鲜牛奶中是否掺有还原奶的检验方法技术

本发明专利技术公开了一种鲜牛奶中是否掺有还原奶的快速检验方法，依次包括以下步骤：１）将待检牛奶样品、醋酸和醋酸钠缓冲液混合后，离心得上清液；２）将上清液过滤得过滤液；３）将过滤液与水混合制成待测液；４）取用待测液，以１ｍｇ／Ｌ的牛血清白蛋白为外标，在荧光分光光度计上测量；得美拉德反应产物的荧光值和色氨酸的荧光值；５）用美拉德反应产物的荧光值除以色氨酸的荧光值后再乘以１００，得测试值；当牛奶样品为原奶时，测试值＜１０为不掺有还原奶的合格品；当待检牛奶样品为巴氏杀菌奶时，测试值＜１１．５为不掺有还原奶的合格品。本发明专利技术的鲜牛奶中是否掺有还原奶的快速检验方法，使用简便、快速，测试灵敏度高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种。
技术介绍
随着人们生活水平的提高，奶制品在国内的消费量迅速增加；加快发展奶业，提高居民奶类消费水平是《中国食物与营养发展纲要(2001～2010年)》优先考虑的食物发展领域。近几年，我国城镇居民奶业消费增长幅度都在20％以上，2003年城镇居民奶类人均消费量(折鲜牛奶)已达25公斤左右，饮用巴氏杀菌奶等液态奶已在我国渐成习惯，液态奶亦成为我国的主要乳制品。在液态奶的主要产品中，巴氏杀菌奶因其较高的营养价值，是我国大力发展的主要牛奶产品。原料上一般要求采用鲜牛奶，但由于我国奶源增长较慢，许多工厂采用奶粉加工的还原奶或将还原奶掺入到鲜牛奶中来生产巴氏杀菌奶。还原奶，是指将奶粉经过处理和勾兑还原成的液态奶。在国内，按一定比例将还原奶掺入鲜牛奶中生产巴氏杀菌奶并进行销售已相当普遍。一些企业生产的超高温灭菌奶和调味奶中，还原奶的掺入比例有时高达50％以上。从营养角度而言，还原奶的质量一定程度上低于纯鲜牛奶，因为还原奶是奶粉经过加水溶解、高温杀菌等多种程序制成的，营养不如鲜牛奶，口味、纯度、鲜度也相对较差。但由于进口奶粉每吨到岸价有时仅为1.4万～1.5万元，每吨奶粉可还原成8吨液态奶，而国内8吨原料奶的收购往往高于此价。正因为生产还原奶具有较好的利润，所以国内有很多企业在生产液态奶时掺入了一定量的还原奶。国际上，一些缺奶的地区和国家生产还原奶都有一段历史了，但他们明确地将还原奶标识出来，让消费者明明白白地消费。国外液态奶的“明白消费”，不仅保护了消费者的知情权，也有利于公平竞争。目前，我国的鲜牛奶标识执行还很不理想，很多企业用还原奶生产液态乳制品，但他们标识的却是鲜牛奶，另外，在鲜牛奶中加入一定量的还原奶作为鲜牛奶更有隐藏性，虽然近年来国家有关管理部门加大了监管力度，但到目前为止，还没有一个有效的检测还原奶的办法，特别是分析鲜牛奶中掺入较低比例还原奶的方法，导致无法由检测或管理部门做出合理的评估。因此，研究一种快速、简捷、精确的检测鲜牛奶中还原奶掺假的检测机理和方法，有利于规范国内的乳品市场，有利于乳品企业的公平竞争，更有利用于维护消费者的权益。目前，鲜牛奶中还原奶掺假的方法，国内尚未有有关此类的方法；国外的有1)、可见光谱和紫外光谱(700～240nm)的测定方法，但该方法处理步骤复杂，时间长；2)、用HPLC检测furosine来检测原料乳和巴氏杀菌奶中是否掺入还原奶，但该方法所需标准品价格昂贵且处理步骤复杂；3)、测定牛奶中水的δD和18O稳定同位素比率来鉴别鲜牛奶中是否掺有还原奶，但该方法处理过程复杂，花费时间长以及成本高的缺点。上述方法因为各种原因，不能普及使用。
技术实现思路
针对现有技术中存在的不足之处，本专利技术提供一种使用简便、快速，且测试灵敏度高的。本专利技术为达到以上目的，是通过这样的技术方案来实现的提供一种，依次包括以下步骤1)、取待检牛奶样品于离心容器中；再向所述离心容器中加入pH4.6、0.1mol/L的醋酸和醋酸钠缓冲液，混合均匀后，静置4～6分钟，然后在10～20℃的温度下以3500g～4500g离心8～12分钟，得上清液；醋酸和醋酸钠缓冲液与待检牛奶样品的体积比为5～7∶1；2)、将上述上清液用0.4～0.5μm的水性滤膜过滤，得过滤液；3)、将上述过滤液与水按照1∶40～60的体积比混合制成待测液；4)、取用上述待测液，以1mg/L的牛血清白蛋白为外标，在荧光分光光度计上测量；调整荧光分光光度计的激发波长为330nm、发射波长为420nm时，记录美拉德反应产物的荧光值；调整荧光分光光度计的激发波长为290nm、发射波长为340nm时，记录色氨酸的荧光值；5)用上述美拉德反应产物的荧光值除以色氨酸的荧光值后再乘以100，得测试值；当待检牛奶样品为原奶时，测试值＜10为合格品、即不掺有还原奶，测试值≥10为不合格品、即掺有还原奶；当待检牛奶样品为巴氏杀菌奶时，测试值＜11.5为合格品、即不掺有还原奶，测试值≥11.5为不合格品、即掺有还原奶。作为本专利技术的的一种改进步骤1)中所用的离心容器为具塞离心管。本专利技术的，使用简便、快速、灵敏度高，易于把握操作，适合食品检测机构、广大农村、城市的奶收购站和奶检站等机构推广应用。本专利技术的，是否掺入全脂奶粉还原奶的最低检出限为5％(体积比)。当原奶中含有5％、10％、20％、30％、40％的还原奶时，使用本专利技术的快速检验方法，具体测试结果见表一。表一 测试结果表明原奶中含有的还原奶比例越高，测试值的数据越大。本专利技术的快速检验方法，是否掺入全脂奶粉还原奶的最低检出限为5％。当巴氏杀菌奶中含有5％、10％、20％、30％、40％的还原奶时，使用本专利技术的快速检验方法，具体测试结果见表二。表二 测试结果表明巴氏杀菌奶中含有的还原奶比例越高，测试值的数据越大。本专利技术的快速检验方法，是否掺入全脂奶粉还原奶的最低检出限为5％。具体实施例方式实施例1、一种，依次进行以下步骤 1)、取1ml待检牛奶样品于具塞离心管中；再向所述具塞离心管中加入6mlpH4.6、0.1mol/L的醋酸和醋酸钠缓冲液，混合均匀后，静置5分钟，然后在10～20℃的温度下以3500g～4500g离心8～12分钟，得上清液；2)、将上述上清液用0.45μm的水性滤膜过滤，得过滤液；3)、选用上述0.1ml的过滤液与5ml的水混合制成待测液；4)、取用上述待测液，以1mg/L的牛血清白蛋白为外标，在荧光分光光度计上测量；调整荧光分光光度计的激发波长为330nm、发射波长为420nm时，记录美拉德反应产物的荧光值；调整荧光分光光度计的激发波长为290nm、发射波长为340nm时，记录色氨酸的荧光值；5)用上述美拉德反应产物的荧光值除以色氨酸的荧光值后再乘以100，得测试值；当待检牛奶样品为原奶时，测试值＜10为合格品、即不掺有还原奶，测试值≥10为不合格品、即掺有还原奶；当待检牛奶样品为巴氏杀菌奶时，测试值＜11.5为合格品、即不掺有还原奶，测试值≥11.5为不合格品、即掺有还原奶。实施例2、一种，依次进行以下步骤1)、取1ml待检牛奶样品于具塞离心管中；再向所述具塞离心管中加入5mlpH4.6、0.1mol/L的醋酸和醋酸钠缓冲液，混合均匀后，静置4～6分钟，然后在10～20℃的温度下以3500g～4500g离心8～12分钟，得上清液；2)、将上述上清液用0.45μm的水性滤膜过滤，得过滤液；3)、选用上述0.1ml的过滤液与4ml的水混合制成待测液；4)、取用上述待测液，以1mg/L的牛血清白蛋白为外标，在荧光分光光度计上测量；调整荧光分光光度计的激发波长为330nm、发射波长为420nm时，记录美拉德反应产物的荧光值；调整荧光分光光度计的激发波长为290nm、发射波长为340nm时，记录色氨酸的荧光值；5)用上述美拉德反应产物的荧光值除以色氨酸的荧光值后再乘以100，得测试值；当待检牛奶样品为原奶时，测试值＜10为合格品、即不掺有还原奶，测试值≥10为不合格品、即掺有还原奶；当待检牛奶样品为巴氏杀菌奶时，测试值＜11.5为合格品、即不掺有还原奶，测试值≥11.5为不合格品、即掺有还原奶。实施例3、一种，依次进行以下步骤1)、取1ml待检牛奶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鲜牛奶中是否掺有还原奶的快速检验方法，其特征是依次包括以下步骤：１）、取待检牛奶样品于离心容器中；再向所述离心容器中加入ｐＨ４．６、０．１ｍｏｌ／Ｌ的醋酸和醋酸钠缓冲液，混合均匀后，静置４～６分钟，然后在１０～２０℃的温度下以３ ５００ｇ～４５００ｇ离心８～１２分钟，得上清液；所述醋酸和醋酸钠缓冲液与待检牛奶样品的体积比为５～７∶１；２）、将上述上清液用０．４～０．５μｍ的水性滤膜过滤，得过滤液；３）、将上述过滤液与水按照１∶４０～６０的体积比混合制 成待测液；４）、取用上述待测液，以１ｍｇ／Ｌ的牛血清白蛋白为外标，在荧光分光光度计上测量；调整荧光分光光度计的激发波长为３３０ｎｍ、发射波长为４２０ｎｍ时，记录美拉德反应产物的荧光值；调整荧光分光光度计的激发波长为２９０ｎｍ、发射波 长为３４０ｎｍ时，记录色氨酸的荧光值；５）用上述美拉德反应产物的荧光值除以色氨酸的荧光值后再乘以１００，得测试值；当待检牛奶样品为原奶时，测试值＜１０为合格品、即不掺有还原奶，测试值≥１０为不合格品、即掺有还原奶；当待检牛奶样品为巴 氏杀菌奶时，测试值＜１１．５为合格品、即不掺有还原奶，测试值≥１１．５为不合格品、即掺有还原奶。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：关荣发，叶兴乾，刘东红，童军锋，陈健初，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]