一种四环素类抗生素降解基因tet(X)的优化及其在真核表达系统中的应用技术方案

本发明专利技术属于基因工程技术领域，具体涉及一种四环素类抗生素降解基因tet(X)的优化及其在真核表达系统中的应用，为构建一种可分泌四环素类抗生素降解酶的真核表达系统，从而为四环素类抗生素的降解提供了一种新的途径，本发明专利技术在基因tet(X)序列的基础上经过优化得到适用于真核表达系统的tet(X)

Optimization of a tetracycline antibiotic degradation gene tet (x) and its application in eukaryotic expression system

【技术实现步骤摘要】
一种四环素类抗生素降解基因tet(X)的优化及其在真核表达系统中的应用
本专利技术属于基因工程
，具体涉及一种四环素类抗生素降解基因tet(X)的优化及其在真核表达系统中的应用。
技术介绍
四环素类抗生素包括四环素、土霉素、金霉素等，是一类广谱抗生素，被广泛应用于人类及动物疾病的防治，同时也被作为饲料添加剂应用于禽畜养殖业和水产养殖业中。四环素类抗生素结构复杂，含并四苯骨架，属于难生物降解物质，很容易在环境中富集，在动物体内，四环素仅有部分被吸收并发生代谢，大部分以活性形式(母体或代谢产物)随粪便和尿液排出体外，进入生态环境。目前，四环素类抗生素在家畜和人群中均使用广泛，因其较低的吸收率导致四环素类抗生素的残留问题十分严峻，四环素类抗生素的残留对环境、家畜和人类健康发展均造成重大威胁。当前，降解四环素类抗生素的方式主要有以下两种：一是生物降解，包括微生物降解和植物降解；二是非生物降解，如水解、氧化降解及光降解等。近期，四环素降解基因tet(X)新亚型的发现，为解决四环素的残留问题提供一些新思路。tet(X)可编码一种依赖于本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种编码四环素类抗生素降解酶的优化基因tet(X)

【技术特征摘要】
1.一种编码四环素类抗生素降解酶的优化基因tet(X)*，其特征在于，该基因具有如SEQIDNO：2所示的核苷酸优化序列。


2.一种能分泌四环素类抗生素降解酶Tet(X)的工程酵母，其特征在于，该工程酵母含有权利要求1所述的优化基因tet(X)*。


3.一种能分泌四环素类抗生素降解酶Tet(X)的工程酵母的构建方法，其特征在于，以权利要求1所述的优化基因tet(X)*为目的基因，以pPIC9K为载体，以毕赤酵母GS115为宿主，通过基因工程手段获得。


4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、将优化基因tet(X)*插入到pPIC9K质粒中，构建重组质粒；
S2、将毕赤酵母GS115制备成GS115感受态细胞；
S3、将步骤S1的重组质粒转化到步骤S2的GS115感受态细胞中，筛选阳性转化子得到工程酵母。


5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，步骤S1的重组质粒在转...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙坚，贺骞，余军军，崔超月，陈冲，廖晓萍，刘雅红，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：广东;44