带g6pd1303-1497位点缺失的转基因斑马鱼模型及构建方法技术

技术编号:13920850 阅读:107 留言:0更新日期:2016-10-27 20:52
本发明专利技术公开了一种带g6pd1303‑1497位点缺失的转基因斑马鱼模型,将g6pd基因带1303‑1497位点缺失的gata1‑g6pd

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于设计基因工程
,特别涉及一种带g6pd1303-1497位点缺失的转基因斑马鱼模型及构建方法
技术介绍
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症(gluocose-6-phosphate dehydrogenase deficiency,简称G6PD缺乏症)俗称蚕豆病,是世界上最常见的遗传性溶血性红细胞酶缺陷病。G6PD基因突变导致G6PD酶活性降低,主要通过两种机制影响酶的活性,即影响G6PD功能结构区的作用和G6PD二聚体的形成。G6PD酶是参与红细胞酵解磷酸戊糖氧化途径的起始限速酶,主要功能是催化生成重要的还原性物质还原型辅酶Ⅱ(NADPH),而NADPH是维持机体重要抗氧化物质还原型谷胱甘肽(GSH)还原状态所必需的辅酶。当机体G6PD酶活性缺乏时,会影响NADPH的产生,NADPH是机体多种物质合成代谢的供氢体,同时维持还原型谷胱甘肽(GSH的还原状态)的生成量,从而减弱机体还原型谷胱甘肽(GSH)及过氧化氢(H2O2)抗氧化剂的抗氧化效果,使红细胞中的血红蛋白及红细胞膜在接触氧化性损伤时易损害。产生大量的氧自由基,此时,红细胞膜无法抵抗氧化攻击,红细胞膜蛋白间本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种带g6pd1303‑1497位点缺失的转基因斑马鱼模型,其特征在于,将g6pd基因带1303‑1497位点缺失的gata1‑g6pdM1303‑1497‑EGFP‑PBSK‑Isce I质粒与Isce I酶一起注入斑马鱼的单细胞期胚胎。

【技术特征摘要】
1.一种带g6pd1303-1497位点缺失的转基因斑马鱼模型,其特征在于,将g6pd基因带1303-1497位点缺失的gata1-g6pdM1303-1497-EGFP-PBSK-Isce I质粒与Isce I酶一起注入斑马鱼的单细胞期胚胎。2.一种构建所述的带g6pd1303-1497位点缺失的转基因斑马鱼模型的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将g6pdM1303-1497-EGFP-PCS2+,gata-1-PBSK-IsceI质粒酶切连接构建gata1-g6pdM1303-1497-EGFP-PBSK-Isce I质粒;(2)将所述gata1-g6pdM1303-1497-...

【专利技术属性】
技术研发人员:舒莉萍何志旭吴西军周艳华夏海雄宋锦庹媛媛尚鲁俊
申请(专利权)人:贵州医科大学
类型:发明
国别省市:贵州;52

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