一种同时检测5个磺胺类耐药基因的多重液相基因芯片引物、试剂盒及其分析方法技术

本发明专利技术公开了一种同时检测5个磺胺类耐药基因的多重液相基因芯片引物、试剂盒及其分析方法，旨在提供一种操作简单，能够同时检测磺胺类耐药基因int1，sul1，sul2，sul3和sul4而且具有灵敏度高，准确率高，可实现同一样本中的多种不同目的分子同时进行检测引物、试剂盒及其分析方法；其技术方案包括引物核苷酸序列如SEQ ID NO：1‑SEQ ID NO：10所示的引物；本发明专利技术属于细菌耐药性检测领域。

A Multiplex Liquid Phase Gene Chip Primer, Kit and Analytical Method for Simultaneous Detection of Five Sulfonamide Resistance Genes

The invention discloses a multiplex liquid phase gene chip primer, a kit and an analysis method for simultaneously detecting five sulfonamide resistance genes, aiming at providing a simple operation, capable of simultaneously detecting sulfonamide resistance genes int1, sul1, sul2, sul3 and sul4 with high sensitivity and accuracy, and capable of simultaneously detecting multiple different target molecules in the same sample. The technical scheme includes primer nucleotide sequence such as SEQ ID NO: 1 SEQ ID NO: 10 as shown in the primer; the invention belongs to the field of bacterial resistance detection.

【技术实现步骤摘要】
一种同时检测5个磺胺类耐药基因的多重液相基因芯片引物、试剂盒及其分析方法
本专利技术属于实验动物的病原检测领域，具体涉及一种同时检测磺胺类耐药基因int1，sul1，sul2，sul3和sul4的多重液相基因芯片分析方法及试剂盒。
技术介绍
沙门氏菌、大肠杆菌等革兰氏阴性菌是重要的致病菌，由于抗生素大规模不合理的使用，使得这些致病菌出现了严重的多重耐药性，导致大部分现有药物无效。由质粒介导的耐药基因可传递给其他动物和人类，在给养殖业造成了严重经济损失的同时，也影响着食品安全和人类健康。Ⅰ类整合子(int1)作为可移动的DNA片段，能够捕获外源耐药基因并将耐药基因水平传播，对细菌的耐药性传播有非常重要的意义。致病菌对磺胺类广泛耐药与磺胺类耐药相关基因sul1、sul2、sul3和sul4基因有关。sul1基因常与其他耐药基因整合到Ⅰ类整合子上，sul2基因常位于非接合性质粒或可移动多重耐药质粒上，sul3和sul4是新近发现的磺胺类耐药相关基因。传统的表型检测采用药敏试验方法及自动化药敏检测方法，该方法以细菌培养为基础，能直观反应病原菌对某种药物敏感或耐药，但药敏结果报告较慢，经验依赖本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种同时检测5个磺胺类耐药基因的多重液相基因芯片引物，所述的5个磺胺类药基因分别为：int1，sul1，sul2，sul3和sul4；其特征在于，int1检测引物对：P1核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，P2核苷酸序列如SEQ ID NO：所示；sul1检测引物对：P3核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，P4核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示；sul2检测引物对：P5核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示，P核苷酸序列如SEQ ID NO：6所示；sul3检测引物对：P7核苷酸序列如SEQ ID NO：7所示；P8核苷酸序列如SEQ ID NO：8所示；sul4检测引物对：P...

【技术特征摘要】
1.一种同时检测5个磺胺类耐药基因的多重液相基因芯片引物，所述的5个磺胺类药基因分别为：int1，sul1，sul2，sul3和sul4；其特征在于，int1检测引物对：P1核苷酸序列如SEQIDNO：1所示，P2核苷酸序列如SEQIDNO：所示；sul1检测引物对：P3核苷酸序列如SEQIDNO：3所示，P4核苷酸序列如SEQIDNO：4所示；sul2检测引物对：P5核苷酸序列如SEQIDNO：5所示，P核苷酸序列如SEQIDNO：6所示；sul3检测引物对：P7核苷酸序列如SEQIDNO：7所示；P8核苷酸序列如SEQIDNO：8所示；sul4检测引物对：P9核苷酸序列如SEQIDNO：9所示；P10核苷酸序列如SEQIDNO：10所示。2.根据权利要求1所述的同时检测5个磺胺类耐药基因的多重液相基因芯片引物，其特征在于，所述引物P1和P2其中一条引物的5’端被生物素化；所述引物P3和P4其中一条引物的5’端被生物素化；所述引物P5和P6其中一条引物的5’端被生物素化；所述引物P7和P8其中一条引物的5’端被生物素化；所述引物P9和P10其中一条引物的5’端被生物素化。3.根据利要求1所述的同时检测5个磺胺类耐药基因的多重液相基因芯片引物，其特征在于，所述引物P1和P2，P3和P4，P5和P6，P7和P8，P9和P10未被生物素化的引物的5’端连接有tag序列，所述tag序列能与荧光编码微球中带有的anti-tag序列互补配对。4.根据权利要求3所述的同时检测5个磺胺类耐药基因的的多重液相基因芯片引物，其特征在于，所述引物P1和P2、P3和P4、P5和P6、P7和P8，P9和P10这...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐凤姣，闵凡贵，王静，黄韧，
申请(专利权)人：广东省实验动物监测所，
类型：发明
国别省市：广东,44