作为ERK1/2抑制剂的6-嘧啶-异吲哚衍生物制造技术

本发明专利技术涉及化合物(2R)‑2‑(6‑{5‑氯‑2‑[(氧杂环己‑4‑基)氨基]嘧啶‑4‑基}‑1‑氧代‑2,3‑二氢‑1H‑异吲哚‑2‑基)‑N‑[(1S)‑1‑(3‑氟‑5‑甲氧苯基)‑2‑羟乙基]丙酰胺，特别是涉及所述化合物新的物理形式、制备所述化合物的方法及用于所述方法的合成中间体、包含所述化合物的新制剂及所述化合物的治疗用途。

6-pyrimidine-isoindole derivatives as ERK1 / 2 inhibitors

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】作为ERK1/2抑制剂的6-嘧啶-异吲哚衍生物本专利技术涉及化合物(2R)-2-(6-{5-氯-2-[(氧杂环己-4-基)氨基]嘧啶-4-基}-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)-N-[(1S)-1-(3-氟-5-甲氧苯基)-2-羟乙基]丙酰胺，特别是涉及所述化合物新的物理形式、制备所述化合物的方法及用于所述方法的合成中间体、包含所述化合物的新制剂及所述化合物的治疗用途。
技术介绍
MAPK信号传导和ERK1/2的作用细胞外信号调节激酶(ERK1/2)是广泛表达的蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶，包含丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的关键组分。MAPK通路是进化保守的细胞信号通路，调节各种细胞过程，包括细胞周期进程、细胞迁移、细胞生存、分化、代谢、增殖和转录。ERK/MAPK信号通路对细胞表面受体酪氨酸激酶(RTK)的细胞外刺激做出响应。激活RTK时，RASGTP酶(K-RAS、N-RAS和H-RAS)从未活化GDP-结合状态转化为活化的GTP-结合状态。活化的RAS磷酸化，从而激活RAF(A-RAF、B-RAF和C-RAF)，它们转而又磷酸化，激活双特异性激酶MEK(MEK1/2)。然后，活化的MEK磷酸化，并激活ERK1/2。激活后，ERK1/2激活多种核底物(substrate)和细胞质底物。目前有＞200种已知的ERK1/2底物，包括转录因子、激酶、磷酸酶和细胞骨架蛋白(Roskoski,Pharmacol.Res.2012；66:105-143)。人们已经鉴定了多种ERK同工酶(ERK1、ERK2、ERK3/4、ERK5、ERK7)，但研究最广泛的两种同工酶是ERK1和ERK2：参见R.Roberts,J.Exp.Pharm.,Theextracellularsignal-regulatedkinase(ERK)pathway:apotentialtherapeutictargetinhypertension,2012:4,77-83,andCargnelloetal.,Microbiol.&Mol.Biol.Rev.,ActivationandFunctionoftheMAPKsandTheirSubstrates,theMAPK-ActiviatedProteinKinases2011,50-83。癌症中ERK1/2信号传导的上调由于MAPK通路上游组分中发生活化突变，ERK1/2的活性在癌症中通常上调。大约30％的人类癌症包含活化RAS突变(RobertsandDer,Oncogene.2007；26:3291-3310)。K-RAS是最常见的突变亚型，在22％的肿瘤中突变。KRAS突变在胰腺癌(70-90％)、非小细胞癌(10-20％)和结肠直肠癌(25-35％)中尤其普遍(Neuzilletetal.,2014.Pharmacol.Ther.141；160-171)。分别在8％和3％的癌症中出现N-RAS突变和H-RAS突变(Prioretal.,CancerRes.2012；72(10)；2457-2467)。值得指出的是，据报道，15-20％的黑色素瘤病例存在活化N-RAS突变。此外，所有肿瘤中有8％出现活化B-RAF突变，这种突变在黑色素瘤(50-60％)、乳头状甲状腺癌(40-60％)、结肠直肠癌(5-10％)和非小细胞肺癌(3-5％)中尤其普遍存在(Neuzilletetal.,2014.Pharmacol.Ther.141；160-171)。除出现活化RAS突变和RAF突变外，MAPK信号通路还通过上游RTKS的过表达或突变激活而在癌症中上调，所述上游RTKS如EGFR(Lynchetal.,NEnglJMed.2004；350:2129-2139)、HER2(Stephensetal.,Nature.2004；431:525-526)和FGFR(Ahmedetal,Biochim.Biophys.ActaMol.Cell.Res.2012；1823:850-860)。异常的ERK1/2信号传导促进癌症进程的机理有多种。激活时，ERK1/2磷酸化，并激活参与促进细胞增殖和分化的范围广泛的转录因子，如c-Fos(Murphyetal.,Nat.CellBiol.2002:4(8):556-64)和ELK-1(Gilleetal.,EMBOJ.1995；14(5):951-62)。此外，众所周知的是，ERK1/2信号传导通过多种机理促进细胞周期进程，包括诱导D型细胞周期蛋白和抑制周期蛋白依赖性激酶抑制剂p27KIP1(Kawadaetal.,Oncogene.1997；15:629-637,Lavoieetal.,J.Biol.Chem.1996；271:20608-20616)。此外，ERK1/2信号传导可以通过调节一系列凋亡蛋白而促进细胞生存。此类机理的实例包括ERK1/2依赖性抑制促凋亡BCL-2家族蛋白质BIM1和BAD(Sheetal.,J.BiolChem.2002；277:24039-24048.Leyetal.,J.Biol.Chem.2003；278:18811-18816)及ERK1/2依赖性稳定抗凋亡蛋白质，如MCL-1(Dominaetal.,Oncogene.2004；23:5301-5315)。ERK1/2在MAPK抑制剂抗性中的作用广泛的临床前研究表明，抑制MAPK通路会抑制包含B-Raf或Ras突变的癌细胞系的生长(Friday&Adjei,Clin.CancerRes.2008；14:342-346)。RAF抑制剂威罗菲尼(vemurafenib)和达拉菲尼(dabrafenib)，以及MEK抑制剂曲美替尼(trametinib)都在临床上被批准用于治疗BRAF突变黑色素瘤。这些制剂在大多数患者中引发深远(profound)的抗肿瘤响应，尽管由于获得性耐药性的发生，响应持续时间短(Chapmanetal.,N.Engl.J.Med.2011；3642507-2516.Hauschildetal.,Lancet.2012；380:358-365.SolitandRosen,NEnglJMed.2011；364(8):772-774.Flahertyetal.,N.Engl.J.Med.2012；367:1694-1703)。人们鉴定了多种获得性B-RAF抑制剂抗性的机理。这些机理包括替代的MEK激活剂如C-RAF或COT1的上调或激活(Villanuevaetal.,CancerCell.2010；18:683-95.Johannessenetal.,Nature.2010；468:968-72)、RTK或NRAS信号传导上调(Nazarianetal.,Nature.2010；468:973-7)及发生MEK活化突变(Wagleetal.,JClinOncol.2011；29:3085-96)。MEK抑制剂抗性机理包括出现MEK突变，所述MEK突变减少药物结合或增强固有(intrinsic)MEK活性(Emeryetal.,Pro本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.(2R)-2-(6-{5-氯-2-[(氧杂环己-4-基)氨基]嘧啶-4-基}-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)-N-[(1S)-1-(3-氟-5-甲氧苯基)-2-羟乙基]丙酰胺，其具有式(1)：/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170420 GB 1706327.21.(2R)-2-(6-{5-氯-2-[(氧杂环己-4-基)氨基]嘧啶-4-基}-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)-N-[(1S)-1-(3-氟-5-甲氧苯基)-2-羟乙基]丙酰胺，其具有式(1)：



或其互变异构形式，基本上呈结晶形式。


2.根据权利要求1所述的(2R)-2-(6-{5-氯-2-[(氧杂环己-4-基)氨基]嘧啶-4-基}-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)-N-[(1S)-1-(3-氟-5-甲氧苯基)-2-羟乙基]丙酰胺，其至少55％是结晶，或至少60％是结晶，或至少70％是结晶，或至少80％是结晶，或至少90％是结晶，或至少95％是结晶，或至少98％是结晶，或至少99％是结晶，或至少99.5％是结晶，或至少99.9％是结晶。


3.一种基本上呈结晶形式的(2R)-2-(6-{5-氯-2-[(氧杂环己-4-基)氨基]嘧啶-4-基}-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)-N-[(1S)-1-(3-氟-5-甲氧苯基)-2-羟乙基]丙酰胺，其X射线粉末衍射花样的特征在于，在衍射角为14.0°与/或20.6°与/或24.0°与/或24.2°(±0.2°)处出现主峰。


4.一种基本上呈结晶形式的(2R)-2-(6-{5-氯-2-[(氧杂环己-4-基)氨基]嘧啶-4-基}-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)-N-[(1S)-1-(3-氟-5-甲氧苯基)-2-羟乙基]丙酰胺，其X射线粉末衍射花样的特征在于，主峰衍射角和晶面间距如表A所示：





5.根据权利要求4所述的基本上呈结晶形式的(2R)-2-(6-{5-氯-2-[(氧杂环己-4-基)氨基]嘧啶-4-基}-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)-N-[(1S)-1-(3-氟-5-甲氧苯基)-2-羟乙基]丙酰胺，其中所述X射线粉末衍射花样进一步的特征在于，在表B给出的衍射角处存在一个或多个其它峰，以及表B给出的晶面间距：





6.一种基本上呈结晶形式的(2R)-2-(6-{5-氯-2-[(氧杂环己-4-基)氨基]嘧啶-4-基}-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)-N-[(1S)-1-(3-氟-5-甲氧苯基)-2-羟乙基]丙酰胺，其在与图2所示X射线粉末衍射花样中的衍射角基本相同的衍射角处出现峰。


7.一种基本上呈结晶形式的(2R)-2-(6-{5-氯-2-[(氧杂环己-4-基)氨基]嘧啶-4-基}-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)-N-[(1S)-1-(3-氟-5-甲氧苯基)-2-羟乙基]丙酰胺，其X射线粉末衍射花样基本上如图2所示。


8.一种基本上呈结晶形式的(2R)-2-(6-{5-氯-2-[(氧杂环己-4-基)氨基]嘧啶-4-基}-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)-N-[(1S)-1-(3-氟-5-甲氧苯基)-2-羟乙基]丙酰胺，其采用差示扫描量热分析时出现吸热现象，起始温度为100℃至110℃(更特别是101℃至108℃)。


9.一种基本上呈结晶形式的(2R)-2-(6-{5-氯-2-[(氧杂环己-4-基)氨基]嘧啶-4-基}-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)-N-[(1S)-1-(3-氟-5-甲氧苯基)-2-羟乙基]丙酰胺，其采用差示扫描量热分析时出现吸热现象，在温度为110℃至125℃(更特别是111℃至113℃)之间具有一峰。


10.一种基本上呈结晶形式的(2R)-2-(6-{5-氯-2-[(氧杂环己-4-基)氨基]嘧啶-4-基}-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)-N-[(1S)-1-(3-氟-5-甲氧苯基)-2-羟乙基]丙酰胺，其采用热重分析时在85℃至130℃(例如90℃-120℃)出现失重。


11.一种制备基本上呈结晶形式的(2R)-2-(6-{5-氯-2-[(氧杂环己-4-基)氨基]嘧啶-4-基}-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)-N-[(1S)-1-(3-氟-5-甲氧苯基)-2-羟乙基]丙酰胺的方法，所述方法包括：
(i)形成(2R)-2-(6-{5-氯-2-[(氧杂环己-4-基)氨基]嘧啶-4-基}-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·里德，N·E·威尔舍，M·H·桑德斯，P·A·巴古利，C·T·林德利，R·C·梅林，B·E·亚当奇克，M·斯卡拉蒂，
申请(专利权)人：大冢制药株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP