一种化合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种化合物、其制备方法、应用以及抗炎药物。该化合物具有式I或式Ⅱ所示结构。该化合物对正常A7r5细胞生长无影响，但对LPS刺激A7r5细胞产生NO有明显的抑制作用，具有良好的抗炎作用。

A compound and its preparation method and Application

【技术实现步骤摘要】
一种化合物及其制备方法和应用
本专利技术总地涉及医药
，特别涉及一种植物源化合物、其制备方法、应用以及抗炎药物。
技术介绍
独活为伞形科(Umbelliferae)当归属(AngelicaL.)植物重齿毛当归(AngelicapubescensMaxim.f.biserrataShanetYuan)的干燥根。主产于四川、湖北、安徽等地。性味辛、苦，微温。归肾、膀胱经。具有祛风除湿、通痹止痛之功效，主要用于治疗风寒湿痹，腰膝疼痛，少阴伏风头痛，风寒挟湿头痛等症。现代药理研究表明，独活有抗肿瘤、抗炎、镇痛、镇静、抑制血小板聚集和降压等多种活性。迄今，从独活根及根茎分出的主要为香豆素类和挥发油成分，还有少量甾醇和糖类成分。其中，独活挥发油具有明显的抗炎和镇痛作用，香豆素类化合物是植物次生代谢产物，具有消炎、抗菌、抗氧化、抗肿瘤、抑制血小板聚集和血栓形成等生物活性，该类化合物在医药、农业等领域有广泛应用。以独活为主要原料的中成药种类多样，有独活止痛搽剂、独活寄生合剂、独活寄生丸、复方独活吲哚美辛胶囊等。同时，独活在保健领域的应用历史悠久，《神农本草经》上就有关于独活“久服，轻身、耐老”的记载，近年来已进入家畜保健领域。独活乙醇提取物对柑桔青霉、绿霉、炭疽、酸腐病菌的抑制活性也较好，在植保领域也出现应用，以独活为原料的植物源农药发展前景也十分广阔。鉴于独活多样的生物活性和广阔的市场前景，有必要对其化学成分进行进一步的研究，以探究其发挥药效的物质基础，为开发和利用独活资源提供参考依据。现代医学研究表明，血管平滑肌是血管壁的重要组成部分，对于维持血管结构和功能起着很重要的作用。动脉粥样硬化、高血压等许多疾病的发生发展过程都与动脉平滑肌的异常增殖有关，其发展过程中有大量炎症因子参与。诱发炎症的因素有很多，如烧伤、化学刺激、物理损伤以及毒素等。其中，脂多糖(LPS)是细菌感染性炎症反应中最主要的促炎因子，可诱导炎症细胞合成并释放多种炎症因子，导致机体出现一系列病理生理反应。LPS诱导的血管平滑肌细胞异常增殖和功能紊乱在血管病变过程中起重要作用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于从中药独活中分离制备出一种具有抗炎活性的化合物，并提供了其在制备抗炎药物中的应用。本专利技术提供了一种倍半萜类化合物，具有式I或式Ⅱ所示结构，本专利技术还提供了一种前述化合物的制备方法，其包括如下步骤：步骤1：将独活药材加乙醇提取，提取液浓缩得到浸膏；步骤2：将浸膏加水悬浮，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯萃取部位浓缩，得到乙酸乙酯浸膏；步骤3：将乙酸乙酯浸膏进行柱色谱分离，以二氯甲烷-丙酮混合溶剂进行梯度洗脱，所述梯度洗脱的二氯甲烷-丙酮体积比为20:1～0:1，收集二氯甲烷-丙酮体积比为5:1的部位；步骤4：将步骤3得到的部位进行凝胶柱色谱纯化，以甲醇洗脱，收集洗脱液；步骤5：将步骤4得到的洗脱液进行色谱分离纯化，以12％～40％的有机溶剂水溶液进行洗脱，收集洗脱液，获得上述式I和式Ⅱ所示化合物。优选地，所述步骤1中所述乙醇体积分数为65％-80％。优选地，所述独活药材与所述乙醇的重量比为1:(8～15)。优选地，所述步骤4中，凝胶柱色谱中所用凝胶为SephadexLH-20、SephadexG15或SephadexG50。优选地，所述步骤5中，所述色谱分离纯化为高效液相色谱、中低压制备色谱或动态轴向压缩柱色谱分离。或优选地，所述步骤5中，所述洗脱用有机溶剂为甲醇、乙醇或乙腈。本专利技术还提供了上述化合物在制备抗炎药物中的应用。本专利技术还提供了一种抗炎药物，其包括上述化合物。优选地，所述抗炎药物为用各种药学上可接受的辅料制备的口服给药剂型、注射给药剂型、外用给药制剂。式I和式Ⅱ所示结构的化合物均对正常A7r5细胞生长无影响，但对LPS刺激A7r5细胞产生NO有明显的抑制作用，具有良好的抗炎作用。附图说明图1为本专利技术制备例4制备的化合物2的ESI-MS图；图2为本专利技术制备例4制备的化合物2的1H-NMR图；图3为本专利技术制备例4制备的化合物2的13C-NMR图；图4为本专利技术制备例4制备的化合物2的DEPT图；图5为本专利技术制备例4制备的化合物2的1H-1HCOSY图；图6为本专利技术制备例4制备的化合物2的HMBC图；图7为本专利技术制备例4制备的化合物2的HSQC图；图8为本专利技术制备例4制备的化合物2的NOESY图；图9为本专利技术制备例4制备的化合物1的1H-NMR图；图10为本专利技术制备例4制备的化合物1的13C-NMR图；图11为本专利技术制备例4制备的化合物1的HSQC图；图12为本专利技术制备例4制备的化合物1的HMBC图；图13为本专利技术制备例4制备的化合物1的1H-1HCOSY图；图14为本专利技术倍半萜类化合物的结构图。具体实施方式以下结合附图和实施例，对本专利技术的具体实施方式进行更加详细的说明，以便能够更好地理解本专利技术的方案以及其各个方面的优点。然而，以下描述的具体实施方式和实施例仅是说明的目的，而不是对本专利技术的限制。特别需要指出的是，针对本专利技术所做出的类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。其次，需要注意的是，本专利技术所涉及的未注明的浓度均为体积百分含量(v/v)。其它除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例或份数按重量计。另，本专利技术如未注明具体条件者，均按照常规条件或制造商建议的条件进行，所用原料药或辅料，以及所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本专利技术。药材与试剂除液相色谱用甲醇和乙腈为色谱纯外，其余试剂均为分析纯。独活药材为伞形科(Umbelliferae)当归属(AngelicaL.)植物重齿毛当归(AngelicapubescensMaxim.f.biserrataShanetYuan)的干燥根，该药材购于安徽亳州。制备例1独活药材10kg，粉碎后加入10倍量的75％乙醇回流提取2次，每次2h，滤过，滤液回收乙醇并浓缩得到浸膏。此浸膏加水悬浮，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯萃取部位减压回收乙酸乙酯并浓缩，得到乙酸乙酯浸膏。乙酸乙酯浸膏利用硅胶柱层析，以二氯甲烷-丙酮(20:1、10:1、5:1、3:1、1:1、0:1)梯度洗脱，每500ml接收一个流份，收集二氯甲烷-丙酮(5:1)的组分，经减压浓缩后，再进行SephadexLH-20凝胶柱纯化，甲醇洗脱，每5ml收集一个流份，减压浓缩后，经高效液相色谱分离，采用C18柱(21.2×250mm，5μm)，检测波长230nm，流速15mL/min，以30％的乙腈水溶液进行洗脱，得到化合物14.5mg和化合物24.8mg。制备例2独活药材5kg，粉碎后加入12倍量的75％乙醇回流提取2次，每次2h，滤过，滤液回收乙醇并浓缩得到浸膏。此浸膏加水悬浮，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯萃取部位减压回收乙酸乙酯并浓缩，得到乙酸乙酯浸膏。乙酸乙酯浸膏利用硅胶柱层析，以二氯甲烷-丙酮(20:本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种倍半萜类化合物，具有式I或式Ⅱ所示结构，

【技术特征摘要】
1.一种倍半萜类化合物，具有式I或式Ⅱ所示结构，2.一种权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：将独活药材加乙醇提取，提取液浓缩得到浸膏；步骤2：将浸膏加水悬浮，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯萃取部位浓缩，得到乙酸乙酯浸膏；步骤3：将乙酸乙酯浸膏进行柱色谱分离，以二氯甲烷-丙酮混合溶剂进行梯度洗脱，所述梯度洗脱的二氯甲烷-丙酮体积比为20:1～0:1，收集二氯甲烷-丙酮体积比为5:1的部位；步骤4：将步骤3得到的部位进行凝胶柱色谱纯化，以甲醇洗脱，收集洗脱液；步骤5：将步骤4得到的洗脱液进行色谱分离纯化，以12％～40％的有机溶剂水溶液进行洗脱，收集洗脱液，获得式I和式Ⅱ所示化合物；3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1中所述乙醇体积分数为65％-...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖伟，温建辉，李明，王红梅，倪付勇，谢雪，王振中，吴云，王永香，
申请(专利权)人：江苏康缘药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32