抗CTLA4抗体及其用途制造技术

本发明专利技术提供了抗细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA4或CTLA‑4)抗体、抗原结合片段，及其用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗CTLA4抗体及其用途
本公开内容涉及细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(cytotoxicT-lymphocyte-associatedprotein4，CTLA4或CTLA-4)抗体及其用途。
技术介绍
癌症是目前人类死亡率最高的疾病之一。根据世界卫生组织的统计数据，2012年全球癌症发病和死亡病例数分别达到1400万和820万。在中国，新诊断的癌症病例为307万，死亡人数为220万。抗癌抗体的最新临床和商业成功已引起对基于抗体的治疗剂的极大兴趣。需要开发用于各种基于抗体的治疗剂中的抗癌抗体以治疗癌症。
技术实现思路
本公开内容涉及抗CTLA4抗体、其抗原结合片段，及其用途。在一方面，本公开内容涉及与细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA4)结合的抗体或其抗原结合片段，其包含：重链可变区(VH)，所述重链可变区(VH)包含互补决定区(CDRs)1、2和3，其中VHCDR1区包含与所选VHCDR1氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，VHCDR2区包含与所选VHCDR2氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，并且VHCDR3区包含与所选VHCDR3氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；以及轻链可变区(VL)，所述轻链可变区(VL)包含CDRs1、2和3，其中VLCDR1区包含与所选VLCDR1氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，VLCDR2区包含与所选VLCDR2氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，并且VLCDR3区包含与所选VLCDR3氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，其中所选VHCDRs1、2和3氨基酸序列以及所选VLCDRs1、2和3氨基酸序列是以下之一：(1)所选VHCDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQIDNO:1、2、3中示出，并且所选VLCDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQIDNO:4、5、6中示出；(2)所选VHCDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQIDNO:7、8、9中示出，并且所选VLCDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQIDNO:10、11、12中示出；(3)所选VHCDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQIDNO:45、46、47中示出，并且所选VLCDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQIDNO:48、49、50中示出；(4)所选VHCDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQIDNO:51、52、53中示出，并且所选VLCDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQIDNO:54、55、56中示出。在一些实施方案中，VH包含分别具有SEQIDNO:1、2和3中所示氨基酸序列的CDR1、2、3，并且VL包含分别具有SEQIDNO:4、5和6中所示氨基酸序列的CDR1、2、3。在一些实施方案中，VH包含分别具有SEQIDNO:7、8和9中所示氨基酸序列的CDR1、2、3，并且VL包含分别具有SEQIDNO:10、11和12中所示氨基酸序列的CDR1、2、3。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段与人CTLA4特异性结合。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段是人源化的抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段是单链可变片段(scFV)。在一方面，本公开内容涉及一种核酸，其包含编码多肽的多核苷酸，所述多肽包含：(1)包含重链可变区(VH)的免疫球蛋白重链或其片段，所述重链可变区(VH)包含分别包含SEQIDNO:1、2和3中所示氨基酸序列的互补决定区(CDR)1、2和3，并且其中所述VH在与包含SEQIDNO:18、19、20或70中所示氨基酸序列的轻链可变区(VL)配对时与CTLA4结合；(2)包含VL的免疫球蛋白轻链或其片段，所述VL包含分别包含SEQIDNO:4、5和6中所示氨基酸序列的CDR1、2和3，并且其中所述VL在与包含SEQIDNO:13、14、15、16、17或69中所示氨基酸序列的VH配对时与CTLA4结合；(3)包含重链可变区(VH)的免疫球蛋白重链或其片段，所述重链可变区(VH)包含分别包含SEQIDNO:7、8和9中所示氨基酸序列的CDR1、2和3，并且其中所述VH在与包含SEQIDNO:25、26、27、28或72中所示氨基酸序列的轻链可变区(VL)配对时与CTLA4结合；或者(4)包含VL的免疫球蛋白轻链或其片段，所述VL包含分别包含SEQIDNO:10、11和12中所示氨基酸序列的CDR1、2和3，并且其中所述VL在与包含SEQIDNO:21、22、23、24或71中所示氨基酸序列的VH配对时与CTLA4结合；(5)包含重链可变区(VH)的免疫球蛋白重链或其片段，所述重链可变区(VH)包含分别包含SEQIDNO:45、46和47中所示氨基酸序列的CDR1、2和3，并且其中所述VH在与包含SEQIDNO:74中所示氨基酸序列的轻链可变区(VL)配对时与CTLA4结合；(6)包含VL的免疫球蛋白轻链或其片段，所述VL包含分别包含SEQIDNO:48、49和50中所示氨基酸序列的CDR1、2和3，并且其中所述VL在与包含SEQIDNO:73中所示氨基酸序列的VH配对时与CTLA4结合；(7)包含重链可变区(VH)的免疫球蛋白重链或其片段，所述重链可变区(VH)包含分别包含SEQIDNO:51、52和53中所示氨基酸序列的CDR1、2和3，并且其中所述VH在与包含SEQIDNO:76中所示氨基酸序列的轻链可变区(VL)配对时与CTLA4结合；(8)包含VL的免疫球蛋白轻链或其片段，所述VL包含分别包含SEQIDNO:54、55和56中所示氨基酸序列的CDR1、2和3，并且其中所述VL在与包含SEQIDNO:75中所示氨基酸序列的VH配对时与CTLA4结合。在一些实施方案中，所述核酸包含编码多肽的多核苷酸，所述多肽包含含有VH的免疫球蛋白重链或其片段，所述VH包含分别包含SEQIDNO:1、2和3中所示氨基酸序列的CDR1、2和3。在一些实施方案中，所述核酸包含编码多肽的多核苷酸，所述多肽包含含有VL的免疫球蛋白轻链或其片段，所述VL包含分别包含SEQIDNO:4、5和6中所示氨基酸序列的CDR1、2和3。在一些实施方案中，所述核酸包含编码多肽的多核苷酸，所述多肽包含含有VH的免疫球蛋白重链或其片段，所述VH包含分别包含SEQIDNO:7、8和9中所示氨基酸序列的CDR1、2和3。在一些实施方案中，所述核酸包含编码多肽的多核苷酸，所述多肽包含含有VL的免疫球蛋白轻链或其片段，所述VL包含分别包含SEQIDNO:10、11和12中所示氨基酸序列的CDR1、2和3。在一些实施方案中，所述VH在与VL配对时与人CTLA4特异性结合。在一些实施方案中，所述VL在与VH配对时与人CTLA4特异性结合。在一些实施方案中，所述免疫球蛋白重链或其片段是人源化的免疫球蛋白重链或其片段，并且所述免疫球蛋白轻链或其片段是人源化的免疫球蛋白轻链或其片段。在一本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.与细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA4)结合的抗体或其抗原结合片段，其包含：/n重链可变区(VH)，所述重链可变区(VH)包含互补决定区(CDRs)1、2和3，其中VH CDR1区包含与所选VH CDR1氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，VH CDR2区包含与所选VH CDR2氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，并且VH CDR3区包含与所选VHCDR3氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；以及/n轻链可变区(VL)，所述轻链可变区(VL)包含CDR 1、2和3，其中VL CDR1区包含与所选VLCDR1氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，VLCDR2区包含与所选VL CDR2氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，并且VLCDR3区包含与所选VL CDR3氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；/n其中所述所选VH CDR 1、2和3氨基酸序列以及所述所选VL CDR 1、2和3氨基酸序列是以下之一：/n(1)所述所选VH CDR 1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:1、2、3中示出，并且所述所选VL CDR 1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:4、5、6中示出；/n(2)所述所选VH CDR 1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:7、8、9中示出，并且所述所选VL CDR 1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:10、11、12中示出；/n(3)所述所选VH CDR 1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:45、46、47中示出，并且所述所选VL CDR 1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:48、49、50中示出；/n(4)所述所选VH CDR 1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:51、52、53中示出，并且所述所选VL CDR 1、2、3氨基酸序列分别在SEQ ID NO:54、55、56中示出。/n...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.与细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA4)结合的抗体或其抗原结合片段，其包含：
重链可变区(VH)，所述重链可变区(VH)包含互补决定区(CDRs)1、2和3，其中VHCDR1区包含与所选VHCDR1氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，VHCDR2区包含与所选VHCDR2氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，并且VHCDR3区包含与所选VHCDR3氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；以及
轻链可变区(VL)，所述轻链可变区(VL)包含CDR1、2和3，其中VLCDR1区包含与所选VLCDR1氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，VLCDR2区包含与所选VLCDR2氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，并且VLCDR3区包含与所选VLCDR3氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
其中所述所选VHCDR1、2和3氨基酸序列以及所述所选VLCDR1、2和3氨基酸序列是以下之一：
(1)所述所选VHCDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQIDNO:1、2、3中示出，并且所述所选VLCDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQIDNO:4、5、6中示出；
(2)所述所选VHCDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQIDNO:7、8、9中示出，并且所述所选VLCDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQIDNO:10、11、12中示出；
(3)所述所选VHCDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQIDNO:45、46、47中示出，并且所述所选VLCDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQIDNO:48、49、50中示出；
(4)所述所选VHCDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQIDNO:51、52、53中示出，并且所述所选VLCDR1、2、3氨基酸序列分别在SEQIDNO:54、55、56中示出。


2.权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述VH包含分别具有SEQIDNO:1、2和3中所示氨基酸序列的CDR1、2、3，并且所述VL包含分别具有SEQIDNO:4、5和6中所示氨基酸序列的CDR1、2、3。


3.权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述VH包含分别包含SEQIDNO:7、8和9中所示氨基酸序列的CDR1、2、3，并且所述VL包含分别包含SEQIDNO:10、11和12中所示氨基酸序列的CDR1、2、3。


4.权利要求1至3中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段与人CTLA4特异性结合。


5.权利要求1至4中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段是人源化的抗体或其抗原结合片段。


6.权利要求1至5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段是单链可变片段(scFV)。


7.一种核酸，其包含编码多肽的多核苷酸，所述多肽包含：
(1)包含重链可变区(VH)的免疫球蛋白重链或其片段，所述重链可变区(VH)包含分别包含SEQIDNO:1、2和3中所示氨基酸序列的互补决定区(CDR)1、2和3，并且其中所述VH在与包含SEQIDNO:18、19、20或70中所示氨基酸序列的轻链可变区(VL)配对时与CTLA4结合；
(2)包含VL的免疫球蛋白轻链或其片段，所述VL包含分别包含SEQIDNO:4、5和6中所示氨基酸序列的CDR1、2和3，并且其中所述VL在与包含SEQIDNO:13、14、15、16、17或69中所示氨基酸序列的VH配对时与CTLA4结合；
(3)包含重链可变区(VH)的免疫球蛋白重链或其片段，所述重链可变区(VH)包含分别包含SEQIDNO:7、8和9中所示氨基酸序列的CDR1、2和3，并且其中所述VH在与包含SEQIDNO:25、26、27、28或72中所示氨基酸序列的轻链可变区(VL)配对时与CTLA4结合；或者
(4)包含VL的免疫球蛋白轻链或其片段，所述VL包含分别包含SEQIDNO:10、11和12中所示氨基酸序列的CDR1、2和3，并且其中所述VL在与包含SEQIDNO:21、22、23、24或71中所示氨基酸序列的VH配对时与CTLA4结合；
(5)包含重链可变区(VH)的免疫球蛋白重链或其片段，所述重链可变区(VH)包含分别包含SEQIDNO:45、46和47中所示氨基酸序列的CDR1、2和3，并且其中所述VH在与包含SEQIDNO:74中所示氨基酸序列的轻链可变区(VL)配对时与CTLA4结合；
(6)包含VL的免疫球蛋白轻链或其片段，所述VL包含分别包含SEQIDNO:48、49和50中所示氨基酸序列的CDR1、2和3，并且其中所述VL在与包含SEQIDNO:73中所示氨基酸序列的VH配对时与CTLA4结合；
(7)包含重链可变区(VH)的免疫球蛋白重链或其片段，所述重链可变区(VH)包含分别包含SEQIDNO:51、52和53中所示氨基酸序列的CDR1、2和3，并且其中所述VH在与包含SEQIDNO:76中所示氨基酸序列的轻链可变区(VL)配对时与CTLA4结合；
(8)包含VL的免疫球蛋白轻链或其片段，所述VL包含分别包含SEQIDNO:54、55和56中所示氨基酸序列的CDR1、2和3，并且其中所述VL在与包含SEQIDNO:75中所示氨基酸序列的VH配对时与CTLA4结合。


8.权利要求7所述的核酸，其中所述核酸包含编码多肽的多核苷酸，所述多肽包含含有VH的免疫球蛋白重链或其片段，所述VH包含分别包含SEQIDNO:1、2和3中所示氨基酸序列的CDR1、2和3。


9.权利要求7所述的核酸，其中所述核酸包含编码多肽的多核苷酸，所述多肽包含含有VL的免疫球蛋白轻链或其片段，所述VL包含分别包含SEQIDNO:4、5和6中所示氨基酸序列的CDR1、2和3。


10.权利要求7所述的核酸，其中所述核酸包含编码多肽的多核苷酸，所述多肽包含含有VH的免疫球蛋白重链或其片段，所述VH包含分别包含SEQIDNO:7、8和9中所示氨基酸序列的CDR1、2和3。


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【专利技术属性】
技术研发人员：杨毅，郭雅南，程晓东，陈云云，谢婧书，董春艳，杨放，陆程远，沈月雷，倪健，
申请(专利权)人：祐和医药科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11