白细胞三烯Ａ4水解酶放射免疫测定药盒及制备工艺制造技术

发明专利技术的目的是建立白细胞三烯Ａ４水解酶（ＬＴＡ－［４］Ｈ）的放射免疫测定药盒的制备方法和提供灵敏、可靠的药盒。制备工艺是（１）由人全血中提取白细胞；（２）由白细胞中提取ＬＴＡ－［４］Ｈ，（３）ＬＴＡ－［４］Ｈ抗血清的制备，（４）ＬＴＡ－［４］Ｈ的＿＋［１２５］Ｉ标记，（５）＿＋［１２５］Ｉ—ＬＴＡ－［４］Ｈ的纯化，纯化后分装。（*该技术在2007年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术属生物化学领域。白细胞三烯A4在白细胞三烯A4水解酶(LTA4H)作用下，产生白细胞三烯B4。白细胞三烯B4是一种重要的生物活性物质，是炎症反应和过敏反应中白细胞运动的最有效的激活剂。因而，微量测定白细胞三烯B4体内合成的维一通路-LTA4H，这对于研究人体免疫功能有重要意义。以往测定LTA4H，使用LTA4H活性检测法。由于活性检测灵敏性较低，效果不够理想，放射免疫测定方法的优点是灵敏性高，特异性强，是测定LTA4H的理想方法。目前，国内外尚无LTA4H放射免疫测定药盒及其制备方法，本专利技术的目的是建立LTA4H的放射免疫测定药盒的制备方法，提供特异性强，灵敏，可靠的药盒。本专利技术的技术构思是首先由人全血中提取白细胞，再由白细胞提纯LTA4H;制备抗LTA4H抗血清;用125I标记LTA4H;进行125I-LTA4H的纯化，最后建立放射免疫测定方法，制成可供科研使用的药盒。实施方案一、由人全血中提取白细胞首先将已加入抗凝剂的全血离心，取白细胞粗提液，置于量筒内，加一倍体积的白细胞悬浮液，混合后，自然沉淀10-20分钟，将上清液吸出，离心。取沉渣，为多核白细胞。为保证白细本文档来自技高网...

【技术保护点】
白细胞三烯Ａ↓〔４〕水解酶放射免疫测定药盒的制备工艺，其特征在于：（１）由人全血中提取白细胞。（２）由白细胞中提纯白细胞三烯Ａ↓〔４〕水解酶（ＬＴＡ↓〔４〕Ｈ）。（３）制备抗ＬＴＡ↓〔４〕抗血清。（４）↑〔１２５〕Ⅰ标记ＬＴ Ａ↓〔４〕Ｈ。（５）纯化↑〔１２５〕Ⅰ－ＬＴＡ↓〔４〕Ｈ。（６）建立放射免疫测定方法。

【技术特征摘要】
1.白细胞三烯A4水解酶放射免疫测定药盒的制备工艺，其特征在于(1)由人全血中提取白细胞。(2)由白细胞中提纯白细胞三烯A4水解酶(LTA4H)。(3)制备抗LTA4H抗血清。(4)125I标记LTA4H。(5)纯化125I-LTA4H。(6)建立放射免疫测定方法。2.如权利要求1所述的工艺，其特征在于制取白细胞粗提液后，用白细胞悬浮液和红细胞溶解液提纯白细胞;3.如权利要求1所述的工艺，其特征在于由白细胞中提纯LTA4H时，用硫酸铵分段盐析，DEAE纤维素离子交换层析，凝胶过滤层析，高压液相离子交换层析，高压液相羟基磷灰石柱层析，分离蛋白质，提纯L...

【专利技术属性】
技术研发人员：富继义，欧罗夫洛德马克，
申请(专利权)人：白求恩医科大学，
类型：发明
国别省市：22[中国|吉林]