含有抗GLOBO H抗体的抗体药物偶联物及其用途制造技术

本发明专利技术提供包括抗Globo H抗体或其结合片段及治疗剂或标记的免疫偶联物，其具有式：Ab‑(L‑D)

Antibody drug conjugate containing anti Globo h antibody and its application

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】含有抗GLOBOH抗体的抗体药物偶联物及其用途
本专利技术涉及含有GloboH抗体的抗体-药物偶联物及其治疗用途。
技术介绍
抗体-药物偶联物(Antibody-drugconjugate，ADC)能够提供用于治疗诸如癌症的各种疾病或病况的靶向疗法。ADC是包含抗体的复合分子，该抗体连接至诸如细胞毒剂或药物的生物活性剂。借由组合抗体的独特靶向与药物的治疗作用，抗体-药物偶联物能够区分正常细胞与癌细胞，从而减少副作用。ADC通常包含与抗体偶联的抗癌药物(例如，细胞毒素)，该抗体特异性靶向标志物(例如肿瘤标志物)。抗体在体内会追踪这些蛋白质且将自己结合于癌细胞表面。该抗体与该目标蛋白质(抗原)之间的结合会在肿瘤细胞中触发信号，之后肿瘤细胞将ADC内化。ADC内化之后，细胞毒性药物会被释放出来并杀死癌细胞。因为该药物具有特异性靶向，所以具有较低的副作用。GloboH是一种六糖，属于许多与肿瘤相关的碳水化合物抗原，其可以在包括以下的各种上皮癌细胞表面上过度表达：乳腺癌细胞、结肠癌细胞、卵巢癌细胞、胰腺癌细胞、肺癌细胞及前列腺癌细胞。因此，GloboH是有前景的诊断/治疗靶点。虽然针对GloboH的抗体是有用的，但仍然需要改进使用抗GloboH抗体的治疗剂。
技术实现思路
本专利技术是关于含有GloboH抗体的抗体-药物偶联物及其在疗法中的用途。本专利技术一个方面涉及免疫偶联物。根据本专利技术一个实施方式的免疫偶联物包括抗GloboH抗体或其结合片段及治疗剂或标记，该偶联物具有式：Ab-(L-D)m，其中Ab是抗GloboH抗体或其结合片段，L是连接子或直接键，D是治疗剂或标记，且m是1至8的整数。根据本专利技术的任何实施方式，Ab包含重链可变域和轻链可变域，重链可变域具有由HCDR1(GYISSDQILN，SEQIDNO:1)、HCDR2(RIYPVTGVTQYXHKFVG，SEQIDNO:2，其中X是任何氨基酸)及HCDR3(GETFDS，SEQIDNO:3)组成的三个互补区，轻链可变域具有由LCDR1(KSNQNLLX'SGNRRYZLV，SEQIDNO:4，其中X'是F、Y或W，且Z是C、G、S或T)、LCDR2(WASDRSF，SEQIDNO:5)及LCDR3(QQHLDIPYT，SEQIDNO:6)组成的三个互补区。连接子L可为直接键，其中有效载荷(payload)D与抗体或其结合片段直接连接(共轭)。连接子可为蛋白质修饰或偶联中常用的任何连接子，诸如短肽(例如，gly-gly-gly)、短有机分子连接子(例如，SMCC，琥珀酰亚胺基-4(N-顺丁烯二酰亚胺基甲基)环己烷-1-甲酸酯)或类似连接子。有效载荷D可为治疗剂，诸如细胞毒剂。可用于本专利技术的实施方式的细胞毒剂的实例可包括类美登素(maytansinoid)(例如，DM1或DM4)、单甲基奥瑞他汀E(monomethylauristatinE，MMAE)、单甲基奥瑞他汀F(monomethylauristatinF，MMAF)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)或类似物。有效载荷D可为用于诊断或成像的标记或试剂。成像剂的实例可包括二伸乙三胺五乙酸(Diethylenetriaminepentaaceticacid，DTPA)或1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraaceticacid，DOTA)。根据本专利技术一些实施方式，该抗体可为单克隆抗体，其可为人源化抗体。本专利技术一个方面是诊断或成像可表达GloboH的细胞或组织的方法。根据本专利技术一个实施方式的方法包含向个体给予上述免疫偶联物。本专利技术一个方面是治疗癌症的方法。根据本专利技术一个实施方式的方法包含向需要癌症治疗的个体给予医学上有效量的上述免疫偶联物。该癌症是上皮细胞癌，诸如乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、胰腺癌、肺癌或前列腺癌。本领域技术人员应了解，医学上有效量视诸多因素而定，诸如患者病症、年龄、疾病状态、给药途径等，且此有效量可基于常规实践的这些因素即可判定，无需过多的实验。本专利技术的其他方式随以下说明将变得显而易见。附图说明图1显示根据本专利技术一个实施方式的ADC(DCB16001)的SDS-PGAE凝胶分析。结果显示，ADC在非还原条件及还原条件下保留适当抗体结构，亦即适当分子量。图2显示HPLC曲线，指示GloboH抗体与SMCC-DM1之间的结合反应基本上是完全的且仅保留了残留量的GloboH抗体及SMCC-DM1。图3说明本专利技术ADC(DCB16001)的MS分析的一个实施例，其指示各种数目的药物与抗体连接的分布，其中最丰富种类是具有1至8个药物与抗体连接。此样品中平均药物:抗体比(drug-to-antibodyratio，DAR)是4.07。图4A及图4B显示ADC内化的荧光成像结果。结果指示，本专利技术的ADC可被表达GloboH的细胞(例如，MCF-7(图4B)及HCC-1428细胞(图4A))内化。图5显示说明MesoScaleDiscovery(MSD)电化学发光测定法的示意图，所述方法用于测量总的和偶联的抗GloboH抗体以进行DCBD16001的体内药代动力学研究。图6显示DCBD16001的体内药代动力学研究结果。图7显示在癌症异种移植模型中使用本专利技术ADC的治疗方案。图8显示HCC-1428异种移植模型中的肿瘤生长抑制。图9显示小鼠在图8的实验中的处理期间的体重变化。具体实施方式本专利技术的实施方式关于含有GloboH抗体的抗体-药物偶联物及其治疗用途。GloboH是一种六糖，属于许多与肿瘤相关的碳水化合物抗原，其可以在包括以下的各种上皮癌细胞表面上过度表达：乳腺癌细胞、结肠癌细胞、卵巢癌细胞、胰腺癌细胞、肺癌细胞及前列腺癌细胞。因此，以针对GloboH的抗体为基础的ADC是有用的诊断及/或治疗剂。然而，治疗性抗体的快速内化或缺乏ADCC活性可能导致抗体无效以及产生抗性。因此，需要增强基于抗GloboH的治疗剂的治疗功效。一种方法是使有效载荷与抗GloboH抗体偶联(亦即，抗体-药物偶联物)。通过抗GloboH抗体与有效载荷偶联(亦即ADC)，本专利技术的实施方案比未偶联抗GloboH抗体更有效，从而能使用较少抗体。根据本专利技术的实施方案，GloboH抗体或其结合片段可与药物、诊断剂或治疗剂偶联。因此，如本文所用的术语“抗体-药物偶联物”(ADC)可以指抗体部分(其可为全抗体或其结合片段)与有效载荷(其可为药物、诊断剂或治疗剂)偶联。本专利技术ADC含有经设计用于治疗或诊断用途的有效载荷。相比于未偶联GloboH抗体，这些ADC具有较佳生物活性且仅需较小的量即可达成所期望的作用。本专利技术的实施方式将借由以下特定实施例来说明。本领域技术人员应了解，这些实施例仅用于说明且其他修改及变化在不脱离本本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种与Globo H特异性结合的免疫偶联物，包含：/n抗Globo H抗体或其结合片段，及/n治疗剂或标记，/n其中所述免疫偶联物具有式：Ab-(L-D)

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170615 US 62/520,4841.一种与GloboH特异性结合的免疫偶联物，包含：
抗GloboH抗体或其结合片段，及
治疗剂或标记，
其中所述免疫偶联物具有式：Ab-(L-D)m，
其中Ab是所述抗GloboH抗体或其结合片段，L是连接子或直接键，D是所述治疗剂或所述标记，且m是1至8的整数。


2.如权利要求1所述的免疫偶联物，其特征在于，所述抗体是单克隆抗体。


3.如权利要求1所述的免疫偶联物，其特征在于，所述抗体是人源化抗体。


4.如权利要求1所述的免疫偶联物，其特征在于，所述治疗剂是细胞毒剂。


5.如权利要求4所述的免疫偶联物，其特征在于，所述细胞毒剂是类美登素1(DM1)、类美登素4(DM4)、单甲基奥瑞他汀E(MMAE)、单甲基奥瑞他汀F(MMAF)或太平洋紫杉醇。


6.如权利要求1所述的免疫偶联物，其特征在于，D是诊断或成像试剂。


7.如权利要求1至6中任一项所述的免疫偶联物，其特征在于，所述抗体包含重链可变域和轻链可变域，所述重链可变域具有由HCDR1(GYISSDQILN，SEQIDNO:1)、HCDR2(RIYPVTGVTQYXHKFVG，SEQIDNO:2，其中X是任何氨基酸)及HCDR3(GETFDS，SEQIDNO:3)组成的三个互补区，...

【专利技术属性】
技术研发人员：李照斌，庄士贤，徐铨龙，陈怡仁，聂瑜瑾，魏文胤，吴佳城，
申请(专利权)人：财团法人生物技术开发中心，
类型：发明
国别省市：中国台湾;71