利要求1至12任一项的清除剂,其中清除剂能够在针对Pb-DOTAM螯合物的结合位点处结合抗体且提高抗体的清除和/或封闭未定位于细胞的表面的抗体的抗原结合位点；
任选进一步包括:
iii)随后施用包含与Pb放射性同位素螯合的DOTAM或其功能性变体的复合物,其中所述复合物与定位于细胞的表面的抗体结合；且
任选进一步包括:
iv)对螯合的放射性核素定位其中的组织或器官成像。
21.一种预靶向的放射性免疫疗法的方法,其包括:
i)对受试者施用包含至少一个对Pb-DOTAM螯合物特异性的抗原结合位点和至少一个对靶抗原特异性的抗原结合位点的多特异性或双特异性抗体,其中在施用后抗体与靶抗原结合并定位于表达靶抗原的细胞的表面；
ii)施用依照权利要求1至12任一项的清除剂,其中清除剂能够在针对Pb-DOTAM螯合物的结合位点处结合抗体且提高抗体的清除和/或封闭未定位于细胞的表面的抗体的抗原结合位点；
任选进一步包括:
iii)随后施用包含与Pb放射性同位素螯合的DOTAM或其功能性变体的复合物,其中所述复合物与定位于细胞的表面的抗体结合。
22.依照权利要求18或19的供使用的清除剂或依照权利要求20或21的方法,其中对Pb-DOTAM螯合物特异性的抗原结合位点至少包含:
a)包含氨基酸序列FIGSRGDTYYASWAKG(SEQIDNO:2)的重链CDR2,或其具有SEQIDNO:2中多至1,2,或3处替代的变体,其中这些替代不包括Phe50,Asp56和Tyr58,且任选也不包括Gly52和/或Arg54；
b)包含氨基酸序列ERDPYGGGAYPPHL(SEQIDNO:3)的重链CDR3,或其具有SEQIDNO:3中多至1,2,或3处替代的变体,其中这些替代不包括Glu95,Arg96,Asp97,Pro98,且任选也不包括Ala100C,Tyr100D,和/或Pro100E,和/或任选也不包括Tyr99；
c)包含氨基酸序列QSSHSVYSDNDLA(SEQIDNO:4)的轻链CDR1,或其具有SEQIDNO:4中多至1,2,或3处替代的变体,其中这些替代不包括Tyr28和Asp32；
d)包含氨基酸序列LGGYDDESDTYG(SEQIDNO:6)的轻链CDR3,或其具有SEQIDNO:6中多至1,2,或3处替代的变体,其中这些替代不包括Gly91,Tyr92,Asp93,Thr95c和Tyr96,
其中编号方式依照Kabat。
23.依照权利要求22的供使用的清除剂或方法,其中对Pb-DOTAM螯合物特异性的抗原结合位点进一步包含重链CDR1和轻链CDR2。
24.依照权利要求23的供使用的清除剂或方法,其中对Pb-DOTAM螯合物特异性的抗原结合位点包含:
i)包含氨基酸序列GFSLSTYSMS(SEQIDNO:1)的重链CDR1,或其具有SEQIDNO:1中多至1,2,或3处替代的变体,任选保守替代；和/或
ii)包含氨基酸序列QASKLAS(SEQIDNO:5)的轻链CDR2,或其具有SEQIDNO:5中至少1,2或3处替代的变体,任选保守替代。
25.依照权利要求18至24任一项的供使用的清除剂或方法,其中对Pb-DOTAM螯合物特异性的抗原结合位点包含至少一种,两种,三种,四种,五种,或六种选自下述的CDR:
a)包含氨基酸序列GFSLSTYSMS(SEQIDNO:1)的重链CDR1,
b)包含氨基酸序列FIGSRGDTYYASWAKWG(SEQIDNO:2)的重链CDR2,
c)包含氨基酸序列ERDPYGGGAYPPHL(SEQIDNO:3)的重链CDR3,
d)包含氨基酸序列QSSHSVYSDNDLA(SEQIDNO:4)的轻链CDR1,
e)包含氨基酸序列QASKLAS(SEQIDNO:5)的轻链CDR2,
f)包含氨基酸序列LGGYDDESDTYG(SEQIDNO:6)的轻链CDR3。
26.依照权利要求18至25任一项的供使用的清除剂或方法,其中对Pb-DOTAM螯合物特异性的抗原结合位点与下述各项结合相同或交叠的Pb-DOTAM螯合物表位:
i)具有包含SEQIDNO:7的氨基酸序列的重链可变域和包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的轻链可变域的抗体；或
ii)具有包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的重链可变域和包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的轻链可变域的抗体。
27.依照权利要求18至26任一项的供使用的清除剂或方法,其中对Pb-DOTAM螯合物特异性的抗原结合位点是人,嵌合或人源化的。
28.依照权利要求18至27任一项的供使用的清除剂或方法,其中对Pb-DOTAM螯合物特异性的抗原结合位点包含:包含选自由SEQIDNO:7和SEQIDNO:9组成的组的氨基酸序列的重链可变域,或其包含与SEQIDNO:7或SEQIDNO:9具有至少90,91,92,93,94,95,96,97,98,或99％同一性的氨基酸序列的变体。
29.依照权利要求18至28任一项的供使用的清除剂或方法,其中对Pb-DOTAM特异性的抗原结合位点包含:包含选自由SEQIDNO:8和SEQIDNO:10组成的组的氨基酸序列的轻链可变域,或其包含与SEQIDNO:8或10具有至少90,91,92,93,94,95,96,97,98,或99％同一性的氨基酸序列的变体。
30.依照权利要求18至29任一项的供使用的清除剂或方法,其中对Pb-DOTAM螯合物特异性的抗原结合位点包含:包含SEQIDNO:7的氨基酸序列的重链可变域和包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的轻链可变域。
31.依照权利要求18至30任一项的供使用的清除剂或方法,其中对Pb-DOTAM螯合物特异性的抗原结合位点包含:包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的重链可变域和包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的轻链可变域。
32.依照权利要求18至30任一项的供使用的清除剂或方法,其中对Pb-DOTAM螯合物特异性的抗原结合位点以100pM,50pM,20pM,10pM,5pM,1pM或更小的Kd值结合Pb-DOTAM螯合物。
33.依照权利要求18至32任一项的供使用的清除剂或方法,其中对Pb-DOTAM螯合物特异性的抗原结合位点结合Pb-DOTAM螯合物和Bi-DOTAM螯合物,且其中针对Bi-DOTAM螯合物/Pb-DOTAM螯合物的Kd值之比在0.1-10或1-10的范围中。
34.依照权利要求18至33任一项的供使用的清除剂或方法,其中靶抗原是肿瘤特异性抗原。
35.依照权利要求18至34任一项的供使用的清除剂或方法,其中肿瘤特异性抗原选自由CEA,HER2和CD20组成的组。
36.依照权利要求18至35任一项的供使用的清除剂或方法,其中肿瘤特异性抗原是癌胚抗原(CEA)。
37.依照权利要求18至36任一项的供使用的清除剂或方法,其中多特异性或双特异性抗体包含至少一个对Pb-DOTAM螯合物特异性的抗原结合位点和至少一个对CEA特异性的抗原结合位点,且其中对CEA特异性的抗原结合位点包含包含至少一种,两种或三种重链CDR的重链,其中:
d)重链CDR1包含SEQIDNO:11的氨基酸序列,
e)重链CDR2包含SEQIDNO:12的氨基酸序列,
f)重链CDR3包含SEQIDNO:13的氨基酸序列；和/或
对CEA特异性的抗原结合位点包含包含至少一种,两种或三种轻链CDR的轻链,其中:
a)轻链CDR1包含SEQIDNO:14的氨基酸序列；
b)轻链CDR2包含SEQIDNO:15的氨基酸序列；
c)轻链CDR3包含SEQIDNO:16的氨基酸序列。
38.依照权利要求37的供使用的清除剂或方法,其中针对CEA的抗原结合位点包含至少一种,两种,三种,四种,五种,或六种(即所有)选自下述的CDR:
a)包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的重链CDR1；
b)包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的重链CDR2；
c)包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的重链CDR3；
d)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的轻链CDR1；
e)包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的轻链CDR2；
f)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的轻链CDR3。
39.依照权利要求18至38任一项的供使用的清除剂或方法,其中多特异性或双特异性抗体包含至少一个对Pb-DOTAM螯合物特异性的抗原结合位点和至少一个对CEA特异性的抗原结合位点,且其中对CEA特异性的抗原结合位点包含
i)包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的重链可变域,或其包含与SEQIDNO:17具有至少90,91,92,93,94,95,96,97,98,或99％同一性的氨基酸序列的变体；和/或
ii)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的轻链可变域,或其包...
【专利技术属性】
技术研发人员：J·托格，P·朱雷克，F·罗哈斯奎亚诺，G·E·基弗，O·弗雷塔格，C·格德斯，C·克莱因，P·乌玛娜，A·哈斯，S·弗罗斯特，A·赛迪，T·纳亚克，
申请(专利权)人：奥兰诺医药公司，豪夫迈·罗氏有限公司，
类型：发明
国别省市：法国;FR
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