The invention discloses a cyclic RNA hsa_circ_0102618 and its specific amplification primers and applications, in which the nucleotide sequence of the cyclic RNA, as shown in SEQ ID NO:1, is low expressed in breast cancer tissue cells and blood of patients with breast cancer, and can be used as a molecular marker for screening breast cancer; the invention also provides a specific amplification of the cyclic RNA. Sex amplification primers, the specific amplification primers include upstream primers and downstream primers, in which the upstream primer nucleotide sequence is shown as SEQ ID NO:2 and the downstream primer nucleotide sequence is shown as SEQ ID NO:3. The application of the specific amplification primers in the preparation of kits for breast cancer screening and the specific amplification primers, including the specific amplification primers, are also disclosed. Reagent kit for the substance.
【技术实现步骤摘要】
一种环状RNAhsa-circ-0102618及其特异性扩增引物和应用
本专利技术属于肿瘤分子生物学领域,尤其涉及一种用于乳腺癌诊断的环状RNA,用于所述环状RNA的特异性扩增引物及应用。
技术介绍
乳腺癌是一种常见的女性高危恶性肿瘤,严重影响人们的生活质量。近年来,全世界的女性癌症患者中大约有22.9%为乳腺癌患者,新发现的乳腺癌患者中,中国患者占12.2%。尽管在药物敏感性和外科技术上已有巨大的突破,乳腺癌的复发和转移仍频繁地发生,成为晚期乳腺癌患者死亡的主要原因。早期诊断、早期治疗能够大大减少乳腺癌恶化的进一步发生,随着分子水平的发展以及对乳腺癌发生、发展、治疗相关机制的进一步研究,对靶向诊断和靶向治疗分子标志物的筛选和研究成为乳腺癌研究最受关注的领域之一。环状RNA(CircularRNA,circRNA)是一类不具有5'末端帽子和3'末端poly(A)尾巴、并以共价键形成环形结构的非编码RNA分子,主要由前体RNA(pre-mRNA)通过可变剪切加工产生。circRNA大多数定位于细胞质中,少数定位于细胞核内,大多数由外显子形成。circRNA不易被核酸外切酶降解,与线性RNA相比能更稳定地存在于生物体内,其在不同的物种中具有保守性,同时在不同组织及发育阶段具有表达特异性,大多数circRNA在不同的物种间含量丰富且都具有组织特异性,在人体组织、唾液、血液和外泌体中都有稳定表达,这使得circRNA成为肿瘤患者诊断、治疗和预后追踪的理想生物标志物。近年来,关于circRNA与肿瘤之间的关系研究已有很多报道,已经明确circRNA具有调节肿瘤细胞增 ...
【技术保护点】
1.一种环状RNA,其特征在于,所述环状RNA在circ‑RNA数据库中的全称为hsa‑circ‑0102618,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
【技术特征摘要】
1.一种环状RNA,其特征在于,所述环状RNA在circ-RNA数据库中的全称为hsa-circ-0102618,其核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。2.权利要求1所述环状RNA用作筛查乳腺癌的分子标志物的用途。3.用于扩增权利要求1所述环状RNA的特异性扩增引物,其特征在于,所述特异性扩增引物包括上游引物和下游引物,其中,所述上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示;所述下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:3所示。4.一种扩增权利要求1所述环状RNA的方法,其特征在于,所述方法包括:步骤1,合成第一链cDNA:混合原料,所述原料包括权利要求1所述环状RNA、随机引物、ddH2O、dNTP混合液、反转录缓冲液、RNA酶抑制剂、反转录酶,按照第一程序控温反应;步骤2,对步骤1制得的第一链cDNA进行实时荧光定量聚合酶链式反应扩增:配制扩增体系,所述扩增体系包括步骤1制备的cDNA、如权利要求3所示的上游引物、如权利要求3所示的下游引物、ddH2O、qPCR扩增荧光染料Mix,按照第二程序控温反应。5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤1中,所述原料的按照如下配比混合:1μl权利要求1所述环状...
【专利技术属性】
技术研发人员:王立斌,张旭,王丹妮,
申请(专利权)人:宁夏医科大学总医院,
类型:发明
国别省市:宁夏,64
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