一种青蒿转基因育种方法技术

本发明专利技术提供了一种青蒿转基因育种方法，是以未成熟青蒿花序为外植体，用携带有外源基因的农杆菌菌液侵染外植体，经过2-3天的共培养，将外植体放置在加有选择压的培养基上诱导产生愈伤组织，进一步诱导成再生植株，再通过对报告基因的分子生物学检测，从再生植株中鉴定出转化植株。本发明专利技术用青蒿的未成熟花序作为外植体,与农杆菌EHA105菌株共培养具有更高的转化率，最高转化率为17.2％，比目前青蒿转基因中常用的叶片外植体转化率高8.59％。本发明专利技术不仅为青蒿遗传转化提供了一个新的转化系统，而且也为其他难以进行农杆菌转化的植物种提供了借鉴。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因育种，具体属于。
技术介绍
疟疾是一种严重危害生命疾病，每年全世界大约有一百万人死于疟疾，并每年大 约有 350-500 万新增病例（Grahametal. 2010;Grahametal. 2010;MilhousandWeina 2010)〇 长期以来，青蒿就是一种用来治疗疟疾的特效药用植物。青蒿素是一种倍半萜 烯内酯内过氧化物，是目前公认最有效的抗耐多药恶性疟原虫的化合物（Weina2008;Li etal.2006)。青蒿素还具有治疗某些癌症和其他病毒性疾病和寄生虫病的能力（Efferth 2007;Efferthetal.2008;Weathersetal.2011) ?然而，由于青蒿植物中低青蒿素含量 (占干重0.01%-0.8%)。以青蒿素为基础药物的应用受到了限制，特别是在发展中国 家（Nairetal. 1986;Klayman1985)。同时，青蒿素由于结构非常复杂，一直未能实现全 化学合成。虽然部分化学合成青蒿素已经实现，但是它成本较高，无法推广应用（Haynes， 2006年）。目前，青蒿素的大量生产仍是基于提高栽培青蒿中青蒿素本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种青蒿转基因育种方法，其特征在于，包括如下步骤：1)取田间生长的青蒿未成熟花序作为外植体，用50％次氯酸钠溶液消毒，用无菌蒸馏水冲洗5次，并切成1‑2cm的切段，然后置于携带有质粒pCaMBIA2301的农杆菌菌液中浸泡5‑30分钟,取出后用无菌滤纸去除多余的菌液，将其转移至共培养基上，培养2‑3天；然后将外植体转入添加了选择压的诱导培养基中培养，直到诱导出愈伤组织和芽苗，在诱导培养阶段，每隔4周继代培养一次；2)将生长至2‑3个叶片的绿色芽苗转移到生根培养基中培养，诱导芽苗生根，即成再生植株；所述的共培养基为：以MS为基本培养基，添加0.5mg/L 6‑苄基腺嘌呤，0.3mg/L萘乙酸，3...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王景雪，
申请(专利权)人：山西大学，
类型：发明
国别省市：山西;14