一种检测β-内酰胺类和四环素类抗生素的试剂盒及方法技术

技术编号:8719316 阅读:267 留言:0更新日期:2013-05-17 20:49
本发明专利技术公开了一种检测β-内酰胺类抗生素和四环素类抗生素的试剂盒及方法。试剂盒包括微孔条、微孔试剂、试纸和微孔塞,所述的微孔试剂为冻干的胶体金标记的头孢类和四环素类药物特异性抗体,所述头孢类药物特异性抗体可为为头孢类药物单克隆抗体或头孢类药物多克隆抗体;所述四环素类药物特异性抗体可分为四环素类药物单克隆抗体或四环素类药物多克隆抗体;所述试纸由样品吸收垫、反应膜、吸水垫、保护膜、底板,依次连接组成,所述反应膜上包括两条检测线和一条质控线,两条检测线分别包被有头孢类药物-载体蛋白偶联物和四环素类药物半抗原-载体蛋白偶联物,质控线包被有抗抗体。用本发明专利技术试剂盒检测β-内酰胺类抗生素和四环素类抗生素的方法,简便、快速、直观、准确、便于携带、适用范围广、成本低、易推广使用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种检测β -内酰胺类和四环素类抗生素的试剂盒及方法。
技术介绍
抗生素是20世纪最重要的医学发现之一,对控制人类感染性疾病发挥了巨大作用。但是近年来由于滥用抗生素所导致的耐药病原菌的增加不仅使医疗费用增高,而且使感染性疾病的发病率及死亡率也相应增加。除此之外,抗生素广泛应用于农业与畜牧业也是造成耐药的不可忽略的原因。在乳业中常用β_内酰胺类、四环素类等抗生素药物作用畜类乳房炎、子宫炎等疾病的治疗,也有生产者在饲料中添加抗生素,以改善畜禽的饲料转化率。美国食品和药品监督管理局(FDA)的调查表明:不注意休药期、用药不合理或是使用违禁药物,是导致动物性食品中抗生素残留的主要原因。长期摄入含抗生素的食品,可造成药物积累,当达到一定浓度后,就会对人体的健康带来一系列负面影响,如产生过敏反应、破坏胃肠道菌群平衡和增强细菌耐药性等。更为重要的是,抗生素被过量食入健康人肠道,会破坏健康人的正常菌群环境,导致人体免疫力的降低,从而危害消费者的身体健康,同时也影响牛奶及乳制品的出口贸易。我国的原料乳中β_内酰胺类和四环素类抗生素残留严重,对其开展监控检测是我国乳品业发展中极为关注的问题。为使牛奶中抗生素问题得到有效监控,符合最大残留限量标准,奶牛场、乳制品厂、政府监督部门、出入境检测、大型食品流通领域等都在努力寻求准确可行的检测方法,许多大型化学试剂和仪器公司也致力于开发内酰胺类和四环素类抗生素残留检测的方法和仪器。目前,牛奶及生鲜奶中内酰胺类和四环素类抗生素残留的检测方法依据不同的检测原理,大体可分为三大类:微生物受阻检测、理化检测法、免疫学分析法。微生物受阻检测方法,主要有抑菌圈试验、浑浊度试验、变色型检测金标试剂盒方法,该方法检测成本价低,但是灵敏度低、耗时长、耐药菌的存在容易导致误检;理化检测方法,是目前检测β -内酰胺类和四环素类抗生素的主要方法,有液相色谱法、色谱/质谱联用技术、气相色谱法等,精确度高,但其存在检测成本高、设备复杂、对检测人员的要求较高,检测耗时长等缺点,目前常用的免疫学分析法,主要为酶联免疫检测法和放射免疫分析法,需要的检测费用还是较高,不适合企业低成本的检测需要。中国专利技术专利200810162588.5 (CN101429241A)中公开了“青霉素与载体蛋白偶联产物和β-内酰胺类青霉素抗体制备的方法及用途”,该方法中的青霉素单克隆抗体制备的酶联免疫试剂盒仅能检测青霉素G、氨苄青霉素、羧苄青霉素三种β-内酰胺类抗生素,制备的胶体金试纸条检测灵敏度低,检测药物种类少。目前免疫分析领域缺乏能够同时检测内酰胺类和四环素类这两类抗生素的技术及其应用。因此,在实践中有必要建立一种敏感度高、操作简单、成本低、检测药物种类多、适合大规模推广的检测方法。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种检测β -内酰胺类和四环素类抗生素的试剂盒。本专利技术所提供的试剂盒包括微孔条、微孔试剂、微孔塞和试纸条,试纸条包括底板、样品吸收垫、反应膜、吸水垫、保护膜,其依次连接;所述微孔试剂为冻干的头孢类药物特异性抗体-胶体金标记物和四环素类药物特异性抗体-胶体金标记物;头孢类药物特异性抗体可为头孢类药物单克隆抗体或头孢类药物多克隆抗体,四环素类药物特异性抗体可为四环素类药物单克隆抗体或四环素类药物多克隆抗体;反应膜上包被有两条检测线和一条质控线;当头孢类药物特异性抗体为头孢类药物单克隆抗体时,微孔试剂中包含头孢类单克隆抗体-胶体金标记物,β -内酰胺类药物检测线包被有头孢类药物-载体蛋白偶联物,质控线包被羊抗鼠抗抗体;当头孢类药物特异性抗体为头孢类药物多克隆抗体时,微孔试剂中包含头孢类药物多克隆抗体-胶体金标记物,β -内酰胺类药物检测线包被头孢类药物-载体蛋白偶联物,质控线包被羊抗兔抗抗体;当四环素类药物特异性抗体为四环素类药物单克隆抗体时,微孔试剂中包含四环素类药物单克隆抗体-胶体金标记物,四环素类药物检测线包被有四环素类药物半抗原-载体蛋白偶联物,质控线包被羊抗鼠抗抗体;当四环素类药物特异性抗体为四环素类药物多克隆抗体时,微孔试剂中包含四环素类药物多克隆抗体-胶体金标记物,四环素类药物检测线包被四环素类药物半抗原-载体蛋白偶联物,质控线包被羊抗兔抗抗体;四环素类药物半抗原是通过四环素与4-哌啶甲酸利用曼尼希反应,在四环素的酰胺的胺基上引入了 N-甲基-4-哌啶甲酸基团所得到的衍生物,得到四环素类药物半抗原如式I所示:本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种检测β‑内酰胺类和四环素类抗生素的试剂盒,其特征在于包括试纸条、微孔条、微孔试剂和微孔塞,所述试纸条包括反应膜、样品吸收垫、吸水垫、保护膜、底板,所述反应膜上有两条检测线和一条质控线,两条检测线分别包被有头孢类药物‑载体蛋白偶联物和四环素类药物半抗原‑载体蛋白偶联物,质控线包被有抗抗体,所述微孔试剂为冻干的头孢类药物特异性抗体‑胶体金标记物和四环素类特异性抗体‑胶体金标记物。

【技术特征摘要】
1.一种检测β-内酰胺类和四环素类抗生素的试剂盒,其特征在于包括试纸条、微孔条、微孔试剂和微孔塞,所述试纸条包括反应膜、样品吸收垫、吸水垫、保护膜、底板,所述反应膜上有两条检测线和一条质控线,两条检测线分别包被有头孢类药物-载体蛋白偶联物和四环素类药物半抗原-载体蛋白偶联物,质控线包被有抗抗体,所述微孔试剂为冻干的头孢类药物特异性抗体-胶体金标记物和四环素类特异性抗体-胶体金标记物。2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述试纸条由样品吸收垫、反应膜、吸水垫、保护膜依次黏贴在底板上组成,权利要求1所述微孔条上具有微孔塞。3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于:所述保护膜粘贴在试纸条的样品吸收垫上,为检测端,上面有MAX标记线。4.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述的四环素类药物检测线靠近样品吸收垫一端,质控线靠近吸水垫一端,β-内酰胺类药物检测线在四环素类药物检测线和质控线之间。5.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:四环素类药物半抗原是通过四环素与4-哌啶甲酸利用曼尼希反应,在四环素的酰胺的胺基上引入了 N-甲基-4-哌啶甲酸基团所得到的衍生物。分子结构如式1:6.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述头孢类药物-载体蛋白偶联物由头孢类药物与载体蛋白偶联得到,所述四环素类药物半抗原-载体蛋白偶联物由式I化合物的四环素类药物半抗原与载体蛋白偶联得到,所述载体蛋白可为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白、人`血清白蛋白。7.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:头孢类药物特异性抗体-胶体金标...

【专利技术属性】
技术研发人员:何方洋万宇平吴鹏罗晓琴崔海峰冯静冯月君余厚美陈炜玲
申请(专利权)人:北京勤邦生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:北京;11

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