本发明专利技术一种用于检测维格列汀中间体中对映异构体的方法，采用的色谱条件为：色谱柱为CHIRALPAK IC色谱柱，柱温为25～40℃，检测波长为210nm，流动相为正丁醇、乙醇和二乙胺的混合物，流速为0.8～1.2mL/min。利用本发明专利技术的方法可以准确地进行(2S)‑1‑(2‑氯乙酰基)‑2‑吡咯烷甲腈中对映异构体(2R)‑1‑(2‑氯乙酰基)‑2‑吡咯烷甲腈的定量分析，本发明专利技术能有效地对对映异构体进行分离检测，峰型对称，无拖尾现象，分离度、专属性、定量限与检测限、线性、精密度、准确度、溶液稳定性、耐用性等方面均经详细验证，且各项验证结果均符合相关法规和指导原则的要求，检测效果良好。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药
，涉及一种用于检测维格列汀中间体中对映异构体的方法，具体涉及(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈中对映异构体的高效液相检测方法。
技术介绍
维格列汀(Vildagliptin)，化学名为(S)-1-[2-(3-羟基-1-金刚烷-1-基氨基]乙酰基]吡咯烷-2-甲腈。维格列汀通过与DPP-4结合形成DPP-4复合物而抑制该酶的活性，在提高GLP-l浓度，促使胰岛B细胞产生胰岛素的同时，降低胰高血糖素浓度，从而降低血糖，且对体重无明显影响。维格列汀的化学结构式为：健康人体药动学研究表明，口服维格列汀吸收迅速，生物利用度约为85％。达峰时间为给药后1～2h，血浆半衰期为1.5～4.5h，蛋白结合率低(4％～17％)。其体内过程具有线性药代动力学特征，多次口服给药后未出现药物蓄积，其药动学参数不受食物影响。经文献检索，所报道的维格列汀合成主要是以L-脯氨酰胺或L-脯氨酸为起始物料两种路线：(1)以L-脯氨酸为起始物料合成路线：该路线以L-脯氨酸为原料，经酰化、羧基转变为酰胺基，酰胺基脱水得关键中间体(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈，最后和3-氨基-1-金刚烷醇反应得到维格列汀。(2)以L-脯氨酰胺为起始物料合成路线：该路线以L-脯氨酰胺为起始原料，与氯乙酰氯反应，中间体酰胺化合物脱水反应制备得关键中间体(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈，该中间体与3-氨基-1-金刚烷醇反应制备得维格列汀粗品，再经精制等步骤得维格列汀。两条路线的关键中间体均为(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈，该(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈的化学结构式为：在维格列汀成品质量标准中，对其对映异构体R-维格列汀进行了质量控制，标准为不超过0.5％。而其对映异构体来源于物料L-脯氨酰胺中的对映异构体D-脯氨酰胺或L-脯氨酸中的对映异构体D-脯氨酸，其进一步反应后导致维格列汀关键中间体(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈的对映异构体(2R)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈的产生。为确保临床用药的安全有效，根据手性药物指导原则，有必要对维格列汀关键中间体(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈中的(2R)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈进行有效的控制。现有文献报道中间体(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈的手性有效控制方法较少，中国医药工业杂志(2012,43(12)：965-967)提到采用CHIRALPAKAD-H(型号：长250mm，内径4.6mm，5μm)，流动相(正己烷-异戊醇-乙醇-氨水＝70:15:15:0.05)，柱温25℃，流速1.2ml/min，检测波长210nm，对(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈中的(2R)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈进行检测。用此方法进行试验，存在峰型对称性不好，拖尾，柱效差等问题，且没有给出详细的检测方法。对此检测方法进行微调，也无法改善上述问题。因此，为不断提高维格列汀的安全性和有效性，迫切需要建立一种操作简便、灵敏度高、重现性好的维格列汀中关键中间体(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈的对映异构体的定量检测方法。
技术实现思路
鉴于此，本专利技术的目的在于提出一种用于检测维格列汀中间体中对映异构体的方法，具体为一种能有效检测(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈中的(2R)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈的新方法，本检测方法采用高效液相色谱法，对(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈中对映异构体(2R)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈进行有效分离并进行定量，其分离度、专属性、定量限与检测限、线性、精密度、准确度、溶液稳定性，耐用性等方面均经详细验证，且各项验证结果均符合相关法规和指导原则的要求，实际检测效果良好。为了达到上述的目的，本专利技术的技术方案是这样实现的：一种用于检测维格列汀中间体中对映异构体的方法，所述维格列汀中间体为(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈，所述对映异构体为(2R)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈，所述方法包括以下步骤：S1、配制(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈供试品溶液：称取(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈样品和流动相混合配制成供试品溶液，待用；S2、配制(2R)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈对照品溶液：称取(2R)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈和流动相混合配制成对照品溶液，待用；S3、配制混合溶液：称取(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈和步骤S2所配制的(2R)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈对照品溶液加入容量瓶中，用流动相稀释，混合均匀，制成混合溶液，待用；S4、分别吸取等量的对照品溶液、供试品溶液和混合溶液，注入高效色谱仪中进行测定，所述高效液相色谱法的测定条件包括：色谱柱为CHIRALPAKIC色谱柱，柱温为25～40℃，检测波长为210nm，流动相的流速为0.8～1.2mL/min；所述流动相为正丁醇、乙醇和二乙胺的混合物，按体积比计算，正丁醇：乙醇：二乙胺＝58～62：38～42：0.05。进一步的，所述步骤S1供试品溶液中，按照质量体积比(g/L)计，(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈：流动相的比值为0.1～5：1。进一步的，所述步骤S1供试品溶液中，按照质量体积比(g/L)计，(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈：流动相的比值为1：1。进一步的，所述步骤S2对照品溶液中，按照质量体积比计，(2R)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈：流动相的比值为0.01～1：1。进一步的，所述步骤S2对照品溶液中，按照质量体积比(g/L)计，(2R)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈：流动相的比值为0.1：1。进一步的，所述步骤S3对混合溶液中，按照质量体积比(g/L)计，(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈：流动相的比值为0.1～5：1，(2R)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈：流动相的比值为0.001～0.1：1。进一步的，所述步骤S3对混合溶液中，按照质量体积比(g/L)计，(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈：流动相的比值为1：1，(2R)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈：流动相的比值为0.01：1。进一步的，所述步骤S4高效液相色谱法的测定条件中，CHIRALPAKIC色谱柱的型号为：长250mm，内径4.6mm，纤维素表面共价键合硅胶填充剂，填充料粒径为5μm。进一步的，所述步骤S4高效液相色谱法的测定条件中，柱温为30℃，流动相的流速为1mL/min。进一步的，所述流动相中，按体积比计算，正丁醇：乙醇：二乙胺＝60：40：0.05。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：本专利技术提供了(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈和(2R)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈进行分离检测的方法，本专利技术采用不同于现有技术的色谱条件，从HPLC图谱中以看出它们之间有一定距离，能有效地对维格列汀关键中间体中对映异构体进行分离检测，且本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于检测维格列汀中间体中对映异构体的方法，所述维格列汀中间体为(2S)‑1‑(2‑氯乙酰基)‑2‑吡咯烷甲腈，所述对映异构体为(2R)‑1‑(2‑氯乙酰基)‑2‑吡咯烷甲腈，其特征在于，所述方法包括以下步骤：S1、配制(2S)‑1‑(2‑氯乙酰基)‑2‑吡咯烷甲腈供试品溶液：称取(2S)‑1‑(2‑氯乙酰基)‑2‑吡咯烷甲腈样品和流动相混合配制成供试品溶液，待用；S2、配制(2R)‑1‑(2‑氯乙酰基)‑2‑吡咯烷甲腈对照品溶液：称取(2R)‑1‑(2‑氯乙酰基)‑2‑吡咯烷甲腈和流动相混合配制成对照品溶液，待用；S3、配制混合溶液：称取(2S)‑1‑(2‑氯乙酰基)‑2‑吡咯烷甲腈和步骤S2所配制的(2R)‑1‑(2‑氯乙酰基)‑2‑吡咯烷甲腈对照品溶液加入容量瓶中，用流动相稀释，混合均匀，制成混合溶液，待用；S4、分别吸取等量的对照品溶液、供试品溶液和混合溶液，注入高效色谱仪中进行测定，所述高效液相色谱法的测定条件包括：色谱柱为CHIRALPAK IC色谱柱，柱温为25～40℃，检测波长为210nm，流动相的流速为0.8～1.2mL/min；所述流动相为正丁醇、乙醇和二乙胺的混合物，按体积比计算，正丁醇：乙醇：二乙胺＝58～62：38～42：0.05。...
【技术特征摘要】
1.一种用于检测维格列汀中间体中对映异构体的方法，所述维格列汀中间体为(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈，所述对映异构体为(2R)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈，其特征在于，所述方法包括以下步骤：S1、配制(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈供试品溶液：称取(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈样品和流动相混合配制成供试品溶液，待用；S2、配制(2R)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈对照品溶液：称取(2R)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈和流动相混合配制成对照品溶液，待用；S3、配制混合溶液：称取(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈和步骤S2所配制的(2R)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈对照品溶液加入容量瓶中，用流动相稀释，混合均匀，制成混合溶液，待用；S4、分别吸取等量的对照品溶液、供试品溶液和混合溶液，注入高效色谱仪中进行测定，所述高效液相色谱法的测定条件包括：色谱柱为CHIRALPAKIC色谱柱，柱温为25～40℃，检测波长为210nm，流动相的流速为0.8～1.2mL/min；所述流动相为正丁醇、乙醇和二乙胺的混合物，按体积比计算，正丁醇：乙醇：二乙胺＝58～62：38～42：0.05。2.根据权利要求1所述用于检测维格列汀中间体中对映异构体的方法，其特征在于，所述步骤S1供试品溶液中，按照质量体积比(g/L)计，(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈：流动相的比值为0.1～5：1。3.根据权利要求2所述用于检测维格列汀中间体中对映异构体的方法，其特征在于，所述步骤S1供试品溶液中，按照质量体积比(g/L)计，(2S)-1-(2-氯乙酰基)-2-吡咯烷甲腈：流动相的比值为1：1。4.根据权利要求1所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：邝少轶，陈年根，张鹏威，杨雪峰，白秉信，
申请(专利权)人：海口南陆医药科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：海南;46
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