长爪沙鼠原位肝移植模型的建立方法及肝星状细胞的分离方法技术

本发明专利技术公开了一种长爪沙鼠原位肝移植模型的建立方法及肝星状细胞的分离方法，长爪沙鼠原位肝移植模型的建立方法包括；将供体麻醉，将供肝从供体切取出；将受体麻醉，切除肝脏，将供肝植入切除肝脏的受体中；计算长爪沙鼠原位肝移植模型的存活率。本发明专利技术施行长爪沙鼠原位肝移植，观察长爪沙鼠原位肝移植模型的变化，计算成活率。一种长爪沙鼠的肝星状细胞的分离方法，包括：用水合氯醛腹腔内注射麻醉雄性长爪沙鼠或选用刚刚死亡的雄性长爪沙鼠，将供肝从供体切取出；从供肝中分离得到的肝星状细胞。本发明专利技术分离方法能够提高肝星状细胞的产量和活率，可以保证HSCs纯度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及长爪沙鼠肝移植和细胞分离
，具体涉及长爪沙鼠原位肝移植模型的建立方法及肝星状细胞的分离方法。
技术介绍
稳定、可靠的肝移植动物模型是临床肝移植和免疫耐受研究的基础。只有成熟稳定的动物模型作为技术平台，器官移植和免疫耐受研究的发展才能有质的飞跃。虽然大鼠肝移植模型是目前较为常用的动物模型，但封闭群大鼠用于该模型，其稳定性和重现性有待进一步提高，而近交系大鼠模型稳定性提高了，但由于资源相对匮乏，不易获取，而且较为昂贵，因此进一步寻求稳定，易得的实验动物肝移植模型，对于研究工作的进行至关重要。小动物肝移植模型目前最常用的手术方式有单套管法(即门静脉行套管吻合)，双套管法(门静脉、肝下下腔静脉行套管吻合，而肝上上腔静脉采用缝合法)，三套管法(门静脉、肝下下腔静脉、肝上上腔静脉均用套管吻合法)。单套管法最主要的缺点是无肝期及受体总体手术时间相对较长，目前公认这两个时间的长短是术后存活情况的关键，缩短手术期及无肝期可减轻受体血流动力学、生化等方面的病理生理改变，减轻供肝的缺血再灌注损伤，因此，目前已经较少采用该术式。而三套管法虽然能有效减少无肝期(较双套管法平均缩短5～6分本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种长爪沙鼠原位肝移植模型的建立方法，其特征在于，包括；1)将供体麻醉，将供肝从供体切取出；2)将受体麻醉，切除肝脏，将供肝植入切除肝脏的受体中；3)计算长爪沙鼠原位肝移植模型的存活率。

【技术特征摘要】
1.一种长爪沙鼠原位肝移植模型的建立方法，其特征在于，包括；1)将供体麻醉，将供肝从供体切取出；2)将受体麻醉，切除肝脏，将供肝植入切除肝脏的受体中；3)计算长爪沙鼠原位肝移植模型的存活率。2.根据权利要求1所述的长爪沙鼠原位肝移植模型的建立方法，其特征在于，步骤1)中，所述的供体麻醉的条件为：采用100～140mg/kg氯胺酮腹腔注射。3.根据权利要求1所述的长爪沙鼠原位肝移植模型的建立方法，其特征在于，步骤1)中，将供肝从供体切取过程中，采用的胆管支架由硬膜外导管制成，两端修成斜面，长为4.0～6.0mm，外径为0.8～1.2mm。4.根据权利要求1所述的长爪沙鼠原位肝移植模型的建立方法，其特征在于，步骤1)中，将供肝从供体切取过程中，采用的血管套管由聚乙烯塑料管制成，血管套管包括套管体以及与所述套管体连接的套管柄，套管柄的长度为1.5～2.5mm，门静脉血管套管的内径为1.5～2.3mm，外径为1.8～2.4mm，肝下下腔静脉血管套管内径为2.2～2.6mm，外径为2.4～3.2mm。5.根据权利要求1所述的长爪沙鼠原位肝移植模型的建立方法，其特征在于，步骤1)中，将供肝从供体切取过程中，供体腹部被打开、暴露供肝后，用生理盐水纱布覆盖供肝；将供肝从供体切取过程中，供体经腹主动脉用生理盐水灌注至肝脏呈土黄色时即表示灌注良好。6.根据权利要求5所述的长爪沙鼠原位肝移植模型的建立方法，其特征在于，步骤1)中，所述的生理盐水的温度为0～4℃、含20～30U/ml肝素；灌注速度为2.0～3.0ml/min；灌注用量为10～30ml。7.根据权利要求1所述的长爪沙鼠原位肝移植模型的建立方法，其特征在于，步骤2)中，所述的受体麻醉的条件为：采用40～60mg/kg氯胺酮腹腔注射联合乙醚吸入联合用药麻醉。8.一种长爪沙鼠的肝星状细胞的分离方法，其特征在于，包括：a)用水合氯醛腹腔...

【专利技术属性】
技术研发人员：楼琦，石巧娟，卢领群，李巍，郭红刚，杜江涛，应华忠，
申请(专利权)人：浙江省医学科学院，
类型：发明
国别省市：浙江;33