靶向BCMA的嵌合抗原受体及其使用方法技术

本申请提供靶向BCMA的单域抗体，和包含一个或多个抗BCMA单域抗体的嵌合抗原受体(诸如单价CAR，和包括双表位CAR的多价CAR)。还提供了包含所述嵌合抗原受体的经工程化的免疫效应细胞(诸如T细胞)。还提供了治疗癌症的药物组合物、试剂盒和方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】靶向BCMA的嵌合抗原受体及其使用方法相关申请的交叉引用本申请要求2016年8月10日提交的国际专利申请No.PCT/CN2016/094408的优先权权益，该专利申请的内容以引用的方式整体并入本文。在ASCII文本文件中提交序列表以下在ASCII文本文件中提交的内容以引用的方式整体并入本文：序列表的计算机可读形式(CRF)(文件名：761422000640SEQLISTING.txt，记录日期：2017年8月10日，大小：520KB)。专利
本专利技术涉及靶向BCMA的单域抗体、嵌合抗原受体和经工程化的免疫效应细胞及其使用方法。专利技术背景随着肿瘤免疫疗法和临床技术的发展，嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)免疫疗法目前是最有前途的肿瘤免疫疗法方法之一。一般而言，嵌合抗原受体(CAR)包含胞外抗原结合域、跨膜域和胞内信号传导域。胞外抗原结合域可包含靶向所鉴定的肿瘤抗原的单链可变片段(scFv)。可以使用基因转染技术在T细胞的表面上表达CAR。在结合至靶标肿瘤抗原后，CAR可活化T细胞，用以以抗原依赖性方式发起特异性抗肿瘤响应，而不受对靶标肿瘤抗原具有特异性的主要组织相容性复合体(MHC)的可用性的限制。单域抗体(sdAb)由于具有单个单体抗体可变域而不同于传统的4链抗体。例如，骆驼科动物和鲨鱼产生天然缺乏轻链的sdAb，其被称为仅重链抗体(HcAb)。骆驼科动物仅重链抗体的每个臂中的抗原结合片段具有单个重链可变域(VHH)，所述重链可变域可在无需轻链的帮助下，对抗原具有高亲和力。骆驼科动物VHH被称为最小的功能性抗原结合片段，分子量为大约15kD。多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的侵袭性血浆恶性肿瘤，其被归类为B细胞瘤，并且以不受控制的方法在骨髓中增殖，从而干扰血细胞的正常代谢产生并导致令人痛苦的骨病变(Garfall,A.L.等人,DiscoveryMed.2014,17,37)。多发性骨髓瘤在临床上可出现高钙血症、肾功能不全、贫血、骨病变、细菌感染、高粘血症和淀粉样变性(RobertZ.Orlowski,CancerCell.2013,24(3))。根据调查和统计，每年将有近86,000名患者被诊断为骨髓瘤，而每年有约63,000名患者死于疾病相关的并发症(Becker,2011)。由于人口老龄化，预计骨髓瘤的病例数将逐年增加。正如很多癌症一样，多发性骨髓瘤的起因仍不清楚，且未治愈。多发性骨髓瘤的一些治疗类似于其他癌症的疗法，诸如化学疗法或放射疗法、干细胞移植或骨髓移植、靶向疗法或生物疗法(George,2014)。已证实，基于抗体的细胞免疫疗法对血液恶性肿瘤(特别是B细胞非霍奇金氏(Non-Hodgkin)淋巴瘤)患者具有显著的临床有益效果。虽然目前的多发性骨髓瘤疗法通常会产生缓解，但是几乎所有患者最终都会复发。需要用于治疗多发性骨髓瘤的有效免疫治疗剂。本专利技术中公开的LCAR-B38M是靶向二价BCMA的CAR-T，所述CAR-T在临床试验中在治疗难治性或复发性多发性骨髓瘤患者的安全性和功效方面已显示出临床优点。在早期临床试验中，35名患者中的33名(94％)在接受LCAR-B38MCAR-T细胞后具有多发性骨髓瘤的临床缓解。大多数患者只有轻微的副作用。主要专利技术人在2017年ASCO年会(2017ASCOAnnualMeeting)(文摘LBA3001)和新闻发布会中介绍了此研究，该新闻发布会吸引了广泛的媒体报道(http://www.ascopost.com/News/55713)。总体而言，客观响应率为100％，并且33名患者(94％)在接受CART细胞的2个月内具有明显的骨髓瘤临床缓解(完全响应、非常好的部分响应或部分响应)。在跟踪该组超过4个月的时间后，在19名患者中，在功效方面，14名已达到严格完全响应标准，1名患者已达到部分响应，并且4名患者已实现非常好的部分缓解标准。由于LCAR-B38M临床试验获得的出色功效和安全性特征显著优于ASCO中同时报道的少数其他BCMACAR-T试验，因此这些工作在免疫疗法领域已被广泛认为是“革命性的突破”。值得注意的是，所有这些BCMACAR设计是其中BCMA抗原结合域由单价ScFv抗体组成的常规CAR。本文涉及的所有出版物、专利、专利申请和公开的专利申请的公开内容据此以引用的方式整体并入本文。
技术实现思路
本申请提供抗BCMA单域抗体(sdAb)、包含一个或多个抗BCMAsdAb(诸如VHH片段)的嵌合抗原受体(CAR)、经工程化的免疫效应细胞及其用于癌症免疫疗法的使用方法。本申请的一个方面提供包含SEQIDNO:115-152中的任一者的CDR区的抗BCMAsdAb。在一些实施方案中，抗BCMAsdAb包含以下中的任一者：(1)包含SEQIDNO:1的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:39的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:77的氨基酸序列的CDR3；(2)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:40的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:78的氨基酸序列的CDR3；(3)包含SEQIDNO:3的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:41的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:79的氨基酸序列的CDR3；(4)包含SEQIDNO:4的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:42的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:80的氨基酸序列的CDR3；(5)包含SEQIDNO:5的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:43的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:81的氨基酸序列的CDR3；(6)包含SEQIDNO:6的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:44的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:82的氨基酸序列的CDR3；(7)包含SEQIDNO:7的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:45的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:83的氨基酸序列的CDR3；(8)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:46的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:84的氨基酸序列的CDR3；(9)包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:47的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:85的氨基酸序列的CDR3；(10)包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:48的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:86的氨基酸序列的CDR3；(11)包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:49的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:87的氨基酸序列的CDR3；(12)包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:50的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:88的氨基酸序列的CDR3；(13)包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:51的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:89的氨基酸序列的CDR3；(14)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:52的氨基酸序列的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包含多肽的多价嵌合抗原受体(CAR)，所述多肽包含：(a)包含至少两个BCMA结合部分的胞外抗原结合域；(b)跨膜域；以及(c)胞内信号传导域。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.08.10 CN PCT/CN2016/0944081.一种包含多肽的多价嵌合抗原受体(CAR)，所述多肽包含：(a)包含至少两个BCMA结合部分的胞外抗原结合域；(b)跨膜域；以及(c)胞内信号传导域。2.根据权利要求1所述的多价CAR，其中所述胞外抗原结合域包含第一BCMA结合部分和第二BCMA结合部分。3.根据权利要求1或2所述的多价CAR，其中所述第一BCMA结合部分和所述第二BCMA结合部分中的一者或多者是抗BCMAsdAb。4.根据权利要求2或3所述的多价CAR，其中所述第一BCMA结合部分是第一BCMAsdAb并且所述第二BCMA结合部分是第二抗BCMAsdAb。5.根据权利要求2或3所述的多价CAR，其中所述第一BCMA结合部分是抗BCMAsdAb并且所述第二BCMA结合部分来源于人抗体。6.根据权利要求2或3所述的多价CAR，其中所述第一BCMA结合部分是抗BCMAsdAb并且所述第二BCMA结合部分是BCMA的多肽配体。7.根据权利要求2-6中任一项所述的多价CAR，其中所述第一BCMA结合部分和所述第二BCMA结合部分特异性结合至BCMA上的相同的表位。8.根据权利要求2-6中任一项所述的多价CAR，其中所述第一BCMA结合部分和所述第二BCMA结合部分特异性结合至BCMA上的不同的表位。9.根据权利要求2-8中任一项所述的多价CAR，其中所述第一BCMA结合部分和/或所述第二BCMA结合部分特异性结合至来源于选自SEQIDNO:388-394氨基酸序列的BCMA上的表位。10.根据权利要求3-9中的任一项所述的多价CAR，其中所述抗BCMAsdAb包含以下中的任一者：(1)包含SEQIDNO:1的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:39的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:77的氨基酸序列的CDR3；(2)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:40的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:78的氨基酸序列的CDR3；(3)包含SEQIDNO:3的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:41的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:79的氨基酸序列的CDR3；(4)包含SEQIDNO:4的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:42的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:80的氨基酸序列的CDR3；(5)包含SEQIDNO:5的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:43的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:81的氨基酸序列的CDR3；(6)包含SEQIDNO:6的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:44的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:82的氨基酸序列的CDR3；(7)包含SEQIDNO:7的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:45的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:83的氨基酸序列的CDR3；(8)包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:46的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:84的氨基酸序列的CDR3；(9)包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:47的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:85的氨基酸序列的CDR3；(10)包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:48的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:86的氨基酸序列的CDR3；(11)包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:49的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:87的氨基酸序列的CDR3；(12)包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:50的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:88的氨基酸序列的CDR3；(13)包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:51的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:89的氨基酸序列的CDR3；(14)包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:52的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:90的氨基酸序列的CDR3；(15)包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:53的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:91的氨基酸序列的CDR3；(16)包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:54的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:92的氨基酸序列的CDR3；(17)包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:55的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:93的氨基酸序列的CDR3；(18)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:56的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:94的氨基酸序列的CDR3；(19)包含SEQIDNO:19的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:57的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:95的氨基酸序列的CDR3；(20)包含SEQIDNO:20的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:58的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:96的氨基酸序列的CDR3；(21)包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:59的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:97的氨基酸序列的CDR3；(22)包含SEQIDNO:22的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:60的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:98的氨基酸序列的CDR3；(23)包含SEQIDNO:23的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:61的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:99的氨基酸序列的CDR3；(24)包含SEQIDNO:24的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:62的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:100的氨基酸序列的CDR3；(25)包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:63的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:101的氨基酸序列的CDR3；(26)包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:64的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:102的氨基酸序列的CDR3；(27)包含SEQIDNO:27的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:65的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:103的氨基酸序列的CDR3；(28)包含SEQIDNO:28的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:66的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:104的氨基酸序列的CDR3；(29)包含SEQIDNO:29的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:67的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:105的氨基酸序列的CDR3；(30)包含SEQIDNO:30的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:68的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:106的氨基酸序列的CDR3；(31)包含SEQIDNO:31的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:69的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:107的氨基酸序列的CDR3；(32)包含SEQIDNO:32的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:70的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:108的氨基酸序列的CDR3；(33)包含SEQIDNO:33的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:71的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:109的氨基酸序列的CDR3；(34)包含SEQIDNO:34的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:72的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:110的氨基酸序列的CDR3；(35)包含SEQIDNO:35的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:73的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:111的氨基酸序列的CDR3；(36)包含SEQIDNO:36的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:74的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:112的氨基酸序列的CDR3；(37)包含SEQIDNO:37的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:75的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:113的氨基酸序列的CDR3；或(38)包含SEQIDNO:38的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:76的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:114的氨基酸序列的CDR3。11.根据权利要求2-10中任一项所述的多价CAR，其中所述第一BCMA结合部分位于所述第二BCMA结合部分的N-末端。12.根据权利要求2-10中任一项所述的多价CAR，其中所述第一BCMA结合部分位于所述第二BCMA结合部分的C-末端。13.根据权利要求2-12中任一项所述的多价CAR，其中所述第一BCMA结合部分和所述第二BCMA结合部分通过肽接头彼此融合。14.根据权利要求13所述的多价CAR，其中所述肽接头的长度不超过约50个氨基酸。15.一种包含以下中的任一者的抗BCMA单域抗体(sdAb)：(1)包含SEQIDNO:1的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:39的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:77的氨基酸序列的CDR3；(2)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:40的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:78的氨基酸序列的CDR3；(3)包含SEQIDNO:3的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:41的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:79的氨基酸序列的CDR3；(4)包含SEQIDNO:4的氨基酸序列的CDR1；包含SEQIDNO:42的氨基酸序列的CDR2；和包含SEQIDNO:80的氨基酸序列的CDR3；(5)包含SEQI...

【专利技术属性】
技术研发人员：范晓虎，庄秋传，王平艳，王林，杨蕾，郝佳瑛，赵丹，何娴，
申请(专利权)人：南京传奇生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32