艾塞那肽复合微球及其制备方法技术

本发明专利技术所述的一种艾塞那肽复合微球，其特征在于，是将艾塞那肽与保护剂同时包裹于卵磷脂中，形成艾塞那肽脂纳米粒后，将所述艾塞那肽脂纳米粒包封于高分子聚合物载体内制备而成；上述高分子聚合物载体的分子量为10000～90000，并溶解于混合有机溶剂中。制备得到的复合微球粒径均匀、艾塞那肽的包封率高，微球呈表面光滑的球形，平均粒径在1‑50μm之间，综合其表面光滑、包封率高和粒径均匀的特点，使得微球释放速率稳定、且可持久释放，从而可以降低给药频率，具有良好的患者顺应性。

【技术实现步骤摘要】
艾塞那肽复合微球及其制备方法
本专利技术涉及医药
，具体涉及一种艾塞那肽复合微球及其制备方法。
技术介绍
目前，蛋白多肽类药物在临床上应用主要以注射液和冻干粉针剂的剂型为主，为了达到疗效常常需要频繁地注射给药，导致用药顺应性低。为了提高蛋白多肽类药物的生物利用度、降低给药频率，开发蛋白多肽类药物长效制剂是一种有效的途径，其中长效注射微球应用前景最广阔。艾塞那肽是从美国大毒蜥唾液腺分离的GLP-1类似物Exendin-4的人工合成品，由39个氨基酸构成，是首个获得美国食品药品管理局(FDA)批准的GLP-1受体激动剂，也是目前唯一可以帮助Ⅱ型糖尿病患者同时控制血糖和体重的药物。艾塞那肽能促进血糖依赖性促胰岛素的分泌、重建胰岛素/胰高血糖素的比值、增加胰岛β细胞的数量、延迟胃排空并抑制食欲、增加胰岛素敏感性，在实现控制血糖水平的同时也能很好地控制患者体重，且艾塞那肽只对高血糖者有降糖作用，当患者血糖降至正常值时，药物的降糖作用就会消失，这极大地降低了用药者发生低血糖的风险。基于上述优势，现阶段艾塞那肽的临床应用非常广泛，占有的市场份额巨大，但其实际应用的制剂只有两种，即艾塞那肽注射液Byetta和缓释注射微球Bydureon。Byetta经皮下注射给药，需每天给药两次，频繁地注射造成患者顺应性较差。Bydureon是利用W/O/O凝聚法制备开发的一种艾塞那肽PLGA缓释微球制剂，一周一次皮下注射给药，相比于Byetta已经明显提高了患者顺应性。但是，相关药动学研究表明，Bydureon的体内释放行为存在不合理性，有明显的释放迟滞现象。而若采用传统的W/O/W复乳法制备的微球，但该方法制备得到的微球普遍具有药物突释现象。因此，制备一种稳定释药的缓释、长效微球，降低给药频率，从而提高患者的用药顺应性，是目前迫切需要解决的难题。蛋白多肽类药物长效注射微球的制备方法颇多，其中最常用的是W/O/W复乳法，该法先将蛋白多肽类药物溶解于内水相(W)中，再加至高分子材料的有机溶液(O)中，通过超声或搅拌的方法制成O/W初乳，而后将初乳加入外水相(W)搅拌形成W/O/W复乳，最后溶剂挥发干燥形成固化微球。W/O/W复乳法在制备微球的过程中，内水相的蛋白药物容易渗漏至外水相，易造成药物聚集在微球表层，从而导致较高的微球突释率。另一方面，蛋白多肽类药物的结构相对脆弱，在制备过程中药物会不可避免地与有机溶剂接触，并由于药物的两亲性结构而聚集在油水界面，最终可能引起蛋白多肽链结构变性或不可逆的大分子聚集，致使药物活性下降。
技术实现思路
基于此，针对上述问题，本专利技术的目的在于提供一种粒径分布均匀、释药速率稳定的艾塞那肽注射缓释微球制剂。为实现上述目的，本专利技术提供了如下技术方案：一种艾塞那肽复合微球，是将艾塞那肽与蛋白保护剂同时包裹于磷脂中，形成艾塞那肽脂纳米粒后，将所述艾塞那肽脂纳米粒包封于高分子聚合物载体内制备而成；所述高分子聚合物载体的分子量为10000～80000，并溶解于混合有机溶剂中。在其中一些实施例中，所述混合有机溶剂为丙酮和二氯甲烷，所述丙酮和二氯甲烷的体积比为(0.8～1.2)：1。在其中一些实施例中，所述高分子聚合物载体为聚乳酸-羟基乙酸共聚物，其分子量为20000-40000。在其中一些实施例中，所述乳酸-羟基乙酸共聚物的溶液的浓度为80-130mg/mL。在其中一些实施例中，所述的蛋白保护剂选自海藻糖、乳糖、甘露醇中的一种或几种，其质量为艾塞那肽的30％-60％。在其中一些实施例中，所述磷脂材料选自大豆卵磷脂、1-棕榈酰基-2-硬脂酰基卵磷脂、蛋黄卵磷脂、二棕榈酰基卵磷脂中的一种或几种。本专利技术的目的还在于提供一种艾塞那肽脂纳米粒的制备方法，具体技术方案如下：一种艾塞那肽脂纳米粒的制备方法，包括以下步骤：(1)将艾塞那肽和保护剂溶于水，得到的水溶液A后，将卵磷脂的醇溶液在温度为30-45℃的条件下滴加入所述水溶液A，得到艾塞那肽脂质囊泡混悬液；(2)将艾塞那肽脂质囊泡混悬液冷冻干燥除去溶媒，得到艾塞那肽磷脂纳米粒。本专利技术的目的还在于提供一种艾塞那肽复合微球的制备方法，具体技术方案如下：上述艾塞那肽复合微球的制备方法，包括以下步骤：(1)将艾塞那肽磷脂纳米粒均匀分散于高分子聚合物载体的有机溶液中，再加入含有乳化剂的水溶液B，高速剪切制备成S/O/W乳液；(2)将S/O/W乳液置于含氯化钠或聚乙烯醇的水溶液C中，搅拌，挥发有机溶剂、固化微球；(3)离心收集微球，用超纯水洗涤微球，冷冻干燥，即得所述艾塞那肽复合微球。在其中一些实施例中，步骤(1)所述高分子聚合物载体的有机溶液的浓度为80-130mg/mL，所述含有乳化剂的水溶液B中乳化剂的浓度为10-90mg/mL；所述艾塞那肽磷脂纳米粒与所述高分子聚合物载体的有机溶液的质量体积比为3-10mg/mL；所述高分子聚合物载体的有机溶液与所述含有乳化剂的水溶液B的体积比为1：(3～20)。在其中一些实施例中，所述卵磷脂选自大豆卵磷脂、1-棕榈酰基-2-硬脂酰基卵磷脂、蛋黄卵磷脂、二棕榈酰基卵磷脂中的一种或几种；所述醇溶液的醇为乙醇、正丙醇、异丙醇、叔丁醇中的一种或几种；和/或所述乳化剂为聚乙烯醇、吐温-60或者吐温-80中的一种或几种。基于上述技术方案，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术专利技术人通过先将艾塞那肽与其保护剂包裹于卵磷脂中形成艾塞那肽脂纳米粒，再与高分子聚合物载体一同溶解于混合有机溶剂中，采用混合有机溶剂与合适分子量的高分子聚合物包封艾塞那肽，制备得到的复合微球粒径分布均匀，微球呈表面光滑的球形，平均粒径在1-50μm之间，还具有较高的包封率，由于微球粒径分布均匀，各个微球间释放药物速率的差异很小，从而使得微球释放速率稳定。本专利技术将多肽类药物艾塞那肽与磷脂制备成艾塞那肽磷脂纳米粒，再制备成S/O/W乳液，该乳液通过挥发和固化，可得到艾塞那肽长效注射复合微球。该艾塞那肽长效注射复合微球与现有的W/O/W复乳法制备的微球相比，磷脂纳米粒的存在可以有效地减少艾塞那肽渗漏至外水相的几率，从而降低因其聚集在微球表层而造成的高药物突释率；另一方面，艾塞那肽磷脂纳米粒可有效减少药物与有机溶剂的接触，从而更好地保护药物的生物活性。因此，本专利技术提供的艾塞那肽长效注射复合微球呈表面光滑的球形，平均粒径在1-50μm之间，微球中药物活性高，突释率低(首日释放率为6％-16％)，药物释放速率稳定持久，释药曲线接近零级释药模式，体外释放周期可达30-70天。本专利技术对混合有机溶剂进行了优选，选用分子量为20000-40000的PLGA作为高分子载体，溶于混合有机溶剂为丙酮、二氯甲烷，该混合溶剂各组分(0.8～1.2)：1体积比混合，与制备得到的艾塞那肽复合微球的粒径分布更加均匀，艾塞那肽的药物释放速率趋势更加稳定。因此，本专利技术制备得到的艾塞那肽复合微球，具有更均匀的粒径分布和稳定的释药速率，应用时效果稳定、具有更好的患者顺应性。而且，本专利技术所述的制备方法，工艺方法易实现、易推广。附图说明图1A-D分别为实施例1-3的艾塞那肽长效注射复合微球和对比例1的微球扫描电镜图；图2A-D分别为实施例1-3的艾塞那肽长效注射复合微球和对比例1的微球粒径分布图；图3为实施例1的艾塞那肽磷脂纳米本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种艾塞那肽复合微球，其特征在于，是将艾塞那肽与蛋白保护剂同时包裹于磷脂中，形成艾塞那肽脂纳米粒后，将所述艾塞那肽脂纳米粒包封于高分子聚合物载体内制备而成；所述高分子聚合物载体的分子量为10000～80000，并溶解于混合有机溶剂中。

【技术特征摘要】
1.一种艾塞那肽复合微球，其特征在于，是将艾塞那肽与蛋白保护剂同时包裹于磷脂中，形成艾塞那肽脂纳米粒后，将所述艾塞那肽脂纳米粒包封于高分子聚合物载体内制备而成；所述高分子聚合物载体的分子量为10000～80000，并溶解于混合有机溶剂中。2.根据权利要求1所述的艾塞那肽复合微球，其特征在于，所述混合有机溶剂为丙酮和二氯甲烷，所述丙酮和二氯甲烷的体积比为(0.8～1.2)：1。3.根据权利要求1或2所述的艾塞那肽复合微球，其特征在于，所述高分子聚合物载体为聚乳酸-羟基乙酸共聚物，其分子量为20000-40000。4.根据权利要求3所述的艾塞那肽复合微球，其特征在于，所述乳酸-羟基乙酸共聚物的溶液的浓度为80-130mg/mL。5.根据权利要求1所述的艾塞那肽复合微球，其特征在于，所述的蛋白保护剂选自海藻糖、乳糖、甘露醇中的一种或几种，其质量为艾塞那肽的30％-60％。6.根据权利要求1所述的艾塞那肽复合微球，其特征在于，所述磷脂选自大豆卵磷脂、1-棕榈酰基-2-硬脂酰基卵磷脂、蛋黄卵磷脂、二棕榈酰基卵磷脂中的一种或几种。7.如权利要求1所述艾塞那肽脂纳米粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将艾塞那肽和保护剂溶于水，得到的水溶液A后，将卵磷脂的醇溶液在温度为30-45℃的条件下滴加入所述水溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴传斌，董妮，朱春娥，李静，李醒，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：广东,44