人源脂肪干细胞来源的神经元前体细胞及其制备方法和应用技术

技术编号:24596562 阅读:58 留言:0更新日期:2020-06-21 03:38
本发明专利技术公开了一种诱导培养基、采用该培养基诱导培养人源脂肪干细胞分化为神经元前体细胞,包括NEAA、β‑巯基乙醇、谷氨酰胺、生长因子和神经营养因子,所述NEAA与β‑巯基乙醇的体积比为4:1‑13:1,所述NEAA与谷氨酰胺的体积比为1:2‑2:1,所述生长因子由10‑20ng/mL的bFGF和10‑20ng/mL的EGF组成,所述神经营养因子由10‑20ng/mL的BDNF、10‑20ng/mL的NGF和10‑20ng/mL的NT3组成。本发明专利技术人源脂肪干细胞来源的神经元前体细胞群通过特定的诱导培养基诱导人源脂肪干细胞分化而得,神经元前体细胞健康状况好,活性及纯度高。

Neural precursor cells derived from human adipose stem cells and their preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
人源脂肪干细胞来源的神经元前体细胞及其制备方法和应用
本专利技术涉及干细胞及生物医药
,尤其涉及人源脂肪干细胞来源的神经元前体细胞、制备方法及其在治疗神经系统疾病方面的应用。
技术介绍
人源脂肪干细胞(Human-AdiposeDerivedAdultStemcell,hADSC),因其易于取材,体外培养老化率低,低免疫原性,生物安全性高,不涉及伦理问题等优势,已成为最有前景的细胞来源之一。脂肪干细胞向神经分化是其向临床转化治疗神经系统疾病的关键一步。目前,诱导脂肪干细胞向神经分化的方案有化合物法、基因重编程法。化合物法的弊端是化合物对细胞的毒副作用,影响分化获得神经细胞的健康状况,同时化合物法具有无序性和低效性。基因重编程法,虽然具有针对性和高效性,但基因及基因载体的选择是个难度较大的问题。目前,通过诱导脂肪干细胞分化成的神经细胞健康状况欠佳,诱导获得的神经细胞得率不高,而且会伴有细胞的坏死和凋亡现象,影响后续临床上的应用。另外,由脂肪干细胞诱导获得的神经元的分类定性存在欠缺,诱导分化后获得的细胞仍然是个复杂的细胞群体,本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种诱导培养基,其特征在于,包括NEAA、β-巯基乙醇、谷氨酰胺、生长因子和神经营养因子,所述NEAA与β-巯基乙醇的体积比为4:1-13:1,所述NEAA与谷氨酰胺的体积比为1:2-2:1,所述生长因子由10-20ng/mL的bFGF和10-20ng/mL的EGF组成,所述神经营养因子由10-20ng/mL的BDNF、10-20ng/mL的NGF和10-20ng/mL的NT3组成。/n

【技术特征摘要】
1.一种诱导培养基,其特征在于,包括NEAA、β-巯基乙醇、谷氨酰胺、生长因子和神经营养因子,所述NEAA与β-巯基乙醇的体积比为4:1-13:1,所述NEAA与谷氨酰胺的体积比为1:2-2:1,所述生长因子由10-20ng/mL的bFGF和10-20ng/mL的EGF组成,所述神经营养因子由10-20ng/mL的BDNF、10-20ng/mL的NGF和10-20ng/mL的NT3组成。


2.一种采用权利要求1所述的诱导培养基将人源脂肪干细胞分化成神经元前体细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1,向超低吸附培养皿中加入诱导培养基后,注入脂肪干细胞,对脂肪干细胞进行诱导培养;
S2,收集成球生长的悬浮脂肪干细胞,洗掉血清后进行消化处理,处理后的细胞悬浮于诱导培养基中继续培养,获得神经元前体细胞。


3.一种人源...

【专利技术属性】
技术研发人员:高山峨
申请(专利权)人:上海泉眼生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:上海;31

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