一种双功能纳米颗粒及其制备方法与应用技术

技术编号:24022472 阅读:161 留言:0更新日期:2020-05-06 22:23
本发明专利技术公开一种双功能纳米颗粒及其制备方法与应用。该方法以叠氮基团改性的二氧化硅纳米颗粒为主体,通过“点击化学”反应在其表面修Anti‑CD47和钙网蛋白。本发明专利技术利用纳米颗粒多价态的优势,一方面,可特异性通过Anti‑CD47靶向肿瘤细胞表面的CD47受体,阻断CD47‑SIRPα信号通路恢复巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬能力;另一方面,在肿瘤细胞表面提供外源性的钙网蛋白,从而增强巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬,实现了在下调“Don’t eat me”信号的同时上调“Eat me”信号,从而显著增强巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬,调动机体的免疫响应,达到杀伤肿瘤的目的,因此可应用于与肿瘤免疫治疗相关药物的制备中。

A kind of bifunctional nanoparticles and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种双功能纳米颗粒及其制备方法与应用
本专利技术属于生物材料
,尤其涉及一种双功能纳米颗粒及其制备方法与应用。
技术介绍
肿瘤的发病率和死亡率居高不下,已成为威胁人类健康的首要疾病。正常情况下,免疫系统可以识别并清除肿瘤微环境中的肿瘤细胞,但是在癌症患者中,肿瘤细胞可以通过多种途径逃避机体免疫系统的识别和清除,如诱导免疫抑制的肿瘤微环境,降低肿瘤细胞的免疫原性等。其中,肿瘤细胞逃避天然免疫系统如巨噬细胞等吞噬细胞清除的机制之一是上调细胞表面“别吃我”(don'teatme)信号的表达。整合素相关蛋白(CD47)便是一种重要的自我信号,它通过与巨噬细胞上的配体信号调节蛋白α(SIRPα)结合,进而抑制巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬;此外,在天然免疫细胞如树突状细胞等向适应性免疫T细胞提呈抗原的过程中,CD47也发挥着抑制作用。因此,CD47在肿瘤免疫中发挥着重要的调节作用,靶向CD47是一个潜在的抗肿瘤方向。目前,在临床研究中已测试了多种基于CD47单克隆抗体的CD47抑制剂,并证明了其具有抗肿瘤的潜力,CD47阻断也被证明可以改善免疫检本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种双功能纳米颗粒的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:/n(1)将无水乙醇、水、氨水混合,然后搅拌均匀,得到混合物,接着往所述混合物中加入正硅酸乙酯,升温进行油浴加热处理,离心取沉淀,洗涤,干燥得到二氧化硅纳米颗粒;/n(2)将步骤(1)所述二氧化硅纳米颗粒加入无水甲苯中,超声分散均匀,然后再加入硅烷偶联剂,搅拌反应,离心取沉淀,然后离心洗涤,得到改性后的二氧化硅纳米颗粒;/n(3)将步骤(2)所述改性后的二氧化硅纳米颗粒加入N,N-二甲基甲酰胺中,超声分散均匀,然后再加入叠氮化钠,搅拌反应,离心取沉淀,然后洗涤,得到叠氮基团改性的二氧化硅纳米颗粒;/n(4)将DBCO-PEG

【技术特征摘要】
1.一种双功能纳米颗粒的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将无水乙醇、水、氨水混合,然后搅拌均匀,得到混合物,接着往所述混合物中加入正硅酸乙酯,升温进行油浴加热处理,离心取沉淀,洗涤,干燥得到二氧化硅纳米颗粒;
(2)将步骤(1)所述二氧化硅纳米颗粒加入无水甲苯中,超声分散均匀,然后再加入硅烷偶联剂,搅拌反应,离心取沉淀,然后离心洗涤,得到改性后的二氧化硅纳米颗粒;
(3)将步骤(2)所述改性后的二氧化硅纳米颗粒加入N,N-二甲基甲酰胺中,超声分散均匀,然后再加入叠氮化钠,搅拌反应,离心取沉淀,然后洗涤,得到叠氮基团改性的二氧化硅纳米颗粒;
(4)将DBCO-PEG4-NHS溶于二甲亚砜中,混合均匀,得到DBCO-PEG4-NHS溶液;将Anti-CD47加入所述DBCO-PEG4-NHS溶液中,混合均匀,然后进行孵育处理,超滤离心,取超滤管中的保留液,得到DBCO-PEG4-CD47溶液;
(5)将钙网蛋白加入步骤(4)所述DBCO-PEG4-NHS溶液中,混合均匀,进行孵育处理,超滤离心,取超滤管中的保留液,得到DBCO-PEG4-CRT溶液;
(6)将步骤(3)所述叠氮基团改性的二氧化硅纳米颗粒加入水中,分散均匀,得到分散液,然后加入步骤(4)所述DBCO-PEG4-CD47溶液和步骤(5)所述DBCO-PEG4-CRT溶液,搅拌处理,得到混合液,离心取沉淀,洗涤,得到所述双功能纳米颗粒。


2.根据权利要求1所述的双功能纳米颗粒的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述无水乙醇与水的体积比为83:15-20;所述氨水的质量百分比浓度为25wt%-30wt%,所述氨水与水的体积比为5.6:1.5-2;所述正硅酸乙酯与水的体积比为5:1.5-2;所述油浴加热处理的温度为40℃,油浴加热处理的时间为10-24小时。


3.根据权利要求1所述的双功能纳米颗粒的制备方法,其特征在于,步骤(2)所述无水甲苯与二氧化硅纳米颗粒的体积质量比为40-60mL:1g;所述硅烷偶联剂为3-氯丙基三甲氧基硅烷或3-溴丙基三甲氧基硅烷;所述硅烷偶联剂与二氧化硅纳米颗粒的体积质量比为1.3-1.6mL:1g。

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【专利技术属性】
技术研发人员:杜金志张亚茹罗佳琪缪玮珉黄华巫佳思张京扬李佳贤黄永聪舒娜
申请(专利权)人:华南理工大学
类型:发明
国别省市:广东;44

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