同时测定蜂王浆中多种四环素类药物残留量的检测方法技术

本发明专利技术涉及蜂王浆中四环素类药物残留检测的方法，尤其涉及土霉素、四环素、去甲金霉素、金霉素、强力霉素、４－差向土霉素、４－差向四环素、４－差向金霉素、二甲胺四环素和甲烯土霉素等１０种兽药的检测。同时测定蜂王浆中多种四环素类药物残留量的检测方法，采用甲醇沉淀蛋白，然后调节ｐＨ值，再经过多级净化，采用液相色谱－质谱／质谱仪测定，可以同时简便的蜂王浆中多种四环素类药物残留。本发明专利技术只需要进行一次前处理就可以检测四环素类药物达到１０种，土霉素、四环素、去甲金霉素、金霉素和强力霉素五种四环素族抗生素的测定低限均为２．０μｇ／ｋｇ；４－差向土霉素、４－差向四环素、４－差向金霉素、甲烯土霉素和二甲胺四环素五种的测定低限均为１０．０μｇ／ｋｇ。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
同时测定蜂王浆中多种四环素类药物残留量的检测方法，其特征在于该方法包括以下的步骤：　①提取：称取蜂王浆置于离心管中，加入ＥＤＴＡ－ＭｃＩｌｖａｉｎｅ缓冲溶液混匀，再加入甲醇混匀，离心，上层清液转移到容量瓶中；下层沉淀再加入ＥＤＴＡ－Ｍ ｃＩｌｖａｉｎｅ缓冲溶液，混匀，离心，再把上层清液转移到另一容量瓶中；用ＥＤＴＡ－ＭｃＩｌｖａｉｎｅ缓冲溶液把提取液定容，用氢氧化钠溶液调节ｐＨ为５．５～６．５，待净化用；　②ＨＬＢ固相萃取柱净化：将上述提取液过预先淋洗好的ＨＬＢ固相 萃取柱，再用甲醇溶液淋洗，减压抽干，弃去全部淋出液；用甲醇和乙酸乙酯混合液洗脱，摇匀；　③离子交换柱净化：将上述溶液过预洗好的羧酸型离子交换柱，再用甲醇淋洗，减压抽干，弃去全部淋出液；用草酸－乙腈混合液以洗脱，摇匀，供液相色谱－质谱／ 质谱仪测定；　④液相色谱－质谱／质谱仪测定：液相色谱流动相体系采用乙腈和草酸体系，流动相梯度洗脱，质谱分别采用四环素类兽药标准溶液以流动注射的方式在正离子模式下进行母离子全扫描，再对其子离子进行全扫描。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：黄超群，陈笑梅，谢文，丰金平，刘海山，丁慧瑛，
申请(专利权)人：浙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]