外周血中肝细胞的检测方法技术

一种外周血中肝细胞的检测方法，是临床诊断肝癌的一个辅助手段。该方法步骤：首先是外周血取样，提取ＲＮＡ及反转录成ｃＤＮＡ，然后进行巢式ＰＣＲ扩增，再对ＰＣＲ产物进行电泳分析，从而检出外周血中ＡＬＦ ｍＲＮＡ及ＡＦＰ ｍＲＮＡ的表达，以区别良性肝细胞与恶性肝细胞。该方法简便，在肝癌检测中造成的假阳性率仅为１０％。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及到有关临床肝癌诊断中采用的检测方法，尤其是关于外周血中肝细胞的检测新方法。肝癌是遍及全球的死亡率高的癌症之一。尽管目前对肝癌相关的一些病理学因素有了较好的认识，但引起肝癌的分子机理仍不清楚。肝胆切除术仅是肝癌形成期的有效治疗，而不适合于肝外转移的肝癌患者。外周恶性细胞的检测对证明癌微小的转移、设计治疗策略、估价治疗效果和预见外科手术后复发的可能性很有帮助(AkriviadisEA.et al.，Br J Surg 1998；1319-1331)。α-白蛋白(ALF)与肝癌的一种广泛应用的诊断指标α-甲胎蛋白(AFP)具有高度同源性，但它与肝癌的关系仍没有报道。白蛋白基因家族由四个基因编码的白蛋白、ALF、AFP和维生素D粘合蛋白组成，它们连续排列在4号染色体短臂亚着丝粒位点(Lichenstein HS.et al.，J Biol Chem1994；26918149-18154.；Nishio H.Et al.，J Mol Biol 1996；259113-119)。在这些蛋白基因中，AFP选择性地在胎儿的肝中表达，而ALF和维生素D粘合蛋白的表达限制于新生儿和成本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种外周血中肝细胞的检测方法，其特征在于该方法包括以下步骤：（１）外周血取样，ＲＮＡ提取及反转录成ｃＤＮＡ；（２）外周血肝细胞ＡＬＦ ｃＤＮＡ和ＡＦＰ ｃＤＮＡ的巢式ＰＣＲ扩增；（３）ＰＣＲ产物分别进行电泳分析，外周血中ＡＬＦ ｍＲＮＡ及ＡＦＰ ｍＲＮＡ两者阴性，结果作为良性肝细胞的指标；ＡＦＰ ｍＲＮＡ阳性结果，而ＡＬＦ ｍＲＮＡ阴性结果则作为恶性肝细胞的指标。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：裴钢，吴国祥，周天华，林义明，高华，
申请(专利权)人：中国科学院上海细胞生物学研究所，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]