与A20结合的核因子κB抑制蛋白3在制备治疗脂肪肝及相关疾病药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了与A20结合的核因子κB抑制蛋白3在制备治疗脂肪肝及相关疾病药物中的应用。属于ABIN3的新用途。本发明专利技术以L02细胞系、ABIN3过表达L02细胞系、小鼠原代肝细胞、ABIN3过表达小鼠原代肝细胞为实验对象，通过棕榈酸、油酸联合诱导脂肪肝细胞模型，油红O染色结果显示，在相同浓度的棕榈酸、油酸联合刺激下，与L02细胞相比，ABIN3过表达L02细胞中红色脂肪滴的面积显著减小。同样的油红O染色结果趋势也在ABIN3过表达的小鼠原代肝细胞中观察到，表明ABIN3过表达对棕榈酸、油酸联合诱导的脂肪肝细胞中脂质的堆积具有明显的抑制作用。因此，ABIN3具有抑制肝脏脂质蓄积，保护肝脏的功能。

Application of nuclear factor kappa B inhibitory protein 3 combined with A20 in the preparation of drugs for treatment of fatty liver and related diseases

The invention discloses the application of nuclear factor kappa B inhibitory protein 3 combined with A20 in the preparation of drugs for treating fatty liver and related diseases. It belongs to the new use of ABIN3. In this invention, the L02 cell line, ABIN3 overexpressed L02 cell line, mouse primary hepatocyte, and ABIN3 overexpressed mouse primary hepatocyte were used as experimental object. The fatty liver cell model was induced by palmitic acid and oleic acid. The result of oil red O staining showed that, under the same concentration of palmitic acid and oleic acid, L02 cells were compared with L02 cells, ABI The area of red fat droplets in N3 overexpressing L02 cells was significantly reduced. The same trend of oil red O staining was also observed in ABIN3 overexpressed mouse primary hepatocytes, indicating that ABIN3 overexpression inhibited the accumulation of lipid in fatty liver cells induced by palmitic acid and oleic acid. Therefore, ABIN3 can inhibit liver lipid accumulation and protect liver function.

【技术实现步骤摘要】
与A20结合的核因子κB抑制蛋白3在制备治疗脂肪肝及相关疾病药物中的应用
本专利技术属于基因的功能与应用领域，特别涉及一种泛素链结合蛋白，即与A20结合的核因子κB抑制蛋白3(A20bindinginhibitorofNF-κBactivation，ABIN3)在脂肪肝及相关疾病中的功能和应用，以及ABIN3作为靶基因在制备预防、缓解和/或治疗脂肪肝及相关疾病药物中的应用。
技术介绍
非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholicfattyliverdisease,NAFLD)是患者虽无过量饮酒史，但是肝实质细胞却出现脂肪变性和脂肪堆积的病理特征的慢性肝脏疾病[1]。研究表明，大约10％的NAFLD患者会发展为非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholicsteatohepatitis,NASH)，而这些NASH患者中又约有20％在10年内发展为肝硬化。据报道NAFLD在发达国家的发病率较高，其中成人发病率为30％、儿童发病率为13％[2]。近年来，NASH已成为体检人群肝酶学异常的常见原因，并成为肝硬化前期病变之一，因此对NAFLD的研究越来越受到人们的重视[3]。目前虽然临床上某些疗法能够改善肝脏功能学和组织学的一些参数指标，但是关于NAFLD的确切治疗方法目前还没有建立。因此，发现参与NAFLD的特异性分子及信号传导通路，对进一步系统阐明NAFLD的发生发展机制，从细胞分子水平对NAFLD进行调控，探索新的防治NAFLD的治疗靶点，具有非常重要的理论和实践意义。对人类ABIN3蛋白mRNA启动子进行的分析显示，ABIN3能够在脂多糖(LPS)和TNF诱导的NF-κB活化的途径中大量表达。这揭示，ABIN3蛋白表达可能参与NF-κB的调控。与ABIN其他家族蛋白相似，人类ABIN3也能够结合A20并通过后者来编辑泛素链，从而达到抑制TNFR1、IL-1R等受体介导的NF-κB激活，但对IKK-β介导的NF-κB激活产生不了作用[4]。在人源细胞中，ABIN3能够抑制Toll样受体(TLR)、TNF信号诱导的NF-κB活性，其调控的机制是：首先，人类ABIN3蛋白具有能够结合NF-κB的AHD区域，后者能与NF-κB上的相应位点进行结合，来抑制NF-κB的活化。其次，ABIN3蛋白能够在单核细胞中强制表达，通过抑制IκBα细胞质的降解，进而抑制NF-κB的活化。除了能够在培养的细胞中抑制NF-κB的活化，研究还发现，腺病毒介导的ABIN3的过表达能够在小鼠肝脏中有效抑制LPS诱导的NF-κB的激活，从而部分地保护内毒素/氨基半乳糖诱导所引起急性肝衰竭和死亡[5,6]。但是关于本专利技术ABIN3在脂肪肝病中的功能及其应用目前尚未见报道。参考文献1.Paschos,P.andK.Paletas,Nonalcoholicfattyliverdiseaseandmetabolicsyndrome.Hippokratia,2009.13(1):p.9-19.2.Greenfield,V.,O.Cheung,andA.J.Sanyal,Recentadvancesinnonalcholicfattyliverdisease.CurrOpinGastroenterol,2008.24(3):p.320-7.3.Polyzos,S.A.,J.Kountouras,andC.Zavos,Nonalcoholicfattyliverdisease:thepathogeneticrolesofinsulinresistanceandadipocytokines.CurrMolMed,2009.9(3):p.299-314.4.Wullaert,A.,etal.,LIND/ABIN-3isanovellipopolysaccharide-inducibleinhibitorofNF-kappaBactivation.JBiolChem,2007.282(1):p.81-90.5.Ogushi,I.,etal.,NuclearfactorkappaBdecoyoligodeoxynucleotidespreventendotoxin-inducedfatalliverfailureinamurinemodel.Hepatology,2003.38(2):p.335-44.6.Freudenberg,M.A.,D.Keppler,andC.Galanos,Requirementforlipopolysaccharide-responsivemacrophagesingalactosamine-inducedsensitizationtoendotoxin.InfectImmun,1986.51(3):p.891-5.
技术实现思路
为解决上述现有技术的缺陷和不足，本专利技术的目的在于提供一种ABIN1基因的表达与脂肪肝及相关疾病之间的相互关系，提供一个用于治疗脂肪肝及相关疾病的靶基因ABIN1的新用途，进而把ABIN1应用于脂肪肝病的治疗。本专利技术的目的通过以下技术方案实现：本专利技术第一方面，提供与A20结合的核因子κB抑制蛋白3在制备保护肝脏的药物中的应用。优选地，所述药物具有抑制肝脏脂质蓄积的功能。本专利技术第二方面，提供与A20结合的核因子κB抑制蛋白3在制备预防、缓解和/或治疗脂肪肝及相关疾病药物中的应用。本专利技术涉及的与A20结合的核因子κB抑制蛋白3在制备预防、缓解和/或治疗脂肪肝及相关疾病药物中的应用，所述的药物的活性成分是与A20结合的核因子κB抑制蛋白3。本专利技术涉及的与A20结合的核因子κB抑制蛋白3在制备预防、缓解和/或治疗脂肪肝及相关疾病药物中的应用，具体的是与A20结合的核因子κB抑制蛋白3作为药物靶点筛选预防、缓解和/或治疗脂肪肝及相关疾病的药物，所述药物是提高与A20结合的核因子κB抑制蛋白3表达量的试剂。优选地，提高与A20结合的核因子κB抑制蛋白3表达量的试剂，给药方式为直接裸DNA注射法、脂质体包裹DNA直接注射法、金包被DNA基因枪轰击法、繁殖缺陷细菌携带质粒DNA法、复制缺陷腺病毒携带目的DNA法、PEG修饰蛋白药物注射法、脂质体包裹蛋白静脉注射法，或蛋白微球制剂皮下注射法。所述的与A20结合的核因子κB抑制蛋白3或ABIN3，包括基因或蛋白。所述的ABIN3基因在对象体内经转录翻译为与A20结合的核因子κB抑制蛋白3蛋白产物。所述脂肪肝及相关疾病包括但不限于：胰岛素抵抗、代谢综合征、肥胖、糖尿病、高血糖、高血脂症、单纯性肝脏脂肪变性、非酒精性脂肪性肝炎，肝纤维化、肝硬化、肝癌等。本专利技术通过试验确定了与A20结合的核因子κB抑制蛋白3的表达与脂肪肝及相关疾病之间的关系：本专利技术以正常人肝细胞L02细胞系、ABIN3过表达L02细胞系、小鼠原代肝细胞、ABIN3过表达小鼠原代肝细胞为实验对象，通过棕榈酸(PA)、油酸(OA)联合诱导的脂肪肝细胞模型，利用油红O染色和WB来研究ABIN3基因的功能。油红O染色结果显示，在相同的棕榈酸、油酸联合刺激下，与正常L02细胞相比，ABIN3过表达L02细胞中红色脂肪滴的面积显著减小。同样变化趋势的油红O染色结果也在ABIN3过表达的小鼠原代肝细胞中观察到，表明AB本文档来自技高网...

【技术保护点】
与A20结合的核因子κB抑制蛋白3在制备保护肝脏的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.与A20结合的核因子κB抑制蛋白3在制备保护肝脏的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物具有抑制肝脏脂质蓄积的功能。3.与A20结合的核因子κB抑制蛋白3在制备预防、缓解和/或治疗脂肪肝及相关疾病药物中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，脂肪肝及相关疾病包括但不限于：胰岛素抵抗、代谢综合征、肥胖、糖尿病、高血糖、高血脂症、单纯性肝脏脂肪变性、非酒精性脂肪性肝炎，肝纤维化、肝硬化、肝癌等。5.权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述的药物的活性成分是与A20结合的核因子κB抑制蛋白3。...

【专利技术属性】
技术研发人员：李红良，李枫，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42