植物根部特异表达Bt-cry6A晶体蛋白在根结线虫防治中的应用制造技术

本发明专利技术“植物根部特异表达Bt-cry6A晶体蛋白在根结线虫防治中的应用”涉及植物转基因技术，本发明专利技术提供用于在植物的根中特异表达Bt-cry6A基因的重组表达载体pBP-bt06，以及将该表达载体转化番茄的转基因方法。本发明专利技术合成的基因是对密码子进行优化的。将优化后的编码Bt-Cry6A晶体蛋白的人工基因转入番茄品种。实验结果表明，本发明专利技术成功获得了在根部特异表达Bt-cry6A基因的转基因番茄。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物病虫防治
，特别是涉及一种由根部特异启动子DNA-^ promoter驱动的Bt_cry6A基因植物表达载体及其在根结线虫防治和研究中的应用。
技术介绍
根结线虫是农业生产上危害最为严重的植物寄生线虫之一，其适应性强、传播途径多样、寄主范围包括单子叶与双子叶草本或木本植物等2000多种植物。近年来，随着对线虫侵染方式，植物自身抗病防御体系研究的不断深入，以及分子生物学理论和生物工程技术的不断发展，抗线虫基因的分子遗传操作技术已趋向成熟，为利用植物自身防御体系及线虫自身生理生化特点，通过基因工程手段，建立一个具有高效、经济、环保的线虫综合控防策略成为可能(Atkinson HJ, Urwin PE, McPherson MJ. Engineering plantsfor nematode resistance. Annual Review of Phytopathology,2003. 41 (I):615-639.；Williamson VMj Hussey RS. Nematode pathogenesis and resistance in plants本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于在植物根部特异表达Bt?cry6A基因的重组表达载体pBP?bt06，骨架载体为pBI121，启动子为DNAβpromotor，外源基因为序列为SEQ?ID?No.4所示的优化Bt?cry6A基因。

【技术特征摘要】
2011.11.18 CN 201110369811.51.用于在植物根部特异表达Bt-cry6A基因的重组表达载体pBP_bt06，骨架载体为pBI121,启动子为DNA β promotor,外源基因为序列为SEQ ID No. 4所示的优化Bt_cry6A基因。2.转入有权利要求1所述重组表达载体的菌株。3.根据权利要求1所述的菌株，指转入有pBP-bt06的根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens) EHA 105。4.一种研究苏云芽孢杆菌基因功能的新方法，其特征在于，将权利要求1所述的重组表达载体转化到根癌农杆菌中，然后转化植物，通过观察转基因植株，确定此基因对根结线虫的防治效果。5.一种获得抗根结线虫的转基因植物的方法，包括如下步骤 (I)构建含有苏云金芽孢杆菌的Bt-cry6A基因的根部特异性重组表达载体， (2 )将重组表达载体转入到宿主植物中，筛选能够表达Bt-cry6A蛋白的阳性转化子， 所述重组载体是pBP-bt06。6.根据权利要求5所述的方法，所述将重组表达载体转入到番茄中，筛选能够表达Bt-06蛋白的阳性转化子，包括如下步骤 (1)准...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈国华，梅眉，王殿东，田雪亮，茆振川，杨宇红，谢丙炎，
申请(专利权)人：中国农业科学院蔬菜花卉研究所，
类型：发明
国别省市：