嵌合多肽及其用途制造技术

本发明专利技术提供了新的肽(例如接头)和包含所述接头的多肽组合物(例如融合蛋白)以及使用该多肽组合物的方法。肽(例如接头)作为标签和用于工程化改造融合蛋白(例如抗原结合分子，scFv)是有用的。本文描述的多肽接头有助于连接的肽的柔性，其允许正确折叠、构象和降低的免疫原性。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】嵌合多肽及其用途对相关申请的交叉引用本申请要求2017年9月22日提交的美国临时申请号62/562,223的优先权，该申请通过引用以其整体并入本文。序列表本申请含有序列表，其已经以ASCII格式电子提交，并且在此通过引用以其整体并入。2018年9月20日创建的所述ASCII拷贝命名为KPI-005WO_ST25.txt，并且大小为9,531字节。
本公开涉及新的肽和包含此类肽的多肽组合物(例如接头、嵌合多肽、抗原结合分子)以及使用和制备它们的方法。
技术介绍
抗原结合分子，包括抗体，被用于免疫疗法和基于固相的应用中，例如生物传感器，亲和色谱法和免疫测定法。这些抗体和抗原结合分子凭借其特异性结合其靶标的能力而获得其效用。融合蛋白可以需要接头序列，当用于生物技术和生物治疗应用时其通常基于肽，该接头序列可以用于一系列与科学相关的应用。例如，可以将接头用作间隔物部分，以赋予较大的分子以期望的结构和/或功能特性。在另一个例子中，接头可以几乎不赋予或不赋予较大的分子以结构或功能特性，但是可以简单地用作区别特征(例如，“标记”或“生物标记”或“标签”)，唯一地识别较大的分子。在又一个例子中，接头可以用于赋予可识别的特征，其可以用作抗体针对包含肽序列的较大分子的结合位点。专利技术概述本专利技术尤其提供了新的肽序列，其允许融合蛋白的正确表达、折叠、鉴定和活性。本文所述的新肽可用于连接融合蛋白(例如scFv)内的结构域，促进各个肽结构域的柔性。scFv构成大多数CAR构建体的结合结构域。scFv包含IgG可变轻链和重链以及连接这两个结构域的柔性肽(例如接头)。接头必须足够长以将结构域连接成单个蛋白质构建体。此外，期望接头或标签构建体不是免疫原性的潜在原因。由于它们固有的柔性和侧链的简单性，通常使用的接头包括甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-丝氨酸(G4S)(SEQIDNO：32)的重复序列，其在治疗应用中的免疫原性可能较低。Whitlow等人在1993年首先描述了18残基的Whitlow接头GSTSGSGKPGSGEGSTKG(SEQIDNO：1)。本文所述的肽也可以用作肽标签。在一些实施方案中，融合蛋白包含与本文所述的肽(例如接头)融合的多肽。本文所述的包含共有序列BPXXXZ的新的嵌合多肽组合了期望的属性(例如柔性和降低的免疫原性)，其适于整合到可用于治疗干预的融合蛋白中。在一方面，本专利技术提供了包含6-20个氨基酸和共有序列BPXXXZ的肽，其中X是甘氨酸(G)或丝氨酸(S)，B是带正电荷的氨基酸且Z是甘氨酸(G)或带负电荷的氨基酸。在一个实施方案中，本专利技术提供肽，其中共有序列是KPGSGE(SEQIDNO:4)。在另一个实施方案中，共有序列是GKPGSGE(SEQIDNO:5)或GKPGSGG(SEQIDNO:6)。在一方面，本专利技术提供了包含6-20个氨基酸和共有序列BPXXXZ的肽，其中X是甘氨酸(G)或丝氨酸(S)，B是带正电荷的氨基酸且Z是甘氨酸(G)或带负电荷的氨基酸，且其中所述肽不是GSTSGSGKPGSGEGSTKG(SEQIDNO:1),GSGKPGSGEG(SEQIDNO:13),GKPGSGEG(SEQIDNO:14),或SGKPGSGE(SEQIDNO:15)。在一方面，本专利技术提供了包含8-20个氨基酸和共有序列XBPXXXZX的肽，其中每个X独立地是甘氨酸(G)或丝氨酸(S)，B是带正电荷的氨基酸且Z是甘氨酸(G)或带负电荷的氨基酸，和P是脯氨酸。在一方面，本专利技术提供了包含8-20个氨基酸和共有序列XBPXXXZX的肽，其中每个X独立地是甘氨酸(G)或丝氨酸(S)，B是带正电荷的氨基酸且Z是甘氨酸(G)或带负电荷的氨基酸，和P是脯氨酸，且其中所述肽不是GSTSGSGKPGSGEGSTKG(SEQIDNO:1),GSGKPGSGEG(SEQIDNO:13),GKPGSGEG(SEQIDNO:14),或SGKPGSGE(SEQIDNO:15)在一些实施方案中，本专利技术提供了包含8-20个氨基酸和共有序列XBPXXXZX的肽，其中每个X独立地是甘氨酸(G)或丝氨酸(S)，B是赖氨酸(K)或精氨酸(R)且Z是甘氨酸(G)或带负电荷的氨基酸，和P是脯氨酸。在一些实施方案中，本专利技术提供了包含8-20个氨基酸和共有序列XBPXXXZX的肽，其中每个X独立地是甘氨酸(G)或丝氨酸(S)，B是赖氨酸(K)且Z是甘氨酸(G)或带负电荷的氨基酸，和P是脯氨酸。在一些实施方案中，本专利技术提供了了包含8-20个氨基酸和共有序列XBPXXXZX的肽，其中每个X独立地是甘氨酸(G)或丝氨酸(S)，B是带正电荷的氨基酸且Z是甘氨酸(G)，和P是脯氨酸。在一些实施方案中，Z是选自谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)的带负电荷的氨基酸。在一些实施方案中，Z是谷氨酸(E)。在一些实施方案中，本专利技术提供了肽，其中共有序列是GKPGSGE(SEQIDNO:5)或GKPGSGG(SEQIDNO:6)。在一些实施方案中，共有序列是GKPGSGE(SEQIDNO:5)。在一些实施方案中，肽包含共有序列GSGKPGSGEGG(SEQIDNO:31)。在一些实施方案中，肽包含共有序列的一个或多个重复。在一些实施方案中，重复是连续的。在一些实施方案中，肽重复被1-4个氨基酸分开。在一些实施方案中，肽是xxxGKPGSGExxxGKPGSGExxx(SEQIDNO:3)，其中X是甘氨酸(G)或丝氨酸(S)。在一些实施方案中，肽不是GSTSGSGKPGSGEGSTKG(SEQIDNO:1),GSGKPGSGEG(SEQIDNO:13),GKPGSGEG(SEQIDNO:14),或SGKPGSGE(SEQIDNO:15)。在某些实施方案中，肽不是GSTSGSGKPGSGEGSTKG(SEQIDNO:1)。在某些实施方案中，接头不是GSGKPGSGEG(SEQIDNO:13)。在某些实施方案中，肽不是GKPGSGEG(SEQIDNO:14)。在某些实施方案中，肽不是SGKPGSGE(SEQIDNO:15)。在一些实施方案中，肽包含6-20个氨基酸。在一些实施方案中，肽包含10-20个氨基酸。在一些实施方案中，肽包含14-19个氨基酸。在一些实施方案中，肽包含15-17个氨基酸。在一些实施方案中，肽包含15-16个氨基酸。在一些实施方案中，肽包含16个氨基酸。在一些实施方案中，肽包含GGGSGKPGSGEGGGS(SEQIDNO:7)的氨基酸序列。在一些实施方案中，肽包含GGGSGKPGSGEGGGGS(SEQIDNO:8)的氨基酸序列。在一些实施方案中，肽包含GGGGSGKPGSGGGGS(SEQIDNO:9)的氨基酸序列。在一些实施方案中，肽包含GGGGSGKPGSGEGGS(SEQIDNO:10)的氨基酸序列。在一些实施方案中，肽包含GGGGSGKPGSGEGGGS(SEQIDNO:11)的氨基酸序列。在一些实施方案中，肽包含GGGG本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.肽，其包含6-20个氨基酸和共有序列BPXXXZ，其中每个X独立地是甘氨酸(G)或丝氨酸(S)，B是带正电荷的氨基酸且Z是甘氨酸(G)或带负电荷的氨基酸，且其中所述肽不是GSTSGSGKPGSGEGSTKG(SEQ ID NO:1),GSGKPGSGEG(SEQ ID NO:13),GKPGSGEG(SEQ ID NO:14),或SGKPGSGE(SEQ ID NO:15)。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170922 US 62/562,2231.肽，其包含6-20个氨基酸和共有序列BPXXXZ，其中每个X独立地是甘氨酸(G)或丝氨酸(S)，B是带正电荷的氨基酸且Z是甘氨酸(G)或带负电荷的氨基酸，且其中所述肽不是GSTSGSGKPGSGEGSTKG(SEQIDNO:1),GSGKPGSGEG(SEQIDNO:13),GKPGSGEG(SEQIDNO:14),或SGKPGSGE(SEQIDNO:15)。


2.肽，其包含8-20个氨基酸和共有序列XBPXXXZX，其中每个X独立地是甘氨酸(G)或丝氨酸(S)，B是带正电荷的氨基酸且Z是甘氨酸(G)或带负电荷的氨基酸，且其中所述肽不是GSTSGSGKPGSGEGSTKG(SEQIDNO:1),GSGKPGSGEG(SEQIDNO:13),GKPGSGEG(SEQIDNO:14),或SGKPGSGE(SEQIDNO:15)。


3.权利要求1或2的肽，其中B是赖氨酸(K)或精氨酸(R)。


4.权利要求3的肽，其中B是K。


5.前述权利要求中任一项的肽，其中Z是G。


6.前述权利要求中任一项的肽，其中Z是选自谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)的带负电荷的氨基酸。


7.权利要求6的肽，其中Z是E。


8.权利要求2-7中任一项的肽，其中所述共有序列是GKPGSGE(SEQIDNO:5)或GKPGSGG(SEQIDNO:6)。


9.权利要求1或2的肽，其中所述共有序列是GSGKPGSGEGG(SEQIDNO:31)。


10.前述权利要求中任一项的肽，其中所述肽包含10-20个氨基酸。


11.权利要求1-10中任一项的肽，其中所述肽包含GGGSGKPGSGEGGGS(SEQIDNO:7)的氨基酸序列。


12.权利要求1-10中任一项的肽，其中所述肽包含GGGSGKPGSGEGGGGS(SEQIDNO:8)的氨基酸序列。


13.权利要求1-10中任一项的肽，其中所述肽包含GGGGSGKPGSGGGGS(SEQIDNO:9)的氨基酸序列。


14.权利要求1-10中任一项的肽，其中所述肽包含GGGGSGKPGSGEGGS(SEQIDNO:10)的氨基酸序列。


15.权利要求1-10中任一项的肽，其中所述肽包含GGGGSGKPGSGEGGGS(SEQIDNO:11)的氨基酸序列。


16.权利要求1-10或11-15中任一项的肽，其中所述肽包含GGGGSGKPGSGEGGGGS(SEQIDNO:12)的氨基酸序列。


17.权利要求1-10或11-15中任一项的肽，其中所述肽包含STSGSGKPGSGEGST(S...

【专利技术属性】
技术研发人员：JJW威尔特齐乌斯，SA西弗斯，
申请(专利权)人：凯德药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US