A method and composition for effectively separating short double-stranded nucleic acids on magnetic glass particles are provided.
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于纯化双链核酸的方法和组合物专利技术背景磁性玻璃珠粒方便地用于核酸纯化。最近，已经聚焦于从以微创或非侵入性方式(例如从血液、唾液、尿液等)获得的样品中获得核酸。这些样品中的无细胞核酸(cfNAs)可以包括相对短的多核苷酸，例如，小于100或1000bp，所述多核苷酸不能使用标准结合和洗脱条件用磁性玻璃珠粒有效地回收。此外，使用标准条件获得的双链cfNA（其对于一些分析技术是必需的）不足。专利技术概述本文提供了用于从磁性玻璃珠粒(MGP)自动回收双链核酸的方法和组合物。所述方法包括使用两次或更多次低温洗脱来从MGP洗脱与MGP非共价结合的双链核酸。在一些实施方案中，所述方法包括a)将磁场施加至盛放溶液(例如，包含洗涤缓冲液或具有结合缓冲液的样品)中的与MGP非共价结合的双链核酸的容器，并去除未与MGP结合的液体；b)在低于70℃(例如，25-60℃、25-50℃、30-45℃、32℃、35℃、37℃、40℃、42℃、45℃、50℃、60℃、65℃)的温度下在容器中使与MGP非共价结合的双链核酸与洗脱缓冲液接触；c)将磁场施加至容器；d)收集未与MGP结合的液体，由此...
【技术保护点】
1.用于回收与磁性玻璃珠粒(MGP)非共价结合的双链核酸的自动化方法，其包括：a) 将磁场施加至盛放溶液中的与MGP非共价结合的双链核酸的容器，并去除未与MGP结合的液体；b) 在低于50℃的温度下在所述容器中使与MGP非共价结合的双链核酸与洗脱缓冲液接触；c) 将磁场施加至所述容器；d) 收集未与MGP结合的液体，由此收集洗脱物；e) 在低于50℃的温度下在所述容器中使与MGP非共价结合的双链核酸与洗脱缓冲液接触；f) 将磁场施加至所述容器；和g) 收集未与MGP结合的液体，由此收集洗脱物；其中步骤d)和g)中收集的洗脱物包含从MGP回收的双链核酸。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.09.12 US 62/3933311.用于回收与磁性玻璃珠粒(MGP)非共价结合的双链核酸的自动化方法，其包括：a)将磁场施加至盛放溶液中的与MGP非共价结合的双链核酸的容器，并去除未与MGP结合的液体；b)在低于50℃的温度下在所述容器中使与MGP非共价结合的双链核酸与洗脱缓冲液接触；c)将磁场施加至所述容器；d)收集未与MGP结合的液体，由此收集洗脱物；e)在低于50℃的温度下在所述容器中使与MGP非共价结合的双链核酸与洗脱缓冲液接触；f)将磁场施加至所述容器；和g)收集未与MGP结合的液体，由此收集洗脱物；其中步骤d)和g)中收集的洗脱物包含从MGP回收的双链核酸。2.权利要求1的自动化方法，其中步骤b)和e)中的温度为25℃至47℃。3.权利要求1或2的自动化方法，其中所述双链核酸长度为50-500个碱基对。4.权利要求1-3中任一项的自动化方法，其中所述双链核酸来自选自血液、血浆、血清、羊水、脑脊液和尿液的样品。5.权利要求1-4中任一项的自动化方法，其中步骤a)中的所述溶液...
【专利技术属性】
技术研发人员：P贝拉雷，C霍尔库姆，A卡西拉，T赫里斯，Q阮，K坎帕尼，I科茨洛夫，
申请(专利权)人：豪夫迈·罗氏有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士,CH
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