PNN抑制剂在制备逆转转移性肾癌细胞对舒尼替尼耐药性药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种PNN抑制剂在制备逆转转移性肾癌细胞对舒尼替尼耐药性药物中的应用；通过采用PNN抑制剂减低PNN基因的拷贝数进而逆转肿瘤细胞对sunitinib耐药的一种生物治疗策略，从而为揭示靶向治疗更加有效地对抗sunitinib耐药提供科学依据。本发明专利技术首次发现PNN在促进ccRCC细胞转移的过程中发挥了重要作用；其次在体外细胞培养条件下，对ccRCC细胞采用逐步增加剂量法诱导构建耐药细胞株；通过不同浓度的sunitinib处理耐药细胞和亲本细胞，观察二者对药物的耐受性；再用PNN抑制剂处理后、耐药细胞的转移能力显著性被抑制。

Application of PNN inhibitor in the preparation of sunitinib resistant drugs for reversing metastatic renal cancer cells

The invention discloses the application of PNN inhibitor in the preparation of sunitinib resistant drugs for reversing metastatic renal cancer cells; a biotherapy strategy for reversing the resistance of tumor cells to sunitinib by reducing the copy number of PNN gene with PNN inhibitor, so as to provide scientific basis for revealing targeted therapy to more effectively resist sunitinib resistance. The invention first finds that PNN plays an important role in promoting the transfer of ccrcc cells; secondly, under the condition of cell culture in vitro, ccrcc cells are induced to construct drug-resistant cell lines by gradually increasing the dose; the drug-resistant cells and parent cells are treated with different concentrations of sunitinib to observe their drug tolerance; after PNN inhibitor treatment, the transfer of drug-resistant cells is observed The ability was significantly inhibited.

【技术实现步骤摘要】
PNN抑制剂在制备逆转转移性肾癌细胞对舒尼替尼耐药性药物中的应用
本专利技术涉及PNN(桥粒相关蛋白，pinin)高表达诱发转移性肾癌细胞对舒尼替尼(sunitinib)耐药，PNN抑制剂通过降低细胞中PI3K/AKT活性和PNN基因的拷贝数进而逆转转移性肾癌细胞对耐药性的方法，为揭示新的治疗靶点、有效对抗sunitinib耐药提供科学的借鉴和途径，属于肿瘤生物治疗

技术介绍
手术和化疗是肾透明细胞癌(clearcellrenalcellcarcinoma，ccRCC)的主要治疗手段。对于I-III期的ccRCC患者，虽然手术是其首选的治疗方案，但手术切除后肿瘤的复发比例较高，总体治疗效果并不理想。而对于m-ccRCC(metastaticccRCC，m-ccRCC)患者，5年生存率更是极低。对于中晚期的ccRCC患者，在2000年以前，化疗通常作为一线推荐的治疗方案。但是，随着对肿瘤发生发展和转移机制的认识深入，针对肿瘤相关基因的分子靶向药物逐渐成为目前研究的热点。从2005年底开始，六个靶向治疗药物被美国FDA批准本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种PNN抑制剂在制备逆转转移性肾癌细胞对舒尼替尼耐药性药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.一种PNN抑制剂在制备逆转转移性肾癌细胞对舒尼替尼耐药性药物中的应用。


2.根据权利要求1所述的PNN抑制剂在制备逆转转移性肾癌细胞对舒尼替尼耐药性药物中的应用，其特征在于：所述的PNN抑制剂为干扰PNN的慢病毒载体。


3.根据权利要求2所述的PNN抑制剂在制备逆转转移性肾癌细胞对舒尼替尼耐药性药物中的应用，其特征在于：所述的干扰PNN的慢病毒载体为pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro。


4.根据权利要求2所述的PPNN抑制剂在制备逆转转移性肾癌细胞对舒尼替尼耐药性药物中的应用，其特征在于：采用PNN抑制剂减低基PNN因的拷贝数进而逆转肿瘤细胞对sunitinib的耐药。


5.根据权利要求1所述的PNN抑制剂在制备逆转转移性肾癌细胞对舒尼替尼耐药性药物中的应用，其特征在于：具体包括：
(1)分析ccRCC病人组织中PNN的表达，分析其与转移、病理分级和病人愈后之间的关系；对从医院收集的ccRCC组织和癌旁组织样本，进行采用免疫组化、qRT-PCR和Westernblot方法检测乳腺癌组织和癌旁组织中PNN的表达水平；统计分析PNN的表达量与临床病理资料的关系；
(2)研究ccRCC细胞中PNN的表达，及其对细胞迁移和侵袭的影响；
(3)体内研究PNN表达对ccRCC细胞转移的影响；
(4)研究PNN表达与sunitinib耐药的关系；
(5)研究耐药对ccRCC细胞转移的影响；
(6)研究PNN表达与ccRCC对舒尼替尼耐药之间的关系；
(7)研究PNN促进ccRCC对sunitinib耐药的分子机制；
(8)分析临床舒尼替尼治疗病人耐药的潜在因素，以及和PNN表达的关系。


6.根据权利要求5所述的PNN抑制剂在制备逆转转移性肾癌细胞对舒尼替尼耐药性药物中的应用，其特征在于：所述的(2)研究ccRCC细胞中PNN的表达，及其对细胞迁移和侵袭的影响，具体为：对培养人RCC细胞系和上皮细胞HK-2，用慢病毒系统构建了稳定低表达PNN的细胞株，划痕和transwell实验研究PNN低表达与ccRCC细胞转移和侵袭的影响。...

【专利技术属性】
技术研发人员：王萍，马琪，孟祥宇，刘开泰，
申请(专利权)人：宁波大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33