用于保护生物学活性分子和缀合标记物的非糖类有机化合物及其方法技术

本发明专利技术提供了如下方法，其包括使用非糖类有机相容溶质保护和保持生物学活性分子和缀合标记物活性。所述方法特别适用于与免疫测试相关的方面，例如免疫层析测试试验，并且可以结合入任何测试方法中，其中在所述测试方法中使用干燥的测试带作为沉积可迁移和／或固定化的生物学活性分子和／或缀合标记物的载体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于保护生物学活性分子和缀合标记物的 非糖类有机化合物及其方法相关申请本申请要求了 2005年6月27日登记的美国临时专利申请 60/694,604的优先权，因此全文引入该申请作为参考。专利
本申请涉及试验。专利技术背景多种与蛋白关联使用的緩冲剂和稳定剂都是可以商购获得的。这些 溶剂和緩沖剂可以用在多种方法和测试中，其中包括免疫测试。在千燥 的免疫层析测试试验条件下，许多可以使用的緩沖剂和稳定剂在保护和 保持生物学活性分子和缀合标记物的活性方面都会失效。 一些免疫层析 测试试验材料的保存期限非常短，并且由于在干燥条件下的存储期间分 子活性的退化，其经常在短时期内就会丧失效力或者变得完全失效。虽 然已经出现了生产更有效且更持久的免疫层析测试试验材料的趋势，但 是仍然期望能进一步改善活性分子和缀合标记物活性的效力和持续性。专利技术简述本专利技术提供了使用非糖类有机相容溶质保护和保持生物学活性分 子和缀合标记物活性方法。我们已经发现当与 一种或多种非糖类有机相 容溶质一起沉积时，沉积在免疫层析测试(ICT)试验干燥载体上的生 物学活性分子的活性可以保持、保护和持续保持更长的时间。非糖类有 ;fe/L相容溶质可以用在与免疫测试例如ICT测试相关的地方，还可以用在 需要例如在溶液相、在干燥状态或者在重组状态中保护和保持生物学活 性分子和缀合标记物活性的任何应用中。非糖类有机相容溶质可以与任 何测试方法相结合，在所述测试方法中使用干燥的测试带作为沉积可迁 移和/或固定化的生物学活性分子和/或缀合标记物的载体。附图说明图1表明2%w/v的ecotine、 L-组氨酸、牛石黄酸和L-苏氨酸组合物 对用于疾疾ICT装置的不含蔗糖的结合衬垫干燥緩冲剂具有稳定作用。 虽然在干燥衬垫緩冲剂配方中不含蔗糖，但对于在4CTC和55。C两种温 度下储存的结合衬垫观测到相同的灵敏性。图2图解了 4%w/v的单独的L-组氨酸没有使用于痴疾ICT装置的 不含蔗糖的结合衬垫干燥緩冲剂具有稳定性。专利技术详述1、介绍当与 一种或多种非糖类有机相容溶质一起沉积时，特别是当沉积到 免疫层析测试试验的干燥载体上时，生物学活性分子的活性通常可以保 持、保护和持续保持更长的时间。在一方面，提供了一种方法，其包括a) 将一种或多种生物学活性分子沉积到 一个表面上；b) 将一种或多种非糖类有机相容溶质沉积到该表面上；和c ) 干燥所述表面上沉积的 一 种或多种生物学活性分子和沉积的 一种或多种非糖类有机相容溶质；其中所述一种或多种非糖类有机相容 溶质在干燥和重组状态下保护和保持了所述一种或多种生物学活性分 子的活性。在另一方面，提供了一种方法，其包括a) 提供一个样品；b) 提供至少一部分包含一种或多种生物学活性分子和一种或多种非糖类有机相容溶质的测试带，其中所述一种或多种非糖类有机相容 溶质在干燥和重组状态下保护和保持了所述一种或多种生物学活性分子的活性；c) 将样品与测试带接触；和d) 检观'J样品中所关心分析物的存在或者测定其量。 在另一方面，提供了一种方法，其包括a) 提供一种或多种生物学活性分子；和b) 提供一种或多种非糖类有机相容溶质；其中所述一种或多种非 糖类有机相容溶质保持了所述一种或多种生物学活性分子的活性。本专利技术进一步的目的和优点将随着说明的进行而得以显现。为了获 得对本专利技术范围的完整的理解，应当进一步地认识到，可以将本专利技术的 多个方面结合以产生合意的专利技术实施方式。除非另有定义，本文所使用的所有技术和科学术语的含义都与本专利技术所属领域普通技术人员通常理解的含义相同。当术语以单数提供时，专利技术人同时也考虑到了该术语的复数。本文所使用的命名法和如下所述 的操作步骤是本领域公知且常用的。术语"氨基酸"意图包括所有分子，无论是天然的还是合成的，所 述分子同时包括氨基官能团和酸官能团二者并且能够被包括到天然存在的氨基酸的聚合物中。示例性的氨基酸包括天然存在的氨基酸；其类 似物、衍生物和同系物；具有派生侧链的氨基酸类似物；以及所有上述 物质中的任意一种的全部立体异构体。在本文中依照IUPAC-IUB的建议 对天然氨基酸的名称进行了缩写。术语"抗体"是指免疫球蛋白，其保持有特异性结合能力的衍生物， 以及具有与免疫球蛋白结合功能区 一致或大体一致的结合功能区的蛋 白。这些蛋白可以由天然来源获得，或者可以部分或完全地通过合成来 制备。抗体可以是单克隆或多克隆的。抗体可以是任意免疫球蛋白类别 中的成员，包括任意的人类类别IgG、 IgM、 IgA、 IgD和IgE。在示例 性的实施方式中，与本文所描述的方法和组合物一起使用的抗体是IgG 类的衍生物。术语"抗体片段"是指抗体的任何小于全长的衍生物。在示例性的要部分。抗体片段的例子包括，但不限于，Fab、 Fab'、 F(ab')2、 scFv、 Fv、 dsFv双功能抗体和Fd片段。抗体片段可以通过任何方式产生。例 如，抗体片段可以通过完整抗体的裂解作用由酶或化学方法产生，其还 可以由基因编码部分抗体序列而重组产生，或者其可以完全或部分地通 过合成产生。抗体片段可以任选地为单链抗体片段。或者，所述片段可 以包含连接在一起的多个链，例如通过二硫化物连接基连接的。所述片 段也可以任选地为多分子复合物。功能性抗体片段一般包含至少约50 个氨基酸，更一般地包含至少约200个氨基酸。术语"生物学活性分子"是指为活性有机体的一部分的任何活性有 机分子，其可以是天然的、合成的或者是它们的组合。术语"包含"和"含有"是以包括、开放的含义使用的，其意思是 指可能包括其它元素。本文所使用的术语"包括"意思是指"包括但不限于"。"包括"和 "包括但不限于"可以互换使用。术语"标记"或"标记的"是指将可检测的标示物任选共价或非共 价地结合或附着到分子中，所述分子例如是多肽，如抗体。标记多肽的 各种方法是本领域所公知的，并且是可以使用的。用于多肽的标记的例子包括，但不限于，以下物质放射性同位素、荧光标记、重原子、酶 标记或指示基因、化学发光基团、生物素基团、通过二级指针辨认的预 先确定的多肽表位(例如，亮氨酸拉链对序列、二级抗体的结合位点、 金属结合功能区、抗原表位标签)。在一些实施方式中，标记物附着有 各种长度的隔离臂以减少潜在的位阻。术语"非糖类有机相容溶质"是指非糖并且能溶解于有机溶液中的 任何分子。术语"测试带"是指可以在其之上进行试验的色语样介质。术语"样品"是指可能含有分析物的任何液体样品。 2、在干燥和重组状态下保持生物学活性分子活性的方法本专利技术提供了非糖类有机相容溶质在保护和保持生物学活性分子 和缀合标记物的活性方面的用途。下述方法适用于具有多孔载体的免疫 层析测试带，例如硝化纤维测试带，所述测试带是本领域公知的。本专利技术提供了一种在干燥和重组状态下保持生物学活性分子活性 的方法，其包括将一种或多种生物学活性分子沉积在一个表面上。可以 使用任何合适的方法来将所述的一种或多种生物学活性分子沉积在所 述表面上。所述的一种或多种生物学活性分子可以是任何合适的生物学 活性分子，例如，能够特异性结合一种或多种所关心的分析物的生物学 活性分子。本专利技术的合适的分子包括，例如，多克隆或单克隆的抗体或 抗体片段。所述表面可以是适于进行免本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种方法，其包括：　　　　ａ）将一种或多种生物学活性分子沉积到一个表面上；　　　　ｂ）将一种或多种非糖类有机相容溶质沉积到所述表面上；和　　　　ｃ）干燥所述表面上沉积的一种或多种生物学活性分子和沉积的一种或多种非糖类有机相容溶质，其中所述一种或多种非糖类有机相容溶质在干燥和重组状态下保持了所述一种或多种生物学活性分子的活性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：AH戴维斯，RN皮亚西奥，WJ帕林，ER皮亚西奥，BC雷恩曼，
申请(专利权)人：比纳克斯公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]