一种用树脂吸附与超滤膜纯化结合法提取猪小肠粘膜中的肝素钠的方法技术

一种能够从猪小肠粘膜中提取肝素钠的方法，它先使用树脂将猪小肠粘膜中的肝素钠提取出来，再使用超滤膜对其进一步提纯，经过吸附、洗涤与洗脱、超滤膜纯化、脱水四个步骤从猪小肠粘膜中提取肝素钠。结果此法与传统提取方法相比较，需要乙醇少，成本低，效价和收率都有明显提高。

【技术实现步骤摘要】
一种用树脂吸附与超滤膜纯化结合法提取猪小肠粘膜中的肝素钠的方法
本专利技术属于生物
，属于从猪小肠粘膜中提取肝素钠的方法。
技术介绍
肝素钠是一种生化药品，其从猪小肠粘膜中提取，其在手术中起着不可替代的作用，挽救了无数生命，是医界不能断档药品。自上个世纪四十年代以来，肝素钠被用于临床，应用范围不断扩大。特别自上个世纪九十年开始，在临床中肝素钠被广泛用于：防治血栓栓塞性疾病，辅助治疗尿毒症，心血管病，血液病等大量疾病。进入七十年代以后，肝素钠生产工艺，在我国得到不断改进提高，使我国成为最大的肝素钠产销国家，目前国际市场上70%以上肝素钠产品出产于中国。目前，肝素钠生产厂家主要采用盐解——离子交换——乙醇沉淀法从猪小肠粘膜中提取肝素钠粗品，该方法成本高，收率和效价低。所以，本公司开发了树脂吸附与超滤膜纯化结合法从猪小肠粘膜中提取肝素钠粗品，以降低成本，提高效益。
技术实现思路
本专利技术提供了一种全新的树脂吸附与超滤膜纯化结合法提取猪小肠粘膜中的肝素钠，能够有效地降低成本，并提高肝素钠粗品的收率和效价。为此，本专利技术通过以下技术方案予以实现：1、吸附称取一定质量的猪小肠黏膜，置反应罐中，加1倍质量纯化水稀释，用30％的氢氧化钠溶液调节pH值至9.0～9.5，加热至沸腾，保持10～15分钟，捞去液体上的杂物。缓慢降温至35℃～45℃，用在出水口处系有一100目尼龙布袋的耐高温的塑料软管将液体虹吸至反应池中，调节食盐波美度为3.2～3.5，PH值为8.0，按反应池中液体量加入4％～8％的D204肝素钠专用树脂，保温搅拌吸附8～10小时。2、洗涤与洗脱吸附完毕后，静置30分钟，过滤，收集树脂，并用纯化水将树脂漂洗干净，沥干，加入1.2mol/L氯化钠溶液洗涤2小时，沥干后，加入4mol/L氯化钠溶液1倍量，搅拌洗脱5小时，沥干后再洗脱2次，每次加入4mol/L氯化钠溶液的量减半，洗脱时间分别为2小时和1小时。合并全部洗脱液。3、超滤膜纯化用45nm孔径的管型聚丙烯腈超滤膜过滤上步得到的洗脱液，设定洗脱液的透过速度为60L/h·m²～90L/h·m²，同时加场强为1400V/m～1600V/m的直流电场（方向与溶液流动的方向一致）和频率为60000Hz～70000Hz的超声波场（功率为430瓦），弃掉滤液，所得到的糊状物即为较高纯度的肝素钠。4、脱水：按比例在糊状物中加入3倍95％的乙醇，充分搅拌后，静置12小时以上，虹吸上层乙醇，再真空干燥，得肝素钠粗品。本专利技术的有益效果是：在乙醇沉淀之前，先用聚丙烯腈膜进行超滤纯化。有效地降低了乙醇的使用量，并且提高了效价与收率。四、具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步说明。（一）实施例一：1、吸附称取50.0千克的猪小肠黏膜，置于反应罐中，加纯化水50.0千克，用30％的氢氧化钠溶液调节pH值至9.3，加热至沸腾，保持14分钟，同时捞去液体上的杂物。缓慢降温至43℃，用在出水口处系有一100目尼龙布袋的耐高温的塑料软管将液体虹吸至反应池中，调节氯化钠波美度为3.3，PH值为8.0，按反应池中液体量加入5％的D204肝素钠专用树脂，保温搅拌吸附9小时22分钟。2、洗涤与洗脱吸附完毕后，静置30分钟，过滤，收集树脂，并用纯化水将树脂漂洗干净，沥干，加入1.2mol/L氯化钠溶液洗涤2小时，沥干后，加入4mol/L氯化钠溶液1倍量，搅拌洗脱5小时，沥干后再洗脱2次，每次加入4mol/L氯化钠溶液的量减半，洗脱时间分别为2小时和1小时。合并全部洗脱液。3、超滤膜纯化用45nm孔径的管型聚丙烯腈超滤膜过滤上步得到的洗脱液，设定洗脱液的透过速度为65L/h·m²，同时加场强为1450V/m的直流电场（方向与溶液流动的方向一致）和频率为65000Hz的超声波场（功率为430瓦），弃掉滤液，所得到的糊状物即为较高纯度的肝素钠。4、脱水：按比例在糊状物中加入3倍95％的乙醇，充分搅拌后，静置12小时以上，虹吸上层乙醇，再真空干燥，得肝素钠粗品。5、对照称取50.0千克同一批次的猪小肠粘膜，采用传统工艺提取其中的肝素钠。通过对照发现：传统工艺明显地成本高，效益低。传统方法：投料量：50千克乙醇用量28.33升肝素钠15.96克效价79.32u/mg总效价1265.9ku收率64.88%。本专利技术方法：50千克乙醇用量3.46升肝素钠13.94克效价105.51u/mg总效价1470.8ku收率75.39%。（二）实施例二：1、吸附称取50.0千克的猪小肠黏膜，置于反应罐中，加纯化水50.0千克，用30％的氢氧化钠溶液调节pH值至9.1，加热至沸腾，保持11分钟，同时捞去液体上的杂物。缓慢降温至40℃，用在出水口处系有一100目尼龙布袋的耐高温的塑料软管将液体虹吸至反应池中，调节氯化钠波美度为3.3，PH值为8.0，按反应池中液体量加入7％的D204肝素钠专用树脂，保温搅拌吸附9小时15分钟。2、洗涤与洗脱吸附完毕后，静置30分钟，过滤，收集树脂，并用纯化水将树脂漂洗干净，沥干，加入1.2mol/L氯化钠溶液洗涤2小时，沥干后，加入4mol/L氯化钠溶液1倍量，搅拌洗脱5小时，沥干后再洗脱2次，每次加入4mol/L氯化钠溶液的量减半，洗脱时间分别为2小时和1小时。合并全部洗脱液。3、超滤膜纯化用45nm孔径的管型聚丙烯腈超滤膜过滤上步得到的洗脱液，设定洗脱液的透过速度为87L/h·m²，同时加场强为1590V/m的直流电场（方向与溶液流动的方向一致）和频率为66000Hz的超声波场（功率为430瓦），弃掉滤液，所得到的糊状物即为较高纯度的肝素钠。4、脱水：按比例在糊状物中加入3倍95％的乙醇，充分搅拌后，静置12小时以上，虹吸上层乙醇，再真空干燥，得肝素钠粗品。5、对照称取50.0千克同一批次的猪小肠粘膜，采用传统工艺提取其中的肝素钠。通过对照发现：传统工艺明显地成本高，效益低。传统方法：投料量：50千克乙醇用量28.33升肝素钠15.96克效价79.32u/mg总效价1265.9ku收率64.88%。本专利技术方法：投料量：50千克乙醇用量3.62升肝素钠14.21克效价113.62u/mg总效价1614.5ku收率82.75%。（三）实施例三：1、吸附称取50.0千克的猪小肠黏膜，置于反应罐中，加纯化水50.0千克，用30％的氢氧化钠溶液调节pH值至9.3，加热至沸腾，保持13分钟，同时捞去液体上的杂物。缓慢降温至37℃，用在出水口处系有一100目尼龙布袋的耐高温的塑料软管将液体虹吸至反应池中，调节氯化钠波美度为3.3，PH值为8.0，按反应池中液体量加入6％的D204肝素钠专用树脂，保温搅拌吸附9小时4分钟。2、洗涤与洗脱吸附完毕后，静置30分钟，过滤，收集树脂，并用纯化水将树脂漂洗干净，沥干，加入1.2mol/L氯化钠溶液洗涤2小时，沥干后，加入4mol/L氯化钠溶液1倍量，搅拌洗脱5小时，沥干后再洗脱2次，每次加入4mol/L氯化钠溶液的量减半，洗脱时间分别为2小时和1小时。合并全部洗脱液。3、超滤膜纯化用45nm孔径的管型聚丙烯腈超滤膜过滤上步得到的洗脱液，设定洗脱液的透过速度为71L/h·m²，同时加场强为1540V/m的直流电场（方向与溶液流动的方向一致）和频率为68000本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种新的提取猪小肠粘膜中的肝素钠的方法；其特征在于：先使用树脂将猪小肠粘膜中的肝素钠提取出来，再使用超滤膜对其进一步提纯。

【技术特征摘要】
1.一种新的提取猪小肠粘膜中的肝素钠的方法；其特征在于：先使用树脂将猪小肠粘膜中的肝素钠提取出来，再使用超滤膜对其进一步提纯。2.根据权利要求1所述的方法；其特征在于：（1）吸附：称取一定质量的猪小肠黏膜，置反应罐中，加1倍质量纯化水稀释，用30％的氢氧化钠溶液调节pH值至9.0～9.5，加热至沸腾，保持10～15分钟，同时捞去液体上的杂物；缓慢降温至35℃～45℃，用在出水口处系有一100目尼龙布袋的耐高温的塑料软管将液体虹吸至反应池中，调节食盐波美度为3.2～3.5，PH值为8.0，按反应池中液体量加入4％～8％的D204肝素钠专用树脂，保温搅拌吸附8～10小时；（2）洗涤与洗脱：吸附完毕后，静置30分钟，过滤，收集树脂，并用纯化水将树脂漂洗干净，沥干，加入1.2mol/L氯化钠溶液洗涤2小时，沥干后，加入4mol/L氯化钠溶液1倍量，搅拌洗脱5小时，沥干后再洗脱2次，每次加入4mol/L氯化钠溶液的量减半，洗脱时间分别为2小时和1小时；合并全部洗脱液；（3）超滤膜纯化：用45nm孔径的管型聚丙烯腈超滤膜过滤上...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘乃山，迟培升，姜德志，
申请(专利权)人：青岛九龙生物医药集团有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37