一种降低硫酸软骨素钠中蛋白杂质的方法技术

技术编号:21447517 阅读:51 留言:0更新日期:2019-06-26 02:56
本发明专利技术公开了一种降低硫酸软骨素钠蛋白杂质的方法,通过碱提取,酶水解急升温等操作降低硫酸软骨素钠中蛋白杂质的含量,提高硫酸软骨素钠含量及收率,并且操作简单,降低成本。

【技术实现步骤摘要】
一种降低硫酸软骨素钠中蛋白杂质的方法
本专利技术所属领域为生物制药领域,涉及一种降低硫酸软骨素钠中蛋白杂质的方法。
技术介绍
硫酸软骨素(chondroitinsulfate,简称CS)是一种天然酸性黏多糖,属生物高分子化合物。CS有A、C和D共3种异构体,均是由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-氨基半乳糖组成,只是硫酸基位置不同。CS广泛存在于人和一些动物如猪、牛、羊、鱼等软骨组织中,且通过共价键与核心蛋白相结合。CS具有促进冠状动脉循环、降血脂、抗凝血、抗肿瘤和防止血管硬化等活性,主要是治疗风湿和类风湿疾病的药物,对冠心病、动脉粥样硬化、心肌梗塞等心血管疾病的防治有一定疗效。CS已成为国外流行的保健品添加剂。目前国内生产企业生产的工艺产品蛋白杂质处理不干净,不仅影响产品的质量,而且还对产品的含量造成一定的影响。
技术实现思路
本专利技术提供了一种降低硫酸软骨素钠中蛋白杂质的方法,可以有效减少硫酸软骨素钠中蛋白杂质的量,提高硫酸软骨素钠的含量及收率。本专利技术采用以下技术方案予以实现:一种降低硫酸软骨素钠中蛋白杂质的方法,其特征主要包括以下步骤:1)、处理过的猪鼻骨与1-3mol/L氢氧化钠溶液按照1:5-6的质量比混合,加热搅拌提取,提取温度为40-55℃,提取时间5-6小时,过滤,取滤液;2)、向步骤1)中的滤液加入3-4mol/L盐酸溶液调pH在5.0-6.0之间,按照料液比为100:1-1.5的比例加入胃蛋白酶,在35-40℃下水解2-3小时,并稳定pH在5.0-6.0之间,过滤;3)、向步骤2)中水解完后的滤液中加入1-3mol/L氢氧化钠溶液调节pH在10-11之间,按照料液比为100:1-1.5的比例加入胰蛋白酶,35-40℃下水解2-3小时,迅速升温至50-60℃,不断搅拌,保持10-30分钟,过滤;4)、向步骤3)中的滤液中按照滤液与双氧水的比例为20:1-3的比例加入双氧水氧化,6-7小时后过滤,滤液在不断搅拌下加入95%乙醇至60%-75%之间,静置6-7小时后过滤,沉淀进行干燥。与现有技术相比,本专利技术的优点和积极效果是:本专利技术的核心优势是可以有效降低硫酸软骨素钠中蛋白杂质的含量,提高硫酸软骨素钠的含量及收率,并且降低成本。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步说明。实施例11)、处理过的猪鼻骨1kg与1mol/L氢氧化钠溶液按照6L混合,加热搅拌提取,提取温度为50℃,提取时间5小时,过滤,取滤液约5.1L;2)、向滤液加入3mol/L盐酸溶液调pH在5.5,加入胃蛋白酶20g,在40℃下水解3小时,并稳定pH在5.0-6.0之间,过滤;3)、向水解完后的滤液中加入3mol/L氢氧化钠溶液调节pH在10.1之间,加入胰蛋白酶20g,40℃下水解3小时,迅速升温至60℃,不断搅拌,保持10分钟,过滤;4)、向滤液中加入双氧水氧化200mL,6小时后过滤,滤液在不断搅拌下加入95%乙醇至72%,静置6小时后过滤,沉淀进行干燥。经检测硫酸皮肤素有水含量为82%,蛋白杂质未检出。实施例21)、处理过的猪鼻骨5kg与1mol/L氢氧化钠溶液按照30L混合,加热搅拌提取,提取温度为50℃,提取时间6小时,过滤,取滤液约23.8L;2)、向滤液加入3mol/L盐酸溶液调pH为5.7,加入胃蛋白酶100g,在40℃下水解3小时,并稳定pH在5.0-6.0之间,过滤;3)、向水解完后的滤液中加入3mol/L氢氧化钠溶液调节pH在10.3之间,加入胰蛋白酶100g,40℃下水解3小时,迅速升温至60℃,不断搅拌,保持30分钟,过滤;4)、向滤液中加入双氧水氧化1L,6小时后过滤,滤液在不断搅拌下加入95%乙醇至68%,静置6小时后过滤,沉淀进行干燥。经检测硫酸皮肤素有水含量为78%,蛋白杂质未检出。以上所述,仅是本专利技术的较佳实施例而已,并非是对本专利技术作其它形式的限制,任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的
技术实现思路
加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本专利技术技术方案内容,依据本专利技术的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型,仍属于本专利技术技术方案的保护范围。本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一种降低硫酸软骨素钠中蛋白杂质的方法,其特征主要包括以下步骤:1)、处理过的猪鼻骨与氢氧化钠溶液混合,加热搅拌提取,过滤,取滤液;2)、向步骤1)中的滤液加入盐酸溶液调pH在5.0‑6.0之间,加入胃蛋白酶,在35‑40℃下水解,并稳定pH在5.0‑6.0之间,过滤;3)、向步骤2)中水解完后的滤液中加入氢氧化钠溶液调节pH,加入胰蛋白酶,35‑40℃下水解,迅速升温,不断搅拌,保持10‑30分钟,过滤;4)、向步骤3)中的滤液中加入双氧水氧化,6‑7小时后过滤,滤液在不断搅拌下加入95%乙醇至60%‑75%之间,静置6‑7小时后过滤,沉淀进行干燥。

【技术特征摘要】
1.一种降低硫酸软骨素钠中蛋白杂质的方法,其特征主要包括以下步骤:1)、处理过的猪鼻骨与氢氧化钠溶液混合,加热搅拌提取,过滤,取滤液;2)、向步骤1)中的滤液加入盐酸溶液调pH在5.0-6.0之间,加入胃蛋白酶,在35-40℃下水解,并稳定pH在5.0-6.0之间,过滤;3)、向步骤2)中水解完后的滤液中加入氢氧化钠溶液调节pH,加入胰蛋白酶,35-40℃下水解,迅速升温,不断搅拌,保持10-30分钟,过滤;4)、向步骤3)中的滤液中加入双氧水氧化,6-7小时后过滤,滤液在不断搅拌下加入95%乙醇至60%-75%之间,静置6-7小时后过滤,沉淀进行干燥。2.按照权利要求1所述的方法其特征为,步骤1)中,软骨与氢氧化钠溶液按1:5-6的质量比进行混合,氢氧化钠...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘乃山迟培升尹文杰
申请(专利权)人:青岛九龙生物医药集团有限公司
类型:发明
国别省市:山东,37

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