测定曲格列汀有关物质的方法技术

本发明专利技术涉及化学分析领域，具体而言，涉及一种测定曲格列汀有关物质的方法。测定曲格列汀有关物质的方法，包括以下步骤：采用十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料并对供试品溶液进行上样，而后利用酸溶液为流动相A和有机溶剂为流动相B进行洗脱后进行检测。选择十八烷基硅烷键合硅胶和酸溶液为流动相A和有机溶剂为流动相B便于曲格列汀有关物质的分离和洗脱，充分揭示了曲格列汀的杂质，能够快速检测曲格列汀有关物质提高产品的安全性，该方法科学、可靠，可控曲格列汀有关物质。

【技术实现步骤摘要】
测定曲格列汀有关物质的方法
本专利技术涉及化学分析领域，具体而言，涉及一种测定曲格列汀有关物质的方法。
技术介绍
琥珀酸曲格列汀(TrelagliptinSuccinate)，化学名称为：(R)-2-((6-(3-氨基哌啶-1-基)-3-甲基-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基)-4-氟苯甲氰琥珀酸盐，是一种超长效二肽基肽酶Ⅳ(DPP-4)抑制剂，用于治疗2型糖尿病。琥珀酸曲格列汀原料药的成分是明确的，主要包含琥珀酸曲格列汀及8种有关物质，将这9种物质彻底的快速的分离十分重要。目前并无药典收录琥珀酸曲格列汀有关物质分析方法，也并无文献提供琥珀酸曲格列汀高效液相色谱法测定其有关物质。
技术实现思路
本专利技术提供了一种测定曲格列汀有关物质的方法，其能快速、有效地分离并检测出琥珀酸曲格列汀原料药中的所有有关物质。本专利技术是这样实现的：一种测定曲格列汀有关物质的方法，包括以下步骤：采用十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料并对供试品溶液进行上样，而后利用酸溶液为流动相A和有机溶剂为流动相B进行洗脱后进行检测。本专利技术的有益效果是：本专利技术的测定曲格列汀有关物质的方法，选择十八烷基硅烷键合硅胶和酸溶液为流动相A和有机溶剂为流动相B便于曲格列汀有关物质的分离和洗脱，充分揭示了曲格列汀的杂质，能够快速检测曲格列汀有关物质提高产品的安全性，该方法科学、可靠，可控曲格列汀有关物质。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，以下将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。图1为本专利技术实施例1提供的检测系统适用性结果的HPLC图谱；图2为本专利技术实施例1提供的检测样品结果的HPLC图谱；图3为本专利技术实施例2提供的检测系统适用性结果的HPLC图谱；图4为本专利技术实施例2提供的检测样品结果的HPLC图谱；图5为本专利技术实施例3提供的检测系统适用性结果的HPLC图谱；图6为本专利技术实施例3提供的检测样品结果的HPLC图谱；图7为本专利技术实施例4提供的检测系统适用性结果的HPLC图谱；图8为本专利技术实施例4提供的检测样品结果的HPLC图谱；图9为本专利技术实施例5提供的检测系统适用性结果的HPLC图谱；图10为本专利技术实施例5提供的检测样品结果的HPLC图谱；图11为本专利技术实施例6提供的检测系统适用性结果的HPLC图谱；图12为本专利技术实施例6提供的检测样品结果的HPLC图谱；图13为本专利技术实施例7提供的检测系统适用性结果的HPLC图谱；图14为本专利技术实施例7提供的检测样品结果的HPLC图谱；图15为本专利技术实施例8提供的检测系统适用性结果的HPLC图谱；图16为本专利技术实施例8提供的检测样品结果的HPLC图谱；图17为本专利技术实施例9提供的检测系统适用性结果的HPLC图谱；图18为本专利技术实施例9提供的检测样品结果的HPLC图谱；图19为本专利技术实施例10提供的定量限结果的HPLC图谱；图20为本专利技术实施例11提供的检测限结果的HPLC图谱。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。下面对本专利技术实施例的测定曲格列汀有关物质的方法进行具体说明。一种测定曲格列汀有关物质的方法，包括以下步骤：S1、配置供试品溶液；将待测样品溶解在混合溶液中得到的供试品溶液，其中，供试品溶液的浓度为0.5～2.0mg/ml，优选，为1-1.5mg/ml。供试品溶液采用上述浓度能够便于溶液内的9种物质分离，便于后续洗脱得到9中物质。混合溶液是流动相A和所述流动相B按照体积比为83-87：13-17的比例混合后制备得到的溶液。混合溶液与初始洗脱的溶剂一致，可以减小溶剂峰，排除溶剂峰对杂质检出的干扰。S2、洗脱；采用十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料并将其填充进色谱柱内，十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱键合固定相的水解稳定性优于短链键合相。琥珀酸曲格列汀是强水溶性药物，在传统的反相色谱柱上难以保留，峰型不佳，并且当流动相中含水量增加到一定程度时，极可能发生丧失浸润现象。例如采用一般C18柱时，曲格列汀部分杂质极性较大，而C18柱无法耐受高比例的水相，因此无法保留在色谱柱上，继而导致曲格列汀有关物质无法检出。而采用AQ-C18可用高比例的水相，该色谱柱是一款耐100％水相的色谱柱，对于高含水流动相具有很好的兼容性，有利于大极性杂质的检出。上样完成后利用酸溶液为流动相A和有机溶剂为流动相B进行洗脱，酸溶液为不能完全电离的酸性溶液，优选为多元酸性溶液，更优选为磷酸溶液。采用磷酸水溶液，基线噪音小，有利于杂质的检出。而利用乙酸胺缓冲盐或者其他溶剂作为流动相A则容易造成极限噪音大，不利于杂质的检出。同时，采用磷酸水溶液可以快速浸润固定相表面，继而使得各物质间分离良好，各峰理论塔板数较高。进一步地，磷酸溶液的质量浓度为0.09％-0.11％，所述磷酸溶液的pH值为1.9-2.3。由于曲格列汀为碱性化合物，在pH较高的流动相中，峰型较差，采用上述质量的磷酸水作流动相时，峰型较好。上述浓度的磷酸溶液增强了曲格列汀的离子化程度，而离子化增强了曲格列汀的水溶性，使峰型得以改善。进一步地，有机溶剂为氰类溶剂或者醇类溶剂，优选，所述氰类溶剂为乙腈，所述醇类溶剂为一元醇溶剂，更优选为甲醇。采用上述有机溶剂更有利于色谱柱上各个物质的分离。进一步地，洗脱采用的是梯度洗脱，梯度洗脱是流动相A和流动相B以体积为83-87：13-17的比例洗脱0-30分钟，而后再以流动相A和流动相B以体积为1:1的比例进行洗脱。例如洗脱方案可以参见表1。表1梯度洗脱方案时间(分钟)流动相A(％)流动相B(％)083-8713-17583-8713-17305050405050由于曲格列汀及大部分杂质含有伯氨基(-NH2),在磷酸水溶液中容易离子化，减小了它在固定相中的溶解度，故初始洗脱梯度中，水相的比例较高。杂质B为二聚体化合物，极性相对较大，故在后面的洗脱梯度中增加乙腈的比例，使其洗脱出来。洗脱得到的杂质参见表2。表2杂质代码和名称洗脱完成后进行检测，检测是利用高效液相分析进行检测，检测波长为210-230nm。利用高效液相分析进行检测时流速为0.9-1.1ml/min，柱温为20～30℃，进样量为10μl。以下结合实施例对本专利技术的特征和性能作进一步的详细描述。实施例1本实施例提供一种测定曲格列汀有关物质的方法，包括以下步骤：S1、供试品溶液配制；称取曲格列汀，加溶剂溶解并稀释制成每1ml中含琥珀酸曲格列汀1.0mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液适量，用溶剂稀释制成每1ml中含琥珀酸曲格列汀10μg的溶液，作为对照溶液。进样并记录色谱图。采用十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料并将其填充进色谱柱内即得WelchUltimateAQ-C18色谱柱，而后上样和洗脱。其中流动相A为磷酸水溶液(取水1000ml，加磷酸1ml，pH值为2.1)，流动相B为乙腈；流速：1.0ml/min；按照表3进行线性梯度洗脱。检测结果参见图1和图2。表3梯度洗脱方案时间(分钟)流动相A(％)流动相B(％)085155851530505本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定曲格列汀有关物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：采用十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料并对供试品溶液进行上样，而后利用酸溶液为流动相A和有机溶剂为流动相B进行洗脱后进行检测。

【技术特征摘要】
1.一种测定曲格列汀有关物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：采用十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料并对供试品溶液进行上样，而后利用酸溶液为流动相A和有机溶剂为流动相B进行洗脱后进行检测。2.根据权利要求1所述的测定曲格列汀有关物质的方法，其特征在于，所述酸溶液为不能完全电离的酸性溶液，优选为多元酸性溶液，更优选为磷酸溶液。3.根据权利要求2所述的测定曲格列汀有关物质的方法，其特征在于，所述磷酸溶液的质量浓度为0.09％-0.11％，所述磷酸溶液的pH值为1.9-2.3。4.根据权利要求1所述的测定曲格列汀有关物质的方法，其特征在于，所述有机溶剂为氰类溶剂或者醇类溶剂，优选，所述氰类溶剂为乙腈，所述醇类溶剂为一元醇溶剂，更优选为甲醇。5.根据权利要求1所述的测定曲格列汀有关物质的方法，其特征在于，洗脱采用的是梯度洗脱，梯度洗脱是流动相A和流动相B以体积为83-87：13-17的比例洗脱0-30分钟，而后再...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙孝金，纪德胜，张德伟，扈田进，孙珏，
申请(专利权)人：江苏万川医疗健康产业集团有限公司，江苏万禾制药有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32