【技术实现步骤摘要】
本专利技术属分子生物学领域，涉及一种蛋白芯片及其制备方法，并用其来大规模快速地筛选单克隆抗体的灵敏的方法。单克隆抗体技术专利技术于1975年，其制备过程基本如下①用抗原免疫小鼠，②取小鼠的脾淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，③杂交瘤细胞克隆化，④筛选特异的单克隆抗体。克隆化方法有①有限稀释法，②软琼脂培养法，③单细胞显微操作法，④单克隆细胞集团显微操作法，⑤萤光激活细胞分类仪(流式细胞仪)分离法。经典的筛选特异性单克隆抗体的方法有①免疫酶技术、②免疫荧光技术、③放射免疫测定、④化学发光免疫分析、⑤间接凝血试验。其中免疫酶技术用得最多，现以免疫酶技术的一种技术——间接酶联免疫分析(ELISA)来说明筛选过程。用抗原包被载体，加入待测的单克隆化杂交瘤细胞的培养上清液，若上清液中有对应的单克隆抗体，则与包被的抗原结合；洗涤后再加入酶标记的第二抗体，形成固定化的抗原-抗体-酶标记的第二抗体复合物；依据底物显色反应的强度，可对待测的单克隆抗体样品进行定性或定量分析。经典的筛选特异性单克隆抗体的方法最大的缺点是得到的数个克隆中只能筛选出一种抗原的单克隆抗体、浪费大、效率低。应用...
【技术保护点】
一种蛋白芯片，它是将大量特定的抗原或抗体，有序地固化在载体上，载体可以为硝酸纤维素膜、尼龙膜或玻片，利用抗原抗体的亲和反应检测对应的抗体或抗原的阵列，其特征是利用这种蛋白芯片可以大规模筛选单克隆抗体，是一种快速灵敏的筛选方法，具体分为五个步骤：①用组织匀浆免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠；②取ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞融合；③用流式细胞仪分离单个杂交瘤细胞，扩增培养；④制备蛋白芯片，用来鉴定产生的抗体，同时建立杂交瘤细胞库；⑤制备筛选用蛋白芯片，用特异性抗原 和多克隆抗体筛选对应的单克隆抗体；这样的筛选流程。
【技术特征摘要】
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