一种转精氨酸酶基因玉米育种方法技术

本发明专利技术公开了一种转精氨酸酶基因玉米育种方法，由玉米中克隆ZmArg基因，采用农杆菌介导法转化玉米极早熟自交系，创造高产玉米新种质。采用本发明专利技术的方法能高效的将外源ZmArg基因已转入玉米自交系中，并且成功表达，在玉米生长的各个时期的精氨酸酶水平都有所提高，穗粗、粒长、粒宽等产量性状也有相应的增加。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于农业育种领域，具体是涉及。
技术介绍
玉米(Zea maysL.)是世界上重要的粮食、饲料作物，也是现代工业的重要原料。随着工农业的发展及世界人口的增长，对玉米的需求量逐年攀升。据相关研究推测，到2020年世界玉米需求量将达到7. 53亿t，届时中国玉米需求量为2. 14亿t，将使玉米生产面临巨大挑战。但传统的育种方法面临着推广品种单一化，育种材料遗传基础越来越狭窄，基因库日益贫乏等问题，加之常规育种周期长，预见性差，很难使作物在产量、质量和抗性方面有大的提闻。近年来，随着生物技术的迅速发展和不断完善，采用基因工程手段进行作物遗传育种和新种质的创造已成为可能，运用转基因技术提高作物产量的报道屡见不鲜。Dinkins等(2003)利用基因枪技术将15kDaS-玉米醇溶蛋白基因转入大豆中，对转基因后代进行氨基酸组分分析，发现甲硫氨酸提高了 12%_20%，半胱氨酸提高了 15%-35%，而其他的氨基酸组分没有发生明显的变化。丁明忠等(2000)利用花粉管通道法和减压渗透法将大豆总DNA导入玉米，筛选到8个高蛋白材料，玉米种子中蛋白质含量比对照提高20%。Zheng等(19本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种转精氨酸酶基因玉米育种方法，其包括如下步骤：（1）以pCAMBIA5300?ubi?Tnos为基础载体，去除原来载体的HPT基因，换上了来自NK603中35S驱动的CP4EPSPS基因，将精氨酸酶基因ZmArg、异戊烯基转移酶基因ZmIPT2和细胞壁转化酶基因ZmMn1插入多克隆位点SmaⅠ之后，构建单子叶植物超量表达载体；（2）单子叶植物超量表达载体经三亲杂交法将目的基因转移至农杆菌，挑取单菌落，进行PCR鉴定得到目标农杆菌；（3）试验材料的准备:自交系玉米种子分别在60?80%酒精浸泡40s?50，0.05?0.15%升汞消毒8?12min，无菌水冲洗，然后将种子浸泡在无菌水中，置于3...

【技术特征摘要】
1.一种转精氨酸酶基因玉米育种方法，其包括如下步骤 (1)以pCAMBIA5300-ub1-Tnos为基础载体，去除原来载体的HPT基因，换上了来自NK603中35S驱动的CP4EPSPS基因，将精氨酸酶基因ZmArg、异戊烯基转移酶基因ZmIPT2和细胞壁转化酶基因ZmMnl插入多克隆位点Sma I之后，构建单子叶植物超量表达载体； (2)单子叶植物超量表达载体经三亲杂交法将目的基因转移至农杆菌，挑取单菌落，进行PCR鉴定得到目标农杆菌； (3)试验材料的准备自交系玉米种子分别在60-80%酒精浸泡40s-50，O.05-0. 15%升萊消毒8-12min,无菌水冲洗,然后将种子浸泡在无菌水中，置于37°C水浴中4 5h ; (4)农杆菌侵染萌动胚在超净台里用解剖刀在玉米萌动胚的生长点处划开I 3mm的口子，放入制备好的农杆菌工程菌液中浸染芽尖，26-30°C，200-240r/min振荡20_28h，然后把种子放在MS固体培养基上共培养2-4d ； (5)移栽用清水洗掉菌体，转入2-6mg/LPPT的选择培养基中培养7_10天，除去矮化、生长缓慢的植株，选择正常的移栽到装有灭菌蛭石的营养钵中； (6)在转化苗长到3-4叶期...

【专利技术属性】
技术研发人员：王振华，邸宏，曾兴，张林，刘显君，翁建峰，张佩，
申请(专利权)人：曾兴，
类型：发明
国别省市：