磺胺-喹诺酮二联检测卡制造技术

本实用新型专利技术公开了一种磺胺-喹诺酮二联检测卡。本实用新型专利技术包括盒体和盒体内的试纸条。试纸条包括底板、反应膜、样品吸收垫、结合物释放垫和吸水垫；盒体上有相应的样品槽和观察窗。沿样品液流动方向，底板（1）分为三个区域：加样区、反应膜设置区和吸水垫设置区；结合物释放垫（4）、样品吸收垫（3）设置于加样区上；结合物释放垫上包被有抗磺胺偶联物和抗喹诺酮偶联物金标抗体的混合物；反应膜上设有T线（6）和C线（7），T线依次包被有磺胺蛋白偶联物、喹诺酮蛋白偶联物，C线包被有兔抗鼠的质控线。本实用新型专利技术操作简单，检测时间短，易于推广，应用价值高。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本技术属于免疫化学快速检测
，具体涉及一种能够同时检测磺胺类和喹诺酮类药物的快速检测卡。
技术介绍
磺胺类药,英文名称为Sulfonamides,是通过人工合成的氨苯磺胺衍生物,主要用于预防和治疗细菌感染性疾病。代表药物有磺胺二甲基嘧啶、磺胺嘧啶、磺胺甲基异恶唑、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺喹恶啉等。磺胺类药物一般为白色或淡黄色结晶性粉末，遇光易变质，颜色逐渐变深，大多数本类药物不易在水中溶解，但易溶于稀碱。形成钠盐后易溶于水，其水溶液呈强碱性。磺胺类药物能抑制革兰氏阳性菌及一些阴性菌，可以治疗多种细菌感染，在兽医临床上广泛应用于治疗由敏感细菌感染的各种畜禽疾病。主要是通过干扰细菌的叶酸代谢而抑制细菌的生长繁殖。有些细菌生长时需要的一种“生长物质” 一对氨苯甲酸(PABA)，而磺胺类药的化学结构与氨基苯甲酸很象，它可以与氨苯甲酸竞争二氢叶酸合成酶，妨碍二氢叶酸的形成从而最终影响细菌核蛋白的合成，从而抑制细菌的生长繁殖。由于磺胺类药物在体内的作用和代谢时间较长，通过任何途径摄入的磺胺都有可能在人体内蓄积。蓄积浓度超过一定值时，就会对人体造成损害。短时间大剂量或长时间小剂量的刺激可分别引起急性或慢性中毒，影响机体的泌尿、免疫系统，破坏肌肉、肾脏和甲状腺等组织，如诱发人的甲状腺癌等。另外，人体内长期存在磺胺会导致许多细菌对磺胺类药物产生抗药性。因此，国际食品法典委员会(CAC)和许多国家规定，动物性食品中磺胺类总量的最大残留限量(MRL)为0. lmg/kg。喹诺酮类(Quinolones, QNs),是一类人工合成的含4_喹诺酮基本结构，对细菌DNA螺旋酶具有选择性抑制的抗生素。1962年最早的喹诺酮类药物萘啶酸首先用于临床，由于其抗菌谱窄、口服吸收差、副作用高等原因现在已很少使用。当前应用的喹诺酮大多为含有氟原子的氟喹诺酮类。这类 药物抗菌谱广，对革兰氏染色呈阴性杆菌活性较高，对其他抗生素耐药的德细菌也具有良好的抗菌作用，无交叉耐药性；在体内分布广，体内和组织中药物浓度高；口服吸收好，半衰期长，使用方便；与头孢菌素类药物相比，抗菌作用相似，但价格便宜。目前在兽医临床上常用的药物主要有诺氟沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星、氟甲喹等十几种，随着应用的增加，其各种毒副作用也逐渐显现出来，主要体现在头晕、低血糖、恶心、胃肠道症状、中枢神经系统和过敏反应。特别是近几年，严重的不良反应发生率约为1. 6% 1.8%，引起了全世界的关注。为了保障动物源性食品的安全，欧盟、美国及我国等很多国家都对喹诺酮类药物在动物源性食品中残留制定了最大残留限量(MRL)。我国农业部文件(农质发20093号文件)中规定了 2009年我国畜禽产品监测项目，禽肉中4种喹诺酮类药物残留是重要的监测项目之一。现有的磺胺和喹诺酮类检测方法多为色谱法，但是这些方法的灵敏度受样品的净化、浓缩等步骤的影响较大，再者这些方法需要复杂的仪器，过程繁琐，不适应现场大量样本的筛查，且目前现有的快速检测产品存在一定的局限性，无法同时检测磺胺和喹诺酮类物质的残留。本检测方法简便、灵敏，可同时检测磺胺和喹诺酮类药物残留，不需要昂贵的仪器设备和专业的分析人员，特别适合企业进行现场监测，易于推广。
技术实现思路
本技术的目的是提供一种灵敏度高、操作简单，检测时间短，能够同时检测磺胺和喹诺酮的试纸卡。本技术的特征在于包括盒体和盒体内的试纸条，试纸条包括底板、反应膜、样品垫、结合物释放垫和吸水垫。盒体上有相应的样品槽9和观察窗10。与常规试纸条不同的是，所述样品垫和所述结合物释放垫有重叠区，所述结合物释放垫和所述反应膜有重叠区，所述吸水垫和所述反应膜有重叠区。优选的重叠区保证了样品液流动的连续性，延长了反应时间，使反应能够充分发生，有效地降低了实验误差。沿样品液流动方向，底板I分为三个区域加样区、反应膜设置区和吸水垫设置区。反应膜2设于反应膜设置区上；结合物释放垫4、样品垫3设置于加样区上，结合释放垫靠近反应膜处设置；所述结合物释放垫上包被有抗磺胺和抗喹诺酮偶联物金标抗体的混合物。所述吸水垫设置区上设有吸水垫5 ;所述反应膜上设有T线6和C线7，T线依次包被有磺胺蛋白偶联物、喹诺酮蛋白偶联物，C线包被有兔抗鼠的质控线。所述两条T线与一条C线相互平行且与样品流动方向垂直。在反应膜上检测线印迹和质控线印迹的组合排列可为紫红色的条带。所述T线靠近结合物释放垫，所述C线靠近吸水垫。试纸条还包括固定膜8，可覆盖于所述样品垫、所述结合物释放垫和所述吸水垫上，固定膜与所述样品垫对应的区域设有样品槽9。所述固定膜为防水材质，可用于固定检测卡的各个组件，避免样品或试剂与外界环境中的物质发生反应，影响检测结果。所述样品垫的长度可为18mm，所述结合物释放垫的长度可为6mm，所述反应膜的长度可为20mm，所述吸水垫的长度可为20mm。所述T线距离所述结合物释放垫的垂直距离可为6mm ;所述C线距离所述吸水垫的垂直距离可为6mm ;所述T线和所述C线的垂直距离可为5mm，所述T线间的垂直距离可为3. 5mm。所述反应膜、所述样品垫、所述结合物释放垫和所述吸水垫可通过双面胶固定于盒体的底板上，它们与底板之间可设有高分子材料制成的背衬膜，用以阻止粘合剂中的有机溶剂对包被的蛋白和抗体的破坏。所述试纸卡具体为长70mm,宽20mm的条状。所述磺胺抗体可为磺胺单克隆抗体或多克隆抗体。所述喹诺酮抗体可为喹诺酮单克隆抗体和多克隆抗体。所述与磺胺和喹诺酮的偶联物可为牛血清白蛋白、人血清蛋白、卵清蛋白等。所述盒体可为硬质塑料，具体可为PVC材质。所述样品吸收垫可由玻璃纤维棉或玻璃棉制成。所述结合物释放垫可由玻璃纤维棉或玻璃棉制成。所述吸水垫可为厚滤纸或无纺布制成。所述反应膜为硝酸纤维素膜(NC膜)。本检测卡的检测原理为硝酸纤维素膜(NC)含有预先固定于测试区(T)的包被抗原、控制区(C)的二抗和固定于结合释放垫上的金标抗体。样品中的被检物在毛细渗移的过程中与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制了抗体和T区包被抗原的结合，使T区不显色，结果为阳性；反之，T区出现一条肉眼可见的红色条带，结果为阴性。本技术磺胺-喹诺酮二联检测卡具有以下特点1、试纸卡具有很高的特异性。在实际检测中，可以同时检测磺胺和喹诺酮。并且能够显示出每一种化合物的检测结果。检测限见表I。表I检测限本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种磺胺?喹诺酮二联检测卡，它包括盒体和盒体内的试纸条，所述的检测卡盒体，其特征在于盒体上有相应的样品槽和观察窗，具体材料可为硬质塑料；所述的试纸条，其特征在于包括底板、反应膜、样品吸收垫、结合物释放垫和吸水垫；样品吸收垫可由玻璃纤维棉或玻璃棉制成；所述结合物释放垫可由玻璃纤维棉或玻璃棉制成；所述吸水垫可为厚滤纸或无纺布；所述反应膜为硝酸纤维素膜；?沿样品液流动方向，底板（1）分为三个区域：加样区、反应膜设置区和吸水垫设置区；反应膜（2）设于反应膜设置区上；样品吸收垫（3）、结合物释放垫（4）设置于加样区上，结合物释放垫靠近反应膜处设置；所述吸水垫设置区上设有吸水垫（5）；所述反应膜上设有检测线T线（6）和质控线C线（7），T线依次包被有磺胺、喹诺酮，C线包被有兔抗鼠的质控线。

【技术特征摘要】
1.一种磺胺-喹诺酮二联检测卡，它包括盒体和盒体内的试纸条，所述的检测卡盒体，其特征在于盒体上有相应的样品槽和观察窗，具体材料可为硬质塑料；所述的试纸条，其特征在于包括底板、反应膜、样品吸收垫、结合物释放垫和吸水垫；样品吸收垫可由玻璃纤维棉或玻璃棉制成；所述结合物释放垫可由玻璃纤维棉或玻璃棉制成；所述吸水垫可为厚滤纸或无纺布；所述反应膜为硝酸纤维素膜； 沿样品液流动方向，底板(I)分为三个区域加样区、反应膜设置区和吸水垫设置区；反应膜(2)设于反应膜设置区上；样品吸收垫(3)、结合物释放垫(4)设置于加样区上，结合物释放垫靠近反应膜处设置；所述吸水垫设置区上设有吸水垫(5);所述反应膜上设有检测线T线(6)和质控线C线(7)，T线依次包被有磺胺、喹诺酮，C线包被有兔抗鼠的质控线。2.根据权利要求1所述的磺胺-喹诺酮二联检测卡，其特征在于所述两条检测线T线与一条质控线C线相互平行且与样品流动方向垂...

【专利技术属性】
技术研发人员：何丹婷，李向梅，赵宁，邢泽柳，苏丽芳，
申请(专利权)人：北京维德维康生物技术有限公司，
类型：实用新型
国别省市：