The invention discloses a carbonyl reductase mut AcCR (G152L/Y189) mutant and its application and coding gene. Carbonyl reductase AcCR can catalyze asymmetric reduction of various latent chiral carbonyl compounds, but its activity and substrate tolerance to aromatic compounds are low. The mutant mut AcCR (G152L/Y189) was obtained by mutagenesis of glycosylation reductase AcCR by enzymatic molecular modification. The specific enzyme activity of the mutant for 2 4 phenylbutyrate ethyl ester can reach 88.9 U/mg. The specific activity of carbonyl reductase before mutation was 61.3 times higher than that before mutation. Substrate tolerance increased from 50 mmol/L to 200 mmol/L. The mutant catalyzed 2 Oxy 4 phenyl ethyl butyrate has absolute selectivity. The enantiomeric excess value of the product increased from 82.9% to > 99%. The carbonyl reductase mutant of the present invention plays an important role in catalyzing the asymmetric reduction of ethyl 2-(oxo-)4-(phenylbutyrate).
【技术实现步骤摘要】
一种羰基还原酶突变体mut-AcCR(G152L/Y189)及其应用与编码基因
本专利技术属于酶分子改造领域,具体涉及一种羰基还原酶突变体mut-AcCR(G152L/Y189)及其应用与编码该突变体的基因。
技术介绍
光学纯的手性醇及其衍生物是合成手性药物、液晶材料、香精香料、农药的重要手性中间体,在医药及其他化工领域占有重要位置。手性醇可以通过化学法和和生物法合成。化学合成法一般需要高温高压等严苛的条件;采用大量的有机试剂,环境污染严重;制备过程复杂,往往存在多次保护和去保护步骤;更重要的是化学方法得到的产物的对映体选择性低。相比于化学法,生物法一般在常温常压下反应,条件温和,设备要求低,环境污染小,底物专一性强,具有较高的立体选择性和区域选择性,产物对映体纯度高等优点。生物催化合成手性醇正在以强劲的势头在制备药物中间体中发挥越来越重要的作用。基于绿色化学和可持续发展的原则,生物催化制备手性醇是既绿色又可持续的合成途径。羰基还原酶作为一种高效、高选择性的可用于不对称还原反应的生物催化剂,常用于制备具有光学活性的手性化合物。羰基还原酶在催化不对称还原反应时存在两 ...
【技术保护点】
1.一种羰基还原酶突变体mut‑AcCR(G152L/Y189),其特征在于:氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
【技术特征摘要】
1.一种羰基还原酶突变体mut-AcCR(G152L/Y189),其特征在于:氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。2.编码权利要求1所述的羰基还原酶突变体mut-AcCR(G152L/Y189)的基因,其特征在于:基因序列如SEQIDNO.2所示。3.根据权利要求1所述一种羰基还原...
【专利技术属性】
技术研发人员:娄文勇,魏萍,宗敏华,
申请(专利权)人:华南理工大学,
类型:发明
国别省市:广东,44
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