一种转基因斑马鱼在制备慢性粒细胞白血病的动物模型中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种转基因斑马鱼在制备慢性粒细胞白血病的动物模型中的应用。该转基因斑马鱼为BCR/ABL转基因斑马鱼，是人源性BCR‑ABL诱导的转基因斑马鱼。本发明专利技术将人源性的BCR/ABL mRNA显微注射到斑马鱼胚胎中时，发现其胚胎出现类似慢性粒细胞白血病的表型：中性粒细胞大量增加，这就提示人源性的BCR/ABL蛋白可以在斑马鱼的体内发挥作用；且本发明专利技术中首次发现了转基因斑马鱼在幼年和成年时期出现类似人白血病的表型，并证明了可以利用其对治疗白血病的药物进行高通量筛选，即本发明专利技术中成功建立了慢性粒细胞白血病的动物模型，可为慢性粒细胞白血病的研究及其药物筛选提供有效的途径。

【技术实现步骤摘要】
一种转基因斑马鱼在制备慢性粒细胞白血病的动物模型中的应用
本专利技术属于生物
，特别涉及一种转基因斑马鱼在制备慢性粒细胞白血病的动物模型中的应用。
技术介绍
慢性白血病常见有慢性粒细胞白血病(CML)和慢性淋巴细胞白血病(CLL)。CML患者白血病细胞中可发现BCR/ABL融合基因，CML病程分为慢性期、加速期及急变期。同一疾病的不同时期，肿瘤细胞的生物学行为、临床表现、治疗方法及预后却截然不同。慢性期主要表现为骨髓、外周血和脾脏中大量粒细胞积聚，主要是接近成熟的中、晚幼粒细胞为主，此阶段患者对于羟基脲、干扰素、温和化疗以及酪氨酸激酶抑制剂等相关治疗反应好，能很快获得完全缓解，部分患者缓解后可以接受异基因造血干细胞移植从而达到长期无病生存。慢性期持续大约3～5年左右，CML患者进入加速期，加速期一般持续4～6个月，加速期原始细胞，不成熟细胞比例增高，最后进入急变期。急变期患者病情进一步恶化，骨髓和外周血中无功能白细胞大量积聚，类似于AML(急性髓细胞白血病)和ALL(急性淋巴细胞白血病)的表现。CML可以向髓系和淋巴系急变，急变期对各种治疗效果反应差，预后不佳。CML的治疗是一本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种转基因斑马鱼在制备慢性粒细胞白血病的动物模型中的应用，其特征在于：所述转基因斑马鱼为BCR/ABL转基因斑马鱼。

【技术特征摘要】
1.一种转基因斑马鱼在制备慢性粒细胞白血病的动物模型中的应用，其特征在于：所述转基因斑马鱼为BCR/ABL转基因斑马鱼。2.根据权利要求1所述的转基因斑马鱼在制备慢性粒细胞白血病的动物模型中的应用，其特征在于，所述的BCR/ABL转基因斑马鱼通过如下方法构建得到：将重组质粒pTol2hsp70:BCR/ABL与Tol2转座酶mRNA共同导入野生型斑马鱼中，获得BCR/ABL转基因斑马鱼；其中，所述的重组质粒pTol2hsp70:BCR/ABL通过如下步骤构建得到：(1)将BCR/ABL融合基因连接到带有Tol2转座子识别位点的质粒中，得到重组质粒pTol2BCR/ABL；(2)将hsp70基因启动子插入到重组质粒pTol2BCR/ABL中，得到重组质粒pTol2hsp70:BCR/ABL。3.根据权利要求2所述的转基因斑马鱼在制备慢性粒细胞白血病的动物模型中的应用，其特征在于：步骤(1)中所述的质粒为T2AL200R150G质粒；步骤(2)中所述的hsp70基因启动子的核苷酸序列如SEQIDNo：1所示。4.根据权利要求1所述的转基因斑马鱼在制备慢性粒细胞白血病的动物模型中的应用，其特征在于：所述的慢性粒细胞白血病是由BCR/ABL融合基因的表达引起的。5.根据权利要求1所述的转基因斑马鱼在制备慢性粒细胞白血病的动物模型中的应用，其特征在于：所述的慢性粒细胞白血病在通过阻断酪氨酸激酶起作用的药物治疗后症状缓解，或通过阻断TGFβR-I通路的药物治疗后症状缓解。6.根据权利要求1所述的转基因斑马鱼在制备慢性粒细胞白血病的动物模型中的应用，其特征在于：所述的断酪氨酸激酶起作用的...

【专利技术属性】
技术研发人员：张文清，黄志斌，许梦畅，刘伟，叶志安，叶茵，徐进，
申请(专利权)人：华南理工大学，
类型：发明
国别省市：广东,44