肠道病毒EV71核酸荧光定量RT-PCR检测试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术提供了一种应用于手足口病感染实验室应急检测的肠道病毒ＥＶ７１荧光ＲＴ－ＰＣＲ检测试剂盒及检测方法。所述荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ检测试剂盒的引物和探针序列如下：ＥＶ　７１　ＹＧ　Ｆ１：５’－ＴＧＡＴＴＧＡＧＡＣＡＣＧＣ／ＧＴＧＴＧＴＴ／ＣＣＴＴＡ－３’；ＥＶ７１　ＹＧ　Ｒ１：５’－ＣＣＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＡＡＧＡＡＡＣＴ－３’；ＥＶ７１ＹＧ　ｐｂ　１：５’－ＴＣＧＣＡＣＡＧＣＡＣＡＧＣＴＧＡＧＡＣＣＡＣＴＣ－３’。本发明专利技术方法对肠道病毒ＥＶ７１的检测有高度的特异性，与其他肠道病毒ＣＡ１６、ＣＡ４、ＣＡ２１、Ｅ６、Ｅ３０、ＣｏｘＢ５、ＰＯＬＩＯ等病毒无交叉反应；本发明专利技术方法检测的灵敏度达０．１ＴＣＩＤ↓［５０］，可直接从疑似手足口病患者的脑脊液、疱疹液和粪便等标本中检测肠道病毒ＥＶ７１核酸，从病毒核酸提取至完成检测仅需３ｈ左右。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种肠道病毒EV71核酸荧光定量RT-PCR检测试剂盒及 检测方法，可应用于手足口病等暴发疫情的实验室应急检测。(二)
技术介绍
手足口病(Hand foot mouth disease HFMD )是婴幼儿常见的传染病， 由肠道病毒引起，临床上以发热和手、足、口腔等部位出现皮渗、溃疡等 表现为主，个别患者可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等致命性并 发症。手足口病是全球性传染病，世界大部分地区均有此病流行的报导。 今年3月上旬，安徽阜阳几家医院陆续收治了以发热伴口腔、手足臀部皮 渗为主的疾病患儿，经实-睑室4企测，确定该病为肠道病毒EV71感染。目 前，广东、浙江、山东、北京、上海等地均发现疫情。截止5月9日止，全 国感染手足口病近2.5万例，造成34名患儿死亡。中国手足口病的爆发流 行引起了全球的关注，卫生部已将手足口病纳入国家丙类法定报告传染 病，通过网络直报系统对疫情进行监测。由于HFMD是由多种人肠道病毒感染引起，其中以EV71及CoxA16 型最为常见，为了对该病迅速查明病因，及时采取控制措施，急需进行实 验室快速诊断，但肠道病毒传统的检测方法是病毒分本文档来自技高网...

【技术保护点】
肠道病毒ＥＶ７１核酸荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ检测试剂盒，其特征在于所述荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ检测试剂盒的引物和探针序列如下：　ＥＶ７１　ＹＧＦ１：５’－ＴＧＡ　ＴＴＧＡＧＡＣＡＣＧＣ／ＧＴＧＴＧＴＴ／ＣＣＴＴＡ－３’；　ＥＶ７１　ＹＧＲ１：５’－ＣＣＣ　ＧＣＴＣＴＧＣＴＧＡＡＧＡＡＡＣＴ－３’；　ＥＶ７１　ＹＧｐｂ１：５’－ＴＣＧＣＡＣＡＧＣＡＣＡＧＣＴＧＡＧＡＣＣＡＣＴＣ－３’。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：卢亦愚，严菊英，徐昌平，冯燕，陈寅，
申请(专利权)人：浙江省疾病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]