改善免疫细胞功能制造技术

本公开涉及细胞疗法领域，并且更具体地，涉及通过细胞因子信号传导的改善来改善CAR和/或TCR功能。和/或TCR功能。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】改善免疫细胞功能
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2021年3月11日提交的美国临时申请63/159,610号和2021年6月14日提交的美国临时申请63/210,300号的优先权，这些申请出于所有目的全文并入本文。


[0003]本公开涉及免疫学和细胞疗法领域，并且更具体地，涉及通过调节细胞因子信号传导来改善包含嵌合抗原受体(CAR)和/或T细胞受体(TCR)的基于T细胞和自然杀伤(NK)细胞的免疫疗法。

技术介绍

[0004]免疫系统通过其在全身搜索、寻找和破坏恶性细胞的能力提供了针对癌症的先天防御。然而，这种防御机制需要注意的是，某些癌症可能会诱导免疫抑制微环境，它会降低抗肿瘤免疫应答的稳健性。(Beatty等人，Clin Cancer Res,(21)(4):687
‑
632(2015))。这些免疫逃逸机制对细胞免疫疗法的实施和有效性提出了挑战，包括使用工程化细胞疗法技术，诸如嵌合抗原受体(CAR)T细胞疗法和T细胞受体(TCR)T细胞疗法和/或基于自然杀伤细胞的免疫疗法。
[0005]由于总体T细胞功能和增殖依赖于细胞因子信号传导，因此理论上认为使用细胞因子可以提高基于T细胞的疗法的总体质量和效力。过去的研究已经证明IL
‑
2作为一种基于T细胞的治疗扩增手段是成功的，尽管缺点包括T
‑
细胞耗竭和T
‑
细胞持久性降低。(Gattinoni等人，J Clin Invest,(115):1616r/>‑
1626(2005))。其他研究表明，CAR
‑
T细胞与IL
‑
7和IL
‑
15一起使用可提高效力(Xu等人，Blood,(123):3750
‑
3759(2014))。还报道了CAR
‑
T效力随着IL
‑
21的使用得到了改善(Singh等人，Cancer Res,(71)3516
‑
3527(2011))。类似地，已经发现IL
‑
2可增强NK细胞的细胞毒性(Hu等人,Front.Immunol.,(20)1205(2019))。
[0006]因此，需要开发细胞因子信号传导作为用于改善基于免疫细胞的免疫疗法的功效的手段的用途。

技术实现思路

[0007]公开了膜结合白介素15(IL
‑
15)
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体。在实施方案中，膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体包含IL
‑
15多肽，该IL
‑
15多肽包含根据SEQ ID NO:6的氨基酸序列；第一接头，该第一接头将IL
‑
15结构域连结到根据SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:95的IL
‑
15Rαsushi结构域多肽；和跨膜结构域，该跨膜结构域包含FAS跨膜结构域或二聚化结构域，诸如IL
‑
7跨膜结构域。
[0008]在实施方案中，连结IL
‑
15多肽和IL
‑
15Rαsushi结构域的第一接头包含根据SEQ ID NO:8的氨基酸序列。在实施方案中，第一接头包含根据SEQ ID NO:10的氨基酸序列。
[0009]在实施方案中，IL
‑
15Rαsushi结构域多肽通过第二接头连结到跨膜结构域。在实
施方案中，第二接头包含根据SEQ ID NO:24的氨基酸序列。在实施方案中，第二接头包含根据SEQ ID NO:26的氨基酸序列。
[0010]在实施方案中，跨膜结构域是包含根据SEQ ID NO:22的氨基酸序列的FAS跨膜结构域。在实施方案中，跨膜结构域是包含根据SEQ ID NO:42的氨基酸序列的FAS跨膜结构域。在实施方案中，IL
‑
7跨膜结构域包含根据SEQ ID NO:23的氨基酸序列。
[0011]在实施方案中，膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体包含选自由SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28和94组成的组的氨基酸序列。在实施方案中，膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体包含根据SEQ ID NO:30的氨基酸。
[0012]在实施方案中，膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体还包含信号传导序列。在一些实施方案中，信号传导序列包含根据SEQ ID NO:12
‑
20中的一者的氨基酸序列。在一些实施方案中，信号传导序列包含根据SEQ ID NO:12的氨基酸序列。
[0013]公开了编码本文所述的膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体的核酸。在实施方案中，编码膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体的核酸包含根据选自由SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:96、SEQ ID NO:97和SEQ ID NO:100组成的组的序列的核酸序列。
[0014]公开了包含编码本文所述的膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体的核酸的重组载体。
[0015]在实施方案中，重组载体或核酸还包含编码嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)的核酸。在实施方案中，CAR或TCR结合肿瘤抗原。在实施方案中，肿瘤抗原选自由以下组成的组：2B4(CD244)、4
‑
1BB、5T4、A33抗原、腺癌抗原、肾上腺素受体β3(ADRB3)、A激酶锚定蛋白4(AKAP
‑
4)、甲胎蛋白(AFP)、间变性淋巴瘤激酶(ALK)、雄激素受体、B7H3(CD276)、β2
‑
整合素、BAFF、B淋巴瘤细胞、B细胞成熟抗原(BCMA)、bcr
‑
abl(由断裂点簇集区(BCR)和阿伯森鼠白血病病毒致癌基因同源物1(Abl)组成的致癌基因融合蛋白)、BhCG、骨髓基质细胞抗原2(BST2)、CCCTC
‑
结合因子(锌指蛋白)样(BORIS或印记位点调节物兄弟)、BST2、C242抗原、9
‑0‑
乙酰基
‑
CA19
‑
9标记物、CA
‑
125、CAEX、钙网本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种膜结合白介素15(IL
‑
15)
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体，包含IL
‑
15多肽，所述IL
‑
15多肽包含根据SEQ ID NO:6的氨基酸序列；第一接头，所述第一接头将IL
‑
15结构域连结到根据SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:95的IL
‑
15Rαsushi结构域多肽；和跨膜结构域，所述跨膜结构域包含IL
‑
7跨膜结构域或FAS跨膜结构域。2.根据权利要求1所述的膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体，其中所述第一接头包含根据SEQ ID NO:8的氨基酸序列。3.根据权利要求2所述的膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体，其中所述第一接头包含根据SEQ ID NO:11的氨基酸序列。4.根据权利要求1至3中任一项所述的膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体，其中所述IL
‑
15Rαsushi结构域多肽通过作为第二接头连结到所述跨膜结构域。5.根据权利要求4所述的膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体，其中所述第二接头包含根据SEQ ID NO:24的氨基酸序列。6.根据权利要求5所述的膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体，其中所述第二接头包含根据SEQ ID NO:26的氨基酸序列。7.根据权利要求1至6中任一项所述的膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体，其中所述跨膜结构域是包含根据SEQ ID NO:22的氨基酸序列的FAS跨膜结构域。8.根据权利要求7所述的膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体，包含选自由SEQ ID NO:27、28和94组成的组的氨基酸序列。9.根据权利要求1至6中任一项所述的膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体，其中所述跨膜结构域是包含根据SEQ ID NO:23的氨基酸序列的IL
‑
7跨膜结构域。10.根据权利要求9所述的膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体，包含根据SEQ ID NO:30的氨基酸。11.根据权利要求1至8中任一项所述的膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体，还包含信号传导序列。12.根据权利要求11所述的膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体，其中所述信号传导序列包含根据SEQ ID NO:12
‑
20中的一者的氨基酸序列。13.根据权利要求12所述的膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体，其中所述信号传导序列包含根据SEQ ID NO:12的氨基酸序列。14.一种核酸，所述核酸编码根据权利要求1至13中任一项所述的膜结合IL
‑
15
‑
IL
‑
15Rαsushi结构域嵌合受体。15.根据权利要求14所述的核酸，其中所述核酸包含根据选自由SEQID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:96、SEQ ID NO:97和SEQ ID NO:100组成的组的序列的核酸序列。16.一种重组载体，包含根据权利要求14所述的核酸。17.根据权利要求14或15所述的重组载体或核酸，其中所述重组载体或核酸还包含编码嵌合抗原受体或T细胞受体的核酸。18.根据权利要求14或15所述的重组载体或核酸，其中所述嵌合抗原受体或T细胞受体结合肿瘤抗原。19.根据权利要求14或15所述的重组载体或核酸，其中所述肿瘤抗原选自由以下组成的组：2B4(CD244)、4
‑
1BB、5T4、A33抗原、腺癌抗原、肾上腺素受体β3(ADRB3)、A激酶锚定蛋
白4(AKAP
‑
4)、甲胎蛋白(AFP)、间变性淋巴瘤激酶(ALK)、雄激素受体、B7H3(CD276)、β2
‑
整合素、BAFF、B淋巴瘤细胞、B细胞成熟抗原(BCMA)、bcr
‑
abl(由断裂点簇集区(BCR)和阿伯森鼠白血病病毒致癌基因同源物1(Abl)组成的致癌基因融合蛋白)、BhCG、骨髓基质细胞抗原2(BST2)、CCCTC
‑
结合因子(锌指蛋白)样(BORIS或印记位点调节物兄弟)、BST2、C242抗原、9
‑0‑
乙酰基
‑
CA19
‑
9标记物、CA
‑
125、CAEX、钙网蛋白、碳酸酐酶9(CAIX)、C
‑
MET、CCR4、CCR5、CCR8、CD2、CD3、CD4、CD5、CD8、CD7、CD10、CD16、CD19、CD20、CD22、CD23(IgE受体)、CD24、CD25、CD27、CD28、CD30(TNFRSF8)、CD33、CD34、CD38、CD40、CD40L、CD41、CD44、CD44V6、CD49f、CD51、CD52、CD56、CD63、CD70、CD72、CD74、CD79a、CD79b、CD80、CD84、CD96、CD97、CD100、CD123、CD125、CD133、CD137、CD138、CD150、CD152(CTLA
‑
4)、CD160、CD171、CD179a、CD200、CD221、CD229、CD244、CD272(BTLA)、CD274(PD
‑
L1、B7H1)、CD279(PD
‑
1)、CD352、CD358、CD300分子样家族成员f(CD300LF)、癌胚抗原(CEA)、闭合蛋白6(CLDN6)、C型凝集素样分子
‑
1(CLL
‑
1或CLECL1)、C型凝集素结构域家族12成员A(CLEC12A)、巨细胞病毒(CMV)感染的细胞抗原、CNT0888、CRTAM(CD355)、CS
‑
1(也称为CD2亚类1、CRACC、CD319和19A24)、CTLA
‑
4、细胞周期蛋白B l、染色体X开放阅读框61(CXORF61)、细胞色素P450 1B 1(CYP1B1)、DNAM
‑
1(CD226)、桥粒芯糖蛋白4、DR3、DR5、E
‑
钙粘蛋白新表位、表皮生长因子受体(EGFR)、EGF1R、表皮生长因子受体变体III(EGFRvIII)、上皮糖蛋白
‑
2(EGP
‑
2)、上皮糖蛋白
‑
40(EGP
‑
40)、含有EGF样模块的粘蛋白样激素受体样2(EMR2)、延长因子2突变(ELF2M)、内皮唾液酸蛋白、上皮细胞粘附分子(EPCAM)、肝配蛋白A型受体2(EphA2)、肝配蛋白B2、受体酪氨酸蛋白激酶erb
‑
B2,3,4(erb
‑
B2,3,4)、ERBB、ERBB2(Her2/neu)、ERG(跨膜蛋白酶、丝氨酸2(TMPRSS2)ETS融合基因)、ETA、位于染色体12p上的ETS易位变体基因6(ETV6
‑
AML)、IgA受体的Fc片段(FCAR或CD89)、成纤维细胞活化蛋白α(FAP)、FBP、Fc受体样5(FcRL5)、胎儿乙酰胆碱受体(AChR)、纤连蛋白额外结构域
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：R，
申请(专利权)人：凯德药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：